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文档简介

1、植物学实验植物学实验的有关注意事项座位及显微镜使用安排课程的学时安排考核、考察要求实验报告的上交要求值日安排发放实验用工具盒(登记编号) 镊子(1) 解剖针(2) 双面刀片(1) 放大镜(1) 小手巾(1) 载玻片(4) 盖玻片(4)注意: 1、每位同学领取一套工具盒。 2、请妥善保管,并于本课程结束时交还给植物学教研室。 3、如有损坏,原价赔偿实验内容(一)显微镜的构造与使用方法(二)显微镜临时玻片的制作(三)植物细胞的绘图法实验一、显微镜的使用及临时玻片的制作一、实验目的要求掌握显微镜的构造及原理,熟练使用光学显微镜。了解显微镜使用的基本要求、注意事项及一般维 护方法。学习临时玻片制作及掌

2、握生物绘图的基本要求及方法。(一)显微镜的构造和使用方法分辨率: 能分辨清楚的物体的最小的两点中心的距离,称为分辨率。人肉眼的分辨率最高可达:0.10.2mm光学显微镜的分辨率最高可达:0.2m电子显微镜的分辨率最高可达:0.2nm1mm=1000 m=1000 000nm显微镜放大倍数物镜放大倍数 x 目镜放大倍数光镜的有效放大倍数可达1250倍透射电子显微镜用途:观察细胞内部的超微结构放大倍数:300万倍 分辨率:约为0.3纳米 透射电子显微镜-观察植物细胞的超微结构电镜下的线粒体扫描电子显微镜用途:观察器官、组织表面的形态和结构放大倍数分辨率用扫描电镜与光镜观察比较植物叶表面的形态扫描电

3、镜下的形态光学显微镜下的形态1、光学显微镜的构造光学系统物镜目镜聚光器虹彩光圈光源(或反光镜)机械装置镜座镜柱镜臂载物台镜筒物镜转换器调焦装置粗调焦螺旋微焦调螺旋一、光学显微镜的构造(一)机械部分:1、镜筒:镜筒的作用是保护成像配合保持一定的距离,一般 160mm。2、物镜转换器:安装低倍和高倍物镜3、 粗调焦螺旋:位于镜柱两侧的一对大螺旋,用于调节焦距,旋转一周可使载物台上升或下降 10 mm 4、细调焦螺旋:与粗调焦螺旋同轴的一对小螺旋,旋转一周可使载物台上升或下降0.1mm5、镜座:方形金属座,用以稳固和支持镜身。6、镜座:方形金属座,用以稳固和支持镜身。7、镜臂:亦称执手,连接镜筒与镜

4、柱,是用于执镜的部位。8、载物台:放置玻片的平台,中央有一通光孔、有固定制片的压片夹和推进器一、光学显微镜的构造(二)光学部分: 由成像系统和照明系统组成。成像系统包括物镜和目镜,照明系统包括反光镜和聚光器1、目镜:2、物镜:装在物镜转换器和上,短者为低倍镜( 4 、 10 ),长者为高倍镜( 40 ),其上刻有N.A 0.25 0.5等,为数值孔径(光线经过盖玻片引起折射后成光锥底面的口径数值,数值越大,吸收光线量越多,越清楚),3、聚光器:4、光圈:5、照明器或反光镜:镜座镜柱镜臂镜筒载物台物镜转换器粗调焦螺旋微调焦螺旋目镜物镜聚光器光源虹彩光圈二、光学显微镜的使用1、低倍镜的使用方法 (

5、1)取镜和放置:(2)对光:打开电光源,用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔 。左眼在目镜上观察 (右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。 ( 3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,将所要观察的部位调到通光孔的正中。 (4)调节焦距:双手转动(向后,载物台上升 )粗调节器(在内,大调解螺旋),使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处 ,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升 ,然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,向前缓慢转动粗调节器,使载物台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。 如果物象不在视野中

6、心可调节推片器将其调到中心 。 光学显微镜的使用高倍镜的使用方法 :(1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。 (2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。 (3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器(在外、小螺旋)的螺旋移动(向后)约0.51圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!) 果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节, 更换玻片标本或取玻

7、片时,必须向前转动粗调节器(切勿转错方向)使载物台下降,方可取下玻片标本。 推进器向前后左右,显微镜下,物象移动方向如何?二、光学显微镜的使用拿取显微镜对光使用低倍物镜(1)放置玻片标本;(2)调节焦距;(3)调节视野反差(4)认真观察使用高倍物镜(1)选好目标;(2)使用微调螺旋调整焦点;(3)调节光亮度和反差(4)认真观察显微镜使用后的整理 请使用台面上的玻片标本进行练习放置显微镜三、显微镜的维护1、经常性的维护()防潮如果室内潮湿,光学镜片就容易生霉、生雾。()防尘光学元件表面落入灰尘,不仅影响光线通过,而且经光学系统放大后,会生成很大的污斑,影响观察。 ()防腐蚀 显微镜不能和具有腐蚀

8、性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。 ()防热 防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。 三、显微镜的保护、光学系统的擦拭光学部分用用擦镜纸擦拭干净即行 。方法:先用干净的毛笔或吹风球除去镜片表面的灰尘。用擦镜纸从镜片中心开始向边缘作螺旋形单向运动。直至擦净为止。如果镜片上有油渍、污物或指印等擦不掉时,可用柳枝条裹上脱脂棉,蘸少量酒精和乙醚混合液(酒精80,乙醚20)擦拭。3、机械部分的擦拭 :可用软布擦拭。但不能使用酒精、乙醚等有机溶剂 二、临时玻片的制作材料:洋葱鳞叶的下表皮方法:撕片法步骤:特别注意: 观察临时装片时一定要加盖盖玻片,并将其四周溢出的水擦干。(三)生活细胞的观察洋葱鳞叶下表皮细胞观察与思考:在你的制片中是否每个细胞都具有细胞核?为什么?你如何解释不同细胞中细胞核在形态和位置上的差异?3、你能看见细胞核中的核仁吗?一般有几个?细胞核细胞壁细胞质液泡(四)植物细胞与组织绘图法生物绘图的要求:科学性、真实感、精细而美观、文字标注清晰。生物绘图的

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