土壤无机磷形态连续提取

1、磷形态分级试剂：1M NH4Cl、0.5M NH4F (pH8.2)、0.1M NaOH、0.3M NaCHO （柠檬酸钠）、1M NaHCO、0.25M H SO、2M HCl、 36573242M NaOH、0.8M H3BO3 （硼酸）、饱和NaCl、连二亚硫酸钠（保险 粉）1、1M NH4C1溶液:称取NH4Cl53.30g溶于约800mL水中，稀释至1L。2、0.5M NH4F 溶液（pH8.2）：称取 NH4F18.50g 溶于约 800mL 水中， 稀释至950mL，用2M NaOH调节pH至8.2 （用pH计测定），再稀 释至1L。3、0.1M NaOH溶液：称取NaOH 4.

2、00g溶于800mL水中，冷却后稀 释至1L。4、0.3M柠檬酸钠溶液：称取柠檬酸钠（N&CHQ,.2HO） 88.2g溶于3 6 5 72900mL热水中，冷却后稀释至1L。5、1M NaHCO3溶液：称取84.00g NaHCO3溶于约800mL水中，稀 释至1L。6、0.25M H2SO4溶液：加浓硫酸15mL于约800mL水中，冷却后稀 释至1L。7、2M HCl溶液:量取168mL浓盐酸加入约600mL水中，稀释至1L。8、2M NaOH溶液：称取NaOH 80.00g溶于800mL水中，冷却后稀 释至1L。9、0.8M硼酸溶液：称取硼酸（H3BO3）49.00g溶于约800mL热水

3、中， 冷却后稀释至1L。10、饱和氯化钠溶液：称取NaCl 400g溶于1L水中，搅拌溶解至饱和后过滤。操作步骤：1、（可溶性P和弱结合态P）：称取通过100目的风干土样0.500g, 置于50mL离心管中，加入1M NH4C1 25mL，振荡30min，3000 转离心5min，将上清液全部倒入50mL方瓶中，取2mL提取液 加入比色管，滴加2滴指示剂，用2M HC1和2M NaOH调色至 待测液微黄，用钼锑钪法测定。2、（A1-P）:在 NH4C1浸提过的土样中加入 25mL0.5M NH4F （pH8.2），振荡1h， 3000转离心5min，上清液倒入白色50ml方瓶中，取5mL提取液

4、加入比色管，加入0.8M H3BO3溶液 7.5mL，滴加2滴指示剂，用2M HCl和2M NaOH调色至待测 液微黄，用钼锑钪法测定。3、（Fe-P）：用饱和NaCl溶液清洗残渣两次（每次12.5mL），离 心后弃去清洗液。加入25mL 0.1M NaOH，振荡17h，3000转 离心5min，上清液倒入白色50ml方瓶中，用饱和NaCl溶液清 洗残渣两次（每次12.5mL），离心后一并倒入50mL白色方瓶 中。取10mL提取液加入比色管，滴加2滴指示剂，用2M HCl 和2M NaOH调色至待测液微黄（调色为黄色调整至无色），用 钼锑钪法测定。4、（ O-P）：向上一步提取过的土样残渣加入

5、20mL 0.3M Na3C6H5O7 柠檬酸钠和 2.5mL NaHCO3 85C水浴加热 15min，加入Na2S2O4（连二亚硫酸钠）0.5g，快速搅拌后继续加热15min， 3000转离心5min,上清液倒入50ml定容离心管中，用饱和NaCl 溶液清洗残渣两次（每次12.5mL），离心后一并倒入50mL定 容离心管中定容，将定容离心管开盖暴露在空气中数小时使剩 余的Na2S2O4完全氧化（若不能氧化，可采取向提取液中通入 空气的办法）。取3mL提取液加入比色管，滴加2滴指示剂， 用2M HCl和2M NaOH调色至待测液微黄（调色为黄色调整至无色），用钼锑钪法测定。若要校正过量柠檬酸

6、对显色的影响， 可在加酸性钳锑钪之前加入3mL 5%钳酸铵溶液。5、（Ca-P）：向上一步提取过的土样残渣加入25mL 0.25M H2SO4，振荡1h，上清液倒入白色50ml方瓶中，用饱和NaCl溶液清洗 残渣两次（每次12.5mL），离心后一并倒入50mL白色方瓶中。取20mL提取液加入比色管，滴加2滴指示剂，用2M HCl和2M NaOH调色至待测液微黄（调色为无色调整至微黄），用钼锑钪法测定。6、制作磷比色标准系列溶液时要加入相同的提取剂。但由于加入H3BO3溶液可完全消除浸提液中F-离子的干扰，因此在第2步（Al-P）的测定中，磷标准系列溶液中，不必加入NH4F和H3BO3。7、连二

7、亚硫酸钠极不稳定，易氧化和分解，受潮或露置在空气中 会失效，要注意防潮密封贮存在阴凉处。参考文献：Investigation of Soil Legacy Phosphorus Transformation in LongTerm Agricultural Fields Using Sequential Fractionation, P K edge XANES and Solution P NMR S/10.1021/es504420n | Environ. Sci. Technol. 2015, 49, 168-176Sequential Frac

8、tionation. Phosphorus was sequentially extracted using the Zhang and Kovar method for non-calcareous soils and divided into fractions of NH4C1-P (soluble and loosely bound P), NH4F-P aluminum phosphate (Al-P), NaOH-P iron phosphate (Fe-P), citrate-bicarbonate-dithionite P (CBD-P; reductant-soluble P

9、) and H2SO4-P calcium phosphate (Ca-P). The extracts were analyzed colorimetrically by the ascorbic acid method without digestion for molybdate reactive P (MRP) concentration or following persulfate digestion in an autoclave20 to determine solution TP concentration. Solution MRP was designated as inorganic P (Pi) in each fraction. Solution Po was calculated by TP minus Pi, although it may include complex Pi forms. For NH4Cl-P and H2SO4-P fractions, little Po was detected; thus,