第一章植物组织培养实验室构建ppt课件

1、第一章 植物组织培育实验室构建主讲 生物科学与技术学院薛春丽联络：3746885 :xcl_biology2126 教学目的：1了解组织培育实验室的设计原那么；2掌握组织培育根本规划以及相应仪器设备；3了解组培苗消费规模与实验室组建经费预算；3可以根据需求和实践情况科学设计组织培育实验室。 重点：组织培育实验室设计与经费预算难点：组织培育实验室的设计一、组培实验室设计原那么：、防止污染、控制污染、保证无菌操作。、按照工艺流程科学设计，到达经济、适用和高效。、构造规划合理，任务方便，节能、平安。、规划设计与任务目的、规模及当地条件等相顺应。第一节实验室设计二、组培实验室根本组成洗涤室药品室称量室

2、培育基制备室灭菌室无菌培育基储放室无菌操作室区培育室区细胞学察看室驯化移栽温室可以根据实践条件进展合并化学实验室预备室1地理位置要求：地形开阔，地势高燥，交通运输、水电方便。环境清洁，空气清新，周围50米以内要 没有酱醋作坊、牧场、畜禽圈舍及饲料库和“三废排放的工厂。2接种室要求：为减少杂菌污染接种室房间不宜过大，尽量密闭，并设有缓冲间，再进入接种操作间。3培育室要求：最好建立在房屋南面，保温、通风且光线充足的房室，培育室墙面应尽量设有大窗户，以便能最大限制采用自然光，节药能源。三、组培实验室的设计 1、实验室选址要求 根据组培消费流程合理设置，使其构成一条流水作业的消费线，以提高工效和保证组

3、培苗生长的无菌环境，组培实验室应按照： 配制培育基蒸汽灭菌分别或接种无菌培育的流程进展平面规划，以提高工效和保证组培苗生长的无菌环境。2、组培实验室的规划 组培实验室规划图示仓库预备室灭菌室接种室培育室办公室温室大棚门口仓库预备室灭菌室接种室培育室办公室温室大棚入口红河学院植物组织培育实验室平面图一、预备室1、功能：完成培育基配制所运用的各种药品的贮备、称量、用品洗涤、培育基配制与分装等任务。2、主要设备器具： 药品柜、冰箱、电子天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培育基配制用玻璃仪器。3、设计要求：面积普通为25-50m2,要求宽阔、亮堂、通风、枯燥、便于多人同时操作，配水源和排水设备。有条件时可

4、将洗涤室、药品室和培育基配制室分开。第二节 实验室的功能及要求二、灭菌室1、功能：用于培育基、器皿、工具及其它物品的消毒灭菌。2、仪器及器具配置：高压灭菌锅、高压灭菌器、干热灭菌箱、细菌过滤器等3、设计要求：面积普通为10-25m2,要求通风、防潮、配水源和排水设备，电源要求较平安，设漏电维护安装。消费规范较小时，灭菌室可与洗涤室、药品室和培育基配制室合在预备室。三、无菌操作室接种室：1、功能：主要用于植物资料的消毒、接种、培育物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需求进展无菌操作的技术程序。2、主要设备：紫外光源、超净任务台、消毒器、酒精灯、接种器械接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针等。

5、3、设计要求： 接种室宜小不宜大，普通1050平米，要求地面、天花板及四壁尽能够密闭光滑，易于清洁和消毒。配置推拉门，以减少开关门时的空气扰动。接种室应设有缓冲间，面积5m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。接种室和缓冲间要求在适当位置安装 紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 1、功能：培育室是将接种的资料进展培育生长的场所。其大小可根据消费规模而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原那么。周围墙壁最好有绝热防火的性能。2、主要设备：光照培育箱、生态培育箱、振荡培育箱、恒温培育箱、培育架、 紫外光源等。四、培育室：3、设计要求：1培育室的大小可根据消费规模和培育架的大小

6、、数目及其他附属设备而定。2可以控制光照和温度。3坚持清洁，远离污染源，防止微生物污染。4可以通风、降湿、散热。5培育室应设有缓冲间或走廊。1、功能：该室用于对组培苗的炼苗与移栽。2、主要设备：苗床、喷雾系统、加湿机、二氧化碳机、配比施肥机等。3、设计要求：面积视消费规模而定，要求环境清洁无菌，具备控温、控湿、遮荫、防虫和采光良好等条件。五大棚或温室第三节、组培根本仪器和设备一、玻璃器皿1、培育器皿：试管、三角瓶、培育皿、果酱瓶等。2、分注器：漏斗、移液管、量筒等。3、其它玻璃器皿：烧杯、容量瓶、试剂瓶等。培育瓶移液枪1、镊子 2、解剖刀 3、剪刀 4、接种针 5、电热灭菌器 6、电炉 7、推

7、车等 8、锅具等接种器具灭菌器电炉推车二、金属器械三、根本仪器与设备、灭菌设备：1包括：卧式灭菌锅、立式灭菌锅、手提式灭菌锅、高压锅等。主要用于培育基、蒸馏水和接种器械的灭菌。2任务原理：利用高压灭菌锅产生的高压湿热水蒸汽温度121-126、压力0.11-0.15MPa，来到达杀灭细菌和真菌的目的。手提式高压灭菌锅的构造、 接种设备：1包括：超净任务台、无菌接种箱等，主要用于培育资料的消毒及接种。2任务原理超净任务台：风机将空气经过微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超极滤清器后吹送出来，除去大于0.3微米的尘埃、真菌310微米和细菌孢子0.41.0微米等，构成延续不断的无尘无菌的超净空气层流，在超净

8、台面制造无菌区。单人单面超净台双人单面超净台单人双面超净台老式接种箱1包括：恒湿箱、光照培育箱、植物生长箱、生态培育箱、振荡培育箱、光照培育架等,主要用于接种后资料的培育。3.培育设备：培育架普通设4-5层，最低一层离地高约10cm，其他每层间隔30cm左右，培育架高1.7m左右或根据培育室层高而定。其宽度普通为60cm，长度根据日光灯长度而设计，每架培育架可放置培育瓶数为：17*7*2*5=1190瓶/架。电源开关分组控制，可根据培育需求调理开灯数量以控制光照强度，可改换不同光质灯管，以满足对不同光质的要求。光照培育架的设计：包括分析天平，电子天平，药物天平等，用于制备母液时培育基组成成分的

9、称取。如一些需求量少的激素和微生素类物质，天平的准确度要到0.0001g，这就要求准确度更高的分析天平。4、称量设备：1冰箱：用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的贮藏，以及某些资料的预处置。5、其它辅助设备2空调：用于接种室和培育室温度的控制。3消毒机：臭氧机、等离子发生器：4除湿机用于枯燥洗净后的玻璃器皿，还可用80的温度烘干组织培育植物资料以测定干物质。器皿包装1601702h枯燥箱运用留意70以下开箱取物，勿超180随用随开包 5枯燥箱 6纯水机与蒸馏水发生器：7酸度计：用于校正培育基和酶制剂的PH。8光学显微镜、解剖镜等。用于茎尖的分别及不同时期培育物的察看及图像资料的搜集。第四节

10、培育条件的调控一、温度：二、光照：、光照强度：1000-5000L、光照时间：8-12h、光质：1蓝光促进苗的生长和分化2红光促进根的分化3暗培育使培育物停留在芽的分化三、湿度培育瓶内湿度100%室内湿度30-40%四、气体：氧气、二氧化碳、乙烯不利五、浸透压：培育资料浸透压等渗或略低于培育基浸透压六、PH值：5.6-6.5第五节 实验室组建经费预算一、组培苗消费方案与消费规模1、消费方案的制定： 销售量=实践消费量1-损耗率5-10%移栽成活率90-95%2、实践消费量Y决议于无菌母株苗数m、每周期增殖倍数X和年增殖周期数n，其公式为：Y=mXn二、消费规模1、存瓶增殖总瓶数=月方案消费苗数

11、/每个增殖瓶月可产苗数2、月方案消费苗数=每个操作人员每天可接苗数月任务日 人员数三、年产100万苗组培实验室的规划设计销售量=实践消费量1-损耗率5-10%移栽成活率90-95%假设年产100万苗，那么实践消费苗数= 100万苗/年90% 90% 子 =123.457万苗假设每瓶苗数为20苗，那么实践消费瓶数=123.457万苗 20苗/瓶6.173万瓶假设年增殖周期数为n=3，那么每批须消费瓶苗= 6.173万瓶3=2.058万瓶每架培育架为5台，每台长放17 瓶，宽放7瓶，可放两层 5台/架17瓶7瓶2层=1190瓶/架那么每批需培育架=2.058万瓶 1190瓶/架=17.291架20

12、架年产100万苗组培工厂所需面积1、摆放20架培育架的培育车间面积约需：1.2m+0.6m间距0.6m+0.6m间距20架=43.2m2 50m220000瓶200瓶/天人25天=4人2、摆放4台超净任务台所需接种车间面积：接种间(1m+0.9m间距)(0.7m+0.9m间距)台+缓冲间2.0m 1.5m=15.16m2 20m2 3、配制与灭菌车间约需：30m2 4、其它办公室等：20m2四、年产100万苗组室的经费预算项目面积设备用具名称、数量单价（元）小计配制与灭菌车间30 m2立式高压灭菌锅2台6500.0013000.00分析天平(0.1mg)1架4000.004000.00电子天平

13、（0.01g）1架500.00500.00冰箱1台3000.003000.00药品5000.005000.00培养容器5万个0.8542500.00玻璃器皿800.00800.00其他小型实验用具1000.001000.00接种车间20 m2超净工作台5台5000.0025000.00接种工具30套(三镊、两刀、一剪)120.003600.00灭菌器10个400.004000.00培养车间50 m2培养架25架500.0012500.00空调1台4000.004000.00其它20 m25000.005000.00房租费6000.006000.00改建费20000.0020000.00合计 1

14、49900.00150000万元1、掌握组培实验室设计的根本原那么： A、防止污染、控制污染、保证无菌操作。B、按照工艺流程科学设计，到达经济、适用和高效。C、构造规划合理，任务方便，节能、平安。D、规划设计与任务目的、规模及当地条件等相顺应。2、了解组培实验室的总体要求：3、了解组培实验室的规划：根据消费流程规划，以提高工效和保证无菌。4、熟习组培实验室的根本组成：预备室、接种室、培育室等5、熟习组培实验室的根本设备：灭菌锅、超净台、培育架等6、了解组培实验室的组建经费预算：本章小结：课后作业、根据所学知识，设计一个面局1000平方，投资30万元左右的组织培育实验室。要求按比例绘制实验室规划

15、图，把所需主要设备在规划图中绘出，并经过淘宝查询相关仪器设备用品价钱，给出详细经费预算表。1000元搞定一个家庭式袖珍的组培室他信不信？一、仪器设备及器具1、家用高压锅 1个 最好大一点的，装的东西多一点。用于培育基、无菌水等的消毒。这个东西家家都有，能够不需求买吧？买的话是元左右2、接种箱 无菌箱1个 ，需求本人自制，用一些木板和一块玻璃和二尺布料，大约需求0元钱抽油烟机罩改装也行。3、药用天平1架 最好是500g称量的，小一点也可以 ，大约100元，假设口袋里钱不够，就去药店他买一个称中药用的戥子，选称量100g的，最多只需10元钱。主要用来称琼脂、糖等物品。4、不锈钢锅或铝锅煮汤、面条的

16、那种这个家家都有的，可以不去买。一定要买元搞定。5、搅拌和分装培育基用的调羹一个，就是在学校吃饭用的那种长柄的，用于煮制和分装培育基，一定要买5元搞定。 6、培育用的瓶子假设干，可以去买现成的，200ml带盖的0.60元一个，我最喜欢运用的就是医院里丢弃的200ml的盐水瓶,经济实惠，不要钱。7、牛皮纸、橡皮圈或棉线假设干，用于包瓶头和扎包头纸用，牛皮纸可以去找用过的包装纸，橡皮圈或棉线一元钱买一大把。8、酒精灯1盏、解剖刀1把，刀片假设干、镊子2把、10ml、100ml量筒各一个，2ml移液管1只量筒和移液管可用针筒替代，药棉假设干，加在一同要不了100元钱。以上仪器设备及器具合计：元二、根本药品药品只需购买以下几种就行了：1、MS培育基共19种，混合培育基90-150元/500g2、酒精(普通500ml)7.00元可以到医院或药材商店去买3、精细试纸PH 5.47.0一本 2.00元 运用时撕成小块，一本可以用很长的时间4、漂白粉或漂白精500克5.00元可以到医院或药材商店去买5、琼脂普通500克.00元6、白糖食用500克2.50元7、福尔马