内参基因的概念和作用._第1页
内参基因的概念和作用._第2页
内参基因的概念和作用._第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、内参基因的概念和作用内参即是内部参照，它们在各组织和细胞中的表 达相对恒定，在检测基因的表达水平变化时常用它来 做参照物。其作用是校正上样量、上样过程中存在的 实验误差，保证实验结果的准确性。借助检测每个样 品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的 结果才更为可信。一般要选择一个在处理因素作用的 条件下不会发生表达改变的基因作内参。在进行基因研究的过程中，实时反转录PCR也和传 统的mRNA定量方法如Northern b lot技术等一样， 要求使用参照基因以校正转录效率和cDNA用量，弥 补制备过程中样本纯度和浓度的差别，使不同样本之 间目的基因的比较成为可能，以期获得真实可靠的结 果

2、。大多数分析方法中这些差别可通过与内参照比较 处理消除。最普通的内参照是内源性参照基因，也叫管 家基因。管家基因：又称持家基因(house-keeping genes) 生物体各类细胞中都表达，其产物是对维持细胞基本 生命活动所必需的蛋白质编码的基因。如微管蛋白基 因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。是为维持 细胞基本生命活动所需而时刻都在表达的基因。管家基因表达水平受环境因素影响较小，而是在 个体各个生长阶段的大多数、或几乎全部组织中持续 表达，或变化很小。它的表达只受启动序列或启动子 与RNA聚合酶相互作用的影响，而不受其他机制调 节。管家基因高度保守并且在大多数情况下持续表 达，因此管

3、家基因常被用于分子技术一多位点基因分 析内参基因通常是各种看家基因，在细胞内组成稳 定性表达，有助于保持细胞的功能。理想的内参基因 应该满足以下条件：1,不存在假基因(Pseudogene), 以避免基因DNA的扩增；2,高度或中度表达，排除低 表达；3,稳定表达于不同类型的细胞和组织(如正常 细胞和癌细胞)，而且其表达量是近似的，无显着性 差别；4,表达水平与细胞周期以及细胞是否活化无 关;5,其稳定的表达水平与目标基因相似;6,不受任 何内源性或外源性因素的影响，如不受任何实验处理 措施的影响.近年来的研究发现：这些常用内参基因均存在缺 陷，在不同类型的细胞和组织细胞增殖和器官发育 的不同阶段体外培养各种实验条件等情况下它们的 表达量通常变异较大。正确的选择内参基因，很大程 度上依赖所研究的细胞或组织，不同的试验需要寻找 适合各自试验体系的特异性稳定表达的内参基因。然 而，合适内参基因的选择,需要在各种类型的细胞或组 织和各种试验条件下进行比较选择。理想的内参基因 应在各种试验条件下，各种

人人文库> 全部分类> 图纸下载 > 毕业设计

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论