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文档简介

1、第二节植物的克隆 试管苗1一、植物组织培养2无菌环境中3离体、消毒的植物器官、组织或细胞植物体根、芽愈伤组织胚状体(外植体)诱导出芽和根植物组织培养的一般程序4切取接种1、获得外植体(已分化)获得离体、消毒的植物器官、组织或细胞愈伤组织脱分化2、形成愈伤组织愈伤组织:一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 (细胞排列疏松、无规则)脱分化:已经高度分化的植物细胞,经过诱导重新恢复了分裂能力,产生愈伤组织的过程,又称去分化。愈伤组织形成条件;适宜温度、光照、 pH和无菌环境。无机物、有机物和植物激素(生长素,细胞分裂素)53、形成胚性细胞(愈伤组织 胚性细胞 )再分化胚状体幼苗再分化:脱

2、分化产生的愈伤组织经培养,重新分化根或芽等器官的过程。植物组织培养的优点:繁殖速度快、不受季节限制、工厂化生产、幼苗无毒保持优良性状胚状体胚性细胞试管苗胚性细胞特征:细胞质丰富、液泡小而细胞核大。6 植物体的每个生活细胞都具有发育成完整植株的潜能。植物细胞的全能性细胞能培养成一个完整的植株? 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 为什么?1、概念:2、原因:植物克隆的理论基础是: 植物细胞的全能性73、植物细胞全能性的体现(1) 受精卵的全能性最高 (2) 植物细胞的全能性动物细胞(3)不同植物或同一植物的不同基因型的个体,细胞的全能性表

3、达程度不同 。 受精卵生殖细胞体细胞 4、全能性的表达条件:离体状态、营养物质、激素、其它外界条件8植物组织培养的培养基无机营养物质:水和矿质元素有机营养物质 含N物质:包括维生素和氨基酸 碳源:2%5%的蔗糖 琼脂:起凝固支持作用 植物生长调节剂:(生长素,细胞分裂素) PH值:5.06.0条件 含有全部营养、成分的培养基、无菌环境、适合的PH、一定的温度、空气、适时光照等。9应用1: 培养过程中,在培养基上需加入蔗糖,培养时需要照光,那么,培养的植物到底是自养型还是异养型?光的作用是什么?对于上述疑问,某研究性学习小组进行了下列实验:一组在培养基中加30%的蔗糖,另一组不加蔗糖,接种后,每

4、组再分成两个小组,分别在光下和暗中培养。1个月后,观察植物体生长、分化情况,结果为下表:培养条件 加蔗糖不加蔗糖 光 正常生长,分化 不生长,死亡 暗 只生长,不分化 不生长,死亡你能得出什么结论? 蔗糖为生长、分化的必需成分(提供能量),光促进细胞分化。 10应用1:某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外共他均相同。下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是什么?污染主要来源于组织培养所用的离体组织;污染主要不是培养基灭菌时间短造成的;调节培养基pH不能解决污染问题;调节培养温度不能解决污染问题。113、植物组织培养的应用培养周期短、繁殖率

5、高(珍稀、濒危物种)培育无病毒植物保持母本的优良形状制成人工种子,解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题人造种皮胚状体或不定芽或顶芽或腋芽.人工胚乳或子叶人工种子的结构为了促进胚状体的生长发育,可以向其中加入哪些物质?人工种子12二、植物细胞培养(克隆)主要几种技术:1、组织培养2、悬浮细胞培养3、原生质体培养4、单倍体培养 通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比,诱导愈伤组织生芽生根而形成再生新的植株。通过液体悬浮培养使愈伤组织分散成单细胞,经适宜培养基中成分的诱导,可发育成胚状体,从而形成新株。原生质体:去除细胞壁后的植物细胞。用适当方法进行原生质体培养,也可以获得新植株。用花药离

6、体培养方法获得单倍体植株。131、 下图是植物组织培养的简略表示。据此回答:(1)表示,它能被培养成为的根本原因是。(2)表示,它与相比分化程度,全能性。(3)若想制作人工种子,应该选用(填编号)。(4)若是花药,则是,继续对其使用处理可获得正常植株,该过程称为。(5)若是胡萝卜根尖细胞,则培养成的的叶片的颜色是,这说明根尖细胞。(6)若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物紫草素,培养将进行到(填编号)。 离体的植物细胞、组织、器官 具有植物细胞全能性 愈伤组织 低 高 单倍体植株 秋水仙素 纯合 单倍体育种 绿色 含有与叶绿体形成相关的基因 141.器官培养: 指以植物的根、茎、叶、花、果等

7、 器官为外植体的离体无菌培养。三、细胞培养和组织培养 指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。 2.细胞培养:3.器官的发生和形态建成技术 4.意义通过平衡的植物激素配比进行调控15如何剥离细胞壁呢?四、原生质体培养1.原生质体培养用纤维素酶、果胶酶处理方法植物细胞0.50.6mol/L的甘露醇(较高渗透压)纤维素酶和果胶酶球型的原生质体原生质体为什么要加较高渗透压的甘露醇呢?防止原生质体吸水胀破植株植物细胞除去壁后的部分16发光基因发 光 树如何培育发光树呢?2.原生质体培养技术的应用17提取目的基因(发光基因)目的基因与运载体结合导入受体细胞(原生质体)检测发光与否原生质体培养18白菜甘蓝

8、如何实现?19植物体细胞杂交植物细胞 A(番茄)植物细胞 B(土豆)原生质体 A原生质体 B方法?促融方法?类型?杂种植株(番茄土豆)愈伤组织杂种细胞为什么可融合?去除细胞壁脱分化人工诱导原生质体融合再生出细胞壁融合的原生质体再分化融合完成的标志?酶解法物理:离心、振 动、电刺激化学:聚乙二醇 (PEG)细胞膜的流动性AA、BB、AB20 杂交株同时具有马铃薯和番茄的一些形态特征,但没有产生可结实的花、果实和真正意义上的块茎,不能产生经济效益。 主要原因:生物的基因表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,杂交株具有两个物种的遗传物质,但表达互相干扰。泡马豆(pomato)成果:克服不同

9、生物远缘杂交的障碍, 出现自然界没有的新品种。未解决的问题:未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲 代的优良。211“白菜甘蓝”是用植物细胞工程的方法培育出来的,培育 过程不涉及 A基因的选择表达 B同源染色体分离 C制备原生质体 D形成愈伤组织B2马铃薯是无性繁殖的作物,体内容易积累病毒,会导致其 品质变差。目前对它进行脱毒处理最好的办法是( ) A采用茎尖组织培养技术获得植株 B采用基因工程技术培育抗虫植株 C采用诱变育种培育抗性植物 D采用杂交育种培育抗性植物A3.下列不能作为植物组织培养的材料是:A、秋海棠的叶 B、马铃薯的块茎C、成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞D总结:植物细胞工程概

10、念:应用:224.下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法,不正确是A、已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的 细胞的过程B、已经分化的细胞转变为具有分生能力的薄壁细胞,进而形 成植物愈伤组织的过程C、离体的植物组织在一定的条件下分化出根和芽的过程D、离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织的过程中必须经过 有关激素的诱导5.在植物器官培养过程中,可以通过适当调整植物激素的比例, 达到调控器官的发育,如适量的激动素和细胞分裂素配比可 以诱导芽的分化. ( )6.植物细胞工程技术就是在原生质体培养的基础上的原生质 体融合技术。 ( )231、细胞分化是生物界普遍存在的一种生命现象,下列不

11、正确的是 A分化发生在生物体的整个生命进程中 B分化是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果 C未离体的体细胞不会表现出全能性 D分化过程中遗传物质发生了改变D2、将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时,下列条件中不需要的是 A、具有完整细胞核的细胞 B、一定的营养物质和植物激素 C、离体状态 D、导入指定基因D3、植物组织培养过程中的脱分化是指 ( ) A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C.植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程C245植物细胞表现出全能性的必要条件是( )A.给予适宜的营养和外界条件B.导入其他植物细胞的基因C.脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件D.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内6细胞具有全能性的原因是 ( )A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整

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