HPLC法测定素清丸中黄芩苷的含量

1、HPLC法测定素清丸中黄芩苷的含量【摘要】建立HPL法测定素清丸中黄芩苷的含量。方法采用Phenenex18Geini2504.6，5色谱柱，柱温为室温，以甲醇-0.5%磷酸溶液50：50为流动相;流速为1.0l/in;检测波长：280n。结果黄芩苷进样量0.5012.506g范围内与峰面积呈良好线性关系r=0.9999,平均回收率为99.10%,RSD=0.50%n=5。结论该方法简便,结果准确,可作为本品质量控制的有效方法。【关键词】HPL素清丸黄芩苷【Abstrat】bjetiveTestablishaHPLethdfrthequantitativedeterinatinfBaialin

2、inSuqingpills.ethdsThedeterinatinasperfrednPhenenex18lun2504.6,5iththebilephasensistedfethanl-0.5%phsphriaidslutin50:50andthelunteperatureasabient.Theflrateas1.0l/in.Thedetetinavelengthassetat248n.ResultsTheethdshedagdlinearrelatinshipithintherangef0.5012.506gfBaialinr=0.9999,n=5.Theaveragereveryrat

3、eas99.10%ithRSD=0.50%n=5.nlusinTheethdissipleandaurateandanbeusedfrthequalityntrlfSuqingpills.【Keyrds】HPL;Suqingpill;baialin素清浓缩丸是由茯苓、黄芩、黄连、生苡仁等九味药组方而成，为连云港中医院制剂室制剂，用于清热化湿，主治湿热内蕴，口苦口干，口中粘腻，不思饮食，精神倦怠，大便不爽，舌苔黄厚，临床用于清热泻火、消炎利便，效果显著。为了确保制剂质量，笔者根据方中成分,选择其主药之一黄芩苷作为含量控制的指标,现参照相关文献资料14，建立用高效液相色谱法测定素清丸中黄芩苷含量的

4、方法，方法简便，重现性好，可用于该制剂的质量控制和评价。1仪器与试药aters-2695型液相色谱仪,aters-2996型紫外检测器，Eper色谱工作站；色谱柱：Phenenex18柱Geini2504.6，5；黄芩苷对照品中国药品生物制品检验所，批号1110715-202214；甲醇为色谱纯，磷酸为优级纯。素清丸为连云港中医院制剂室提供批号：20220521、20220612、20220803。2方法与结果21色谱条件流动相为甲醇：0.5%磷酸溶液50：50，流速：1.0l/in，检测波长：280n。柱温：室温；理论板数按黄芩苷计7500。22对照品溶液的制备精细称取黄芩苷对照品50.12

5、g，置50l量瓶中，加流动相超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储藏液。精细量取对照品储藏液5l置50l量瓶中,用流动相稀释到刻度，作为对照品溶液。23样品溶液的制备样品研细，精细称取的样品细粉3.12g用流动相50l,加热回流3h，然后转移置100l容量瓶中，超声30in使溶解，并用流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45水溶性滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。24线形关系的考察取对照品溶液，分别进样5、10、15、20、25l，即得含相当于黄芩苷0.5012、1.0024、1.5036、2.0048、2.506g的对照品溶液，测定峰面积，以黄芩苷质量为横坐标、峰面积Y为纵坐标，进展线性回归，

6、得出回归方程以及线性范围，Y=1.78107X6521，r=0.9999，黄芩苷进样量在0.5012.506g范围内峰面积与进样量呈良好线性。25进样精细度试验在上述色谱条件下，取黄芩苷对照品溶液重复进样6次20l,记录峰面积，RSD为0.6%。26重复性试验精细称取同一批号的样品批号：20220521，按照样品测定的方法操作重复操作6次，测得黄芩苷平均含量和RSD,结果说明：重复性试验RSD为1.6%，说明本法重现性较好。2.7加样回收试验精细称取含量的样品5份，每份参加精细称定的对照品混匀，照样品含量方法操作，计算回收率见表1。表1加样回收试验2.8稳定性试验取样品批号：20220521新

7、配的供试品溶液分别在0，1，3，5，8h进样10l,测定其中黄芩苷的峰面积，结果RSD为1.2%，说明供试品溶液在8h内稳定。2.9样品的含量测定取3批样品，按上述供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，依上述色谱条件测定含量，分别进样10l，记录色谱图，按外标法计算，结果见表2，图1。表2样品含量测定结果3讨论参考?中国药典?有关黄芩苷含量测定方法1,分别选用甲醇-0.5%磷酸溶液50：50；甲醇-0.1%磷酸溶液50：50和乙腈-0.5%磷酸溶液28：72三种流动相实验，黄芩苷的峰型没有太大差异，别离效果不太理想，但是采用甲醇-0.5%磷酸溶液50：50作为流动相，与样品周围的杂质峰可以完全分开，别离效果较为理性。用纯甲醇和流动相两种溶剂分别对样品进展超声提取,结果显示,仅仅用甲醇超声提取,样品提取不是很完全，选用流动相先加热回流3h，提取率高,再测定黄芩苷的含量，为了防止其他成分的干扰，每针样品进样分析时间不得少于35in。【参考文献】1国家药典委员会.中国药典一部.北京:化学工业出版社,2022，211.2徐群英，应佳.高效液相色谱法测定气管炎片中黄芩苷含量.中