




下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、学习好资料欢迎下载基因工程1(2016陕西师大附中月考)植酸酶,是酶的品种之一,在动物饲料加工中发挥重要作用。植酸酶能分离出植酸分子中的磷,将植酸(盐)降解为肌醇和无机磷,同时释放出与植酸(盐)结合的其它营养物质。(1)饲料加工过程温度较高,要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时,首先必须了解植酸酶的_,最终通过改变植酸酶的_,再通过基因工程得到新的植酸酶。(2)培育转植酸酶基因的大豆,可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞最常用的方法是_。(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率,科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过_方法转入猪的_中。将早期胚胎培养至一
2、定时期通过_方法,从而一次得到多个转基因猪个体。(4)若这些转基因植物被推广种植,可能会对生态环境产生怎样的影响?_。【解析】(1)蛋白质工程是根据蛋白质预期功能推断出相关结构,再根据结构推测氨基酸序列从而找到相同脱氧核苷酸序列,得到相关基因,通过该基因合成预期蛋白质。(2)目的基因导入植物细胞通常用农杆菌转化法。(3)目的基因导入动物受精卵通常用显微注射法。对转基因猪桑葚胚和囊胚进行胚胎分割和胚胎移植,可以一次得到多个转基因猪个体。(4)转基因植物能够分离出植酸分子中的磷,将植酸(盐)降解为肌醇和无机磷,从而减少磷肥使用,降低环境中磷污染程度;不利方面是该基因可能会随个体的杂交,扩散到环境中
3、去,造成基因污染。【答案】(1)空间结构基因序列(结构)(2)农杆菌转化法(3)显微注射受精卵胚胎分割和胚胎移植(4)减少磷肥使用,降低环境中磷污染程度;该基因可能会随个体的杂交,扩散到环境中去,造成基因污染。2(2016黄石期中)通过基因工程的方法,科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指:利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊,进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中,借助天然的种胚系统,形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题:(1)下列所示的黏性末端是由_种限制性核酸内切酶作用产生的。(2
4、)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞,此过程是基因工程操作步骤中的第三步,即_。获取目的基因时,如果基因比较小,核苷酸序列又已知,则可以通过DNA合成仪用化学方法直接_。(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合,目前经常使用的载体是_。(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的技术是_;其次还要检测_,方法同样是采用分子杂交技术;最后检测_,方法是_杂交。【解析】(1)限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割磷酸二酯键。题图显示的黏性末端有4种,因此是由4种限制性核酸内切酶
5、作用产生的。(2)基因工程操作步骤中的第三步是:将目的基因导入受体细胞。获取目的基因时,如果基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。(3)质粒是基因工程中经常使用的载体。(4)检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用DNA分子杂交技术;检测目的基因是否转录出了mRNA,采用分子杂交技术;检测目的基因是否翻译成蛋白质,采用抗原抗体杂交技术。学习好资料欢迎下载【答案】(1)4(2)将目的基因导入受体细胞人工合成(3)质粒(其他合理答案也可)(4)DNA分子杂交技术目的基因是否转录出了mRNA目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体3(2016上海七校联考)图1表示
6、含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp、BamH、Mbo、Sma4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题:(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_(基团)连接。(2)若用限制酶Sma完全切割图1中DNA片段,产生的末端是_末端,其产物长度为_。(3)若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma完全切割,产物中共有_种不同DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基
7、因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是_。(5)有关质粒描述错误的是()A质粒是能够自我复制的环状DNA分子B质粒是唯一的运载体C质粒上有多个酶切位点D质粒可在宿主外单独复制【解析】(1)基因重组技术的结构基础是DNA具有相同的结构。(2)将目的基因导入棉花的方法是农杆菌转化法;目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上,检测其方法是DNA分子杂交技术
8、。(3)基因工程育种的优点是目的性强,能打破物种的生殖隔离界限。(4)过敏反应的特点是发作迅速、消退快。【答案】(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3)4(4)BamH抗生素B同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接(5)BD4(2016三明一中月考)为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用_法从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。所含三种限制酶(Cla、Sac、Xba)的切点如下图所示。则
9、用_和_酶处理两个基因后,可得到_(填图中字母)端相连的融合基因。学习好资料欢迎下载(2)将上述融合基因插入右上图所示质粒的TDNA中,构建_并导入农杆菌中,将获得的农杆菌接种在含_的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落,再利用培养基震荡培养,可以得到用于转化的浸染液。(3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。该细胞通过_技术。可培育成转基因油菜植株。(4)提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据_的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检侧,可判断融合基因是否完成_。【解析】(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用PCR法从陆地棉基
10、因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因,在上述引物设计时,分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列,这样可以用Cla限制酶和DNA连接酶处理两个基因后,得到A、D端相连的融合基因。(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中,构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中,将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的浸染液。(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞,进一步筛选后获得转基因油菜。(4)提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据融合基因的DN
11、A片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成转录。【答案】(1)PCR(聚合酶链式反应/多聚酶链式反应)ClaDNA连接(答“连接”也计分)A、D(全对才得分)(2)基因表达载体(重组质粒/表达载体)四环素(3)植物组织培养(4)融合基因转录5(2016泰安二中检测)抗草胺磷(一种除草剂)转基因大豆的培育过程如图所示。(1)用_处理,获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”、含有抗四环素基因的“质粒”。其中质粒上“抗四环素基因”的作用是_。(2)图中应为_。(3)部分农杆菌不能在培养基(含四环素)上生长的原因是_。(4)在AD过程中,AB过程在恒温箱中_(填“避光”或
12、“光照”)培养,注意观察、记录_的生长情况。(5)转抗草胺磷基因成功的大豆植株内,抗草胺磷基因能够高效表达,其高效表达的观察指标是_。(6)从某种蛋白质的氨基酸序列出发,利用_方法获得目的基因,通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质。下列有关基因工程中运载体的描述,正确的是_。(多选)A能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一B一种运载体只能运载一种目的基因C使用的运载体有质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒等D基因表达载体的构建是一样的,不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异【解析】据图分析,来自矮牵牛的抗草胺磷基因属于目的基因,质粒中的抗性基因属于标记基因,表示基因表
13、达载体的构建;大豆细胞属于受体细胞,将重组质粒导入大豆细学习好资料欢迎下载胞的方法是农杆菌转化法;AB表示脱分化,BC表示再分化,CD表示形成试管苗。(1)用同一种限制酶处理“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”和含有抗四环素基因的“质粒”,便于形成相同的黏性末端。质粒上的“抗四环素基因”属于标记基因,作用是供重组质粒的鉴定和选择。(2)图中是由“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”和质粒形成的重组质粒。(3)未导入重组质粒的农杆菌不能在含有四环素的培养基上生长。(4)AB过程表示脱分化,在恒温箱中避光培养,有光时形成维管组织,而不能形成愈伤组织。(5)转抗草胺磷基因成功的大豆植株内,抗草胺磷基因能够高效表达,观
14、察指标是大豆植株对草胺磷有抗性。(6)从某蛋白质的氨基酸序列出发,利用人工合成方法获得目的基因。常见的运载体是质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒;作为运载体的必备条件是:能够在宿主细胞中复制并稳定保存,要有限制酶的切割位点,具有标记基因等;由于受体细胞有植物、动物、微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法不同,因此,基因表达载体的构建上也有所差异,不可能千篇一律;故选AC。【答案】(1)同一种限制酶供重组质粒的鉴定和选择(2)重组质粒(3)重组质粒未导入(4)避光愈伤组织(5)大豆植株对草胺磷有抗性(6)人工合成AC6某研究小组欲将已知抗盐基因导入原生质体培育抗盐菊科植物。请回答:(1)为获得大
15、量抗盐基因,可通过_技术进行扩增,也可将其连接到_上,通过大肠杆菌培养扩增。(2)制备叶片原生质体的酶混合液中,一般含较高浓度的甘露醇,其目的是避免制备的原生质体_。酶混合液需通过_灭菌,才能用于无菌原生质体的制备,整个无菌操作过程需在_中进行。(3)可通过_方法,直接将抗盐基因导入原生质体的细胞核。此外,还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出_,经持续分裂获得愈伤组织,进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。(4)利用带有标记的抗盐基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行_,验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。通过将扩大繁殖的再生植株转接到含有_的培养基,根据生长状
16、况初步筛选出抗盐植株。(5)为了获得大量该转基因植株,可将带腋芽的茎段转入适宜培养基中,获得大量_,然后转入生根培养基中诱导生根,形成再生植株。再生植株需进行_(不定项选择)。A无菌处理B锻炼C去除根部残留的培养基D逐步提高湿度处理后才能移种大田。【解析】(1)为获得大量抗盐基因,可通过PCR技术进行扩增,也可将其连接到质粒上,通过大肠杆菌培养扩增。(2)制备叶片原生质体的酶混合液中,一般含较高浓度的甘露醇,其目的是避免制备的原生质体吸水胀破。为了防止酶加热变性和原生质体加热失活,需要单独用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌,才能用于无菌原生质体的制备;为了避免杂菌污染,整个无菌操作过程需在超净台中进行。
17、(3)将抗盐基因直接导入原生质体的细胞核,可采用显微注射方法。导入后的原生质体再生出细胞壁,并且通过植物组织培养技术使其脱分化形成愈伤组织,再分化获得再生植株并扩大繁殖。(4)可通过分子杂交技术来验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。欲初步筛选出抗盐植株,可将扩大繁殖的再生植株转接到含有较高浓度NaCl(盐)的培养基上继续培学习好资料欢迎下载养,观察其生长状况。(5)为了获得大量该转基因植株,可借助植物组织培养技术,将带腋芽的茎段转入适宜培养基中培养以获得大量丛状苗,然后转入生根培养基中诱导生根,形成再生植株。再生植株移种大田前,需去除根部残留的培养基,并进行锻炼,以使其能够适应移栽后的
18、环境,提高成活率。【答案】(1)PCR质粒(2)吸水胀破过滤(G6玻璃砂漏斗)超净台(3)显微注射细胞壁(4)分子杂交较高浓度NaCl(盐)(5)丛状苗BC(答案不全不得分)7(2016天津联考)科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉,其过程大致如图所示。下列是有关基因工程和细胞工程的问题,请据图分析回答:(1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内,原因是_。(2)上述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用了_法,这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是_,还需要通过检测才能知道,检测采用的方法是_。(3)利用基因工程技术培育抗虫棉,相比诱变育种和传统的杂交育种方法,具有_和_等突出的优点,但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比,杂交育种和诱变育种方法主要具有_的优点。(4)某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后,出现鼻塞流涕,皮肤瘙痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失,该现象很可能是_。【解析】(1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内,原因是组成细菌和植物的DNA分子的空间结构和化学组成相同。(2)述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用了农杆菌转化法;目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞染
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 有效的供应链管理与成本控制
- 2025年零售门店数字化门店安全监控报告
- 快消品包装2025年包装设计理念与可持续发展研究报告
- 2023年理学营养竞赛试题
- 2023年考试复习题库合集注册税务师考试税法一真题
- 2023年畜牧兽医中级职称试题及答案
- 二零二五年度房产交易市场拓展与品牌合作合同
- 二零二五年度电子商务合同效力认定与法律适用合同
- 二零二五年度医疗器械购销合同样本
- 二零二五年度贵重物品保管及保险服务协议
- 2024年连云港市教育局直属学校教师招聘真题
- 消防维保承包合同协议书
- 五年级下册数学期末综合测试卷(附答案解析)
- 超市水果供货协议书范本
- 设计师工作总结素材
- 口腔科完整病历书写规范与范例
- 药企市场部培训
- 2024年税务师考试税法一历年真题与答案解析试题与答案
- 农药生产台账管理制度
- T/NAHIEM 86-2023智慧医院医用耗材精细化管理建设应用标准
- 汽车行业VDA6.3过程审核检查表及评分标准
评论
0/150
提交评论