MICM整合诊断急性白血病课件

1、MICM整合报告诊断病例病史简介1患儿女性，2岁，主因：间断发热两周，皮肤瘙痒一周，外院诊断急性白血病入院 2015年9月，患儿因“间断发热两周，皮肤瘙痒一周”就诊于当地医院，行骨髓穿刺术，形态原始细胞91%。未治疗入我院。一般状况差，上肢散在淤点，浅表淋巴结和肝脾未及肿大。形态学诊断BLBL血常规报告+分类计数三、检验诊断/结论初步诊断为急性白血病（AL），建议骨髓穿刺及免疫分型检查BM 10BMBMBM（组图）BMBMBM MPOBM MPO（组图）BM CEBM NAE酯酶双染（组图）BM PAS（组图）(一)骨髓象1.取材、涂片、染色良好，骨髓小粒(+)。2.骨髓增生II-级，M:E=

2、20.2:1。3.原始细胞占有核细胞69.4%，细胞大小不均，呈圆或椭圆形，部分细胞不规则, 细胞核呈圆或椭圆形，部分细胞可见扭曲、折叠，染色质呈颗粒状，核仁0-2个，胞质偏少或略丰富呈灰兰色，部分细胞质中可见数量不等的紫红色颗粒；胞体偏小的细胞染色质致密，胞质少。4.粒系占有核细胞3.4%，早幼粒及以下阶段可见。5.红系占有核细胞3.6%，为中、晚幼红细胞，成熟红细胞形态未见明显异常。6.淋巴细胞占有核细胞20.4%，形态未见明显异常。7.巨核细胞（2cm4cm）见11个，其中颗粒型9 个，裸核2个，双圆核巨核细胞可见，血小板散在可见。8.细胞裸核易见，未见寄生虫。形态学报告1（二）骨髓细胞

3、化学染色： 原始细胞MPO: -74% +16% +10% 原始细胞PAS:-51% +49%(弥漫、细颗粒，偶见粗颗粒) 原始细胞CE:-81% +19% 原始细胞NAE:-100% 原始细胞酯酶双染色：-83%,+17% (CE:+6%, NBE:+1%,双染:+10%)诊断：1.急性粒单细胞白血病（AML-M4） 2.混合表型急性白血病或AML伴淋系表达？ 请结合免疫分型形态学报告2流式细胞术免疫分型检测免疫分型：CD7,cCD3,TdT(T)免疫分型：CD13,CD33,MPO(M);幼稚单核诊断：混合表型急性白血病（T/髓系混合）：38.13%恶性原始细胞(T/髓系双表型）5.32%

4、幼稚单核细胞。检测结果：38.13%细胞（占全部有核细胞）表达CD34, CD7bri, CD99bri，CD56, CD117, HLA-DR, CD33, 部分表达 cCD3, cTdT, CD13，MPO,不表达CD19, CD15，CD36, CD11b, CD61, CD22，CD10, CD1a, CD14, CD64, CD4，CD8，CD3，CD2，TCR-rd，CD5,为恶性原始细胞（T/髓系双表型)；单核细胞占有核细胞15.27%，其中5.32%细胞（占有核细胞）为幼稚单核细胞。 欧洲白血病免疫分型研究组（EGIL）提出的免疫标记积分系统积分B细胞系T细胞系髓系2cCD79

5、acIgMcCD22CD3(c/m)抗TCRMPO1CD19CD20CD10CD2CD5CD8CD10CD117CD13CD33CD650.5TdTCD24TdTCD7CD1aCD14CD15CD642008年WHO细胞系别确定标准：髓系 MPO（流式细胞术、免疫组化或者细胞化学） 或 单核系分化（非特异性酯酶弥漫性阳性，或者CD11c、CD14、CD36、CD64、溶酶体，两个及以上阳性）T系 胞浆CD3 或 胞膜CD3（MPAL中比较罕见）B系 CD19强表达加下述标志中至少一个强表达：CD79a、胞浆CD22、CD10 或 CD19弱表达加下述标志中至少两个强表达：CD79a、胞浆CD2

6、2、CD10流式细胞免疫分型报告2流式细胞免疫分型报告3细胞遗传学检测细胞遗传学报告染色体标本制备采用24小时短期培养法G显带核型分析标准参照ISCN2013版进行对异常克隆的判断：至少2个细胞有同样的染色体增加或结构重排，或者，至少3个细胞有同样的染色体丢失，方可确任存在一个异常克隆。FISH实验选用美国Vysis公司探针，杂交等实验 条件按照探针说明书进行FISH分析标准参照ISCN2013版进行细胞遗传学报告2015-9-26FISH：ETV6-RUNX1双色双融合基因探针，结果：未见涉及ETV6基因重排细胞遗传学报告2015-9-26NCCN Guidelines Version 1.

7、2015 Acute Myeloid Leukemia细胞遗传学角度评估预后：中危xxxxxx分子遗传学检测分子遗传学报告 分子遗传学报告 血液肿瘤突变组分析（包括58种基因的突变热点或编码区全长）ALKCRLF2IL7RNPM1SH2B3ASXL1CSF3RJAK1NRASSRSF2ASXL2CXCR4JAK2NT5C2STAT3BCL2DNMT3AJAK3PAX5TCF3(E2A)BRAFETV6KITPHF6TET2CALREZH2KRASPIK3CATNFAIP3(A20)CARD11FBXW7MAP2K1PTENTP53CBLFLT3MEF2BPTPN11U2AF1CCND1GATA

8、2MPLRHOAWHSC1CD79BID3MYD88RUNX1WT1CEBPAIDH1NOTCH1SETBP1CREBBPIDH2NOTCH2SF3B1 体细胞突变基因BM突变比例NOTCH1p.S2513F35%ETV6 p.R105G29%EZH2p.K243N6%体细胞突变基因突变突变比例NOTCH1p.S2513F22%ETV6p.R105G31%RGS12p.G990R30%胚系突变基因突变（杂合）致病性FANCMp.R581C可能有害BRCA2p.N2452S？TP53c.920-5 CT？TEP1c.2098-4 TC？全外显子组测序分析结果58种血液肿瘤基因突变组分析结果1.

9、NOTCH1、ETV6、EZH2体细胞突变是导致该 患者急性混合细胞白血病表型的遗传学基础。2. 可能有害的FANCM突变，可能联合其他意义未 明的BRCA2、TP53、TEP1胚系突变，是该患者 早期（2岁）发生血液肿瘤的先天易患因素。 结果说明：1. 体细胞突变：（1）外显子测序中未检出EZH2 K243N突变，考虑与突变频率 较低（6%）有关。（2）RGS12为一种G蛋白信号调节因子，参与G蛋白偶联受信 号级联反应的负性调节；该蛋白可能参与肿瘤的发生。2. 胚系突变：（1）单个突变致病性判断：结合多种数据库信息和生物信息学 预测软件分析，考虑FANCM突变为可能有害突变，TP53、 BRCA2、TEP1突变为意义不明突变。（2）基因功能： FANCM和BRCA2均参与DNA的修复， TP53 为抑癌基因，参与DNA修复、细胞周期调节、应