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文档简介
1、CL-BIII八通道残留农药测定仪运用阐明上海博纳新技术研讨所2006年4月.农残常识1 有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的特点。两类农药的作用机理均为抑制动物体内乙酰胆碱酯酶的活性,破坏神经传导,引起一系列的神经中毒病症,直至死亡。二者的主要区别在于:有机磷类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的,而氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是可逆的 。.农残常识2 酶抑制率法和酶系酶源:国家规范GB/T 5009.199-2003引荐的酶抑制率法能方便、快速、准确、本钱低廉检测出农产品中的农药残留,也同时一定了乙酰胆碱酯酶作为快速检测引荐试剂的活性量和详细要求。近年来,我们经过对动物
2、源和植物源的多种丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶进展检测实验和比较研讨,发现乙酰胆碱酯酶对农药的检测敏感度和综合目的优于丁酰胆碱酯酶;确定了有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酸有较专注性的抑制造用;分析出在抑制率70%以下,大多数农药浓度和乙酰胆碱酯酶抑制率呈较好的线性关系,并能实现对单种农药的定量分析;处理了酶的活性和稳定性控制等技术 .农残常识3 什么是间接比色法:由于只需当底物与产物之间,在光学性质或其它理化性质有显著差别时,才能够直接用分光光度计法测定,因此对酶活性浓度的监测大多是采用间接监测法。如对胆碱酯酶的测定:底物硫代乙酰胆碱及酶水解产物硫代胆碱和乙酸并不具有颜色,不能用分光光度计法测
3、定。所以必需设法在原来反响体系中添加一些试剂,这些试剂必需不与酶作用也不影响酶活性,同时又能与酶反响物迅速作用,产生可以被直接测定的物质。这就产生了Ellman的胆碱酯酶测定法即间接延续监测法。目前国内大多厂家消费的快速农药测定仪都采用了 Ellman的胆碱酯酶测定法即间接比色法。该方法经过监测底物硫代乙酰胆碱,酶水解产物硫代胆碱与添加的二硫代硝基苯甲酸DTNB作用立刻生成黄色化合物的反响速度来测定酶活性变化。.农残常识4 什么是延续监测法:50年代,Warburg首先用分光光度计测定酶的活性。该方法不需停顿酶反响就可测定反响物的变化,容易察看到反响的整个过程和干扰情况经过绘制反响曲线。因此逐
4、渐取代了固定时间法成为目前测酶活性的主要方法。该方法是利用延续对反响过程进展高灵敏度检测,并经过绘制整个酶反响曲线避开延滞期和非线性反响期,只在线性反响期测定最大反响初速度。由于仪器的高精细度,延续监测法能在很短时间,甚至在1分钟反响时间内就能准确测定出活性的抑制率。 .技 术 指 标CL-BIII八通道残留农药测定仪的技术目的: 丈量波长:410nm 通道数:8 检测用样品器皿:10mm比色皿 光电流漂移:0.5% (3min) 暗电流漂移:0.5% (3min) 抑制率显示范围:0-100% 抑制率丈量范围:10-100% 农药检测:用甲胺磷农药标样测试 抑制率示值误差:10 % 抑制率反
5、复性误差: 5 % .第一部分 试剂配制第二部分 联机运用第三部分 单机运用第四部分 相关技巧与常识目 录.第一部分试剂配制 .1、试剂的配制提取液:把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中,并参与 510ml蒸馏水溶解。酶试剂:用移液枪取3.1ml提取液,参与酶试剂瓶中。显色剂:用移液枪取20ml提取液,参与显色剂瓶,溶 解后倒入棕色瓶中。底 物:用移液枪取3.1ml蒸馏水,参与底物瓶中。.2、试剂的保管及本卷须知前往目录1、本试剂适用的国家规范为:GB/T5009.199-2003。2、未配制的试剂,要保管在0以下的冷冻箱里。 保质期可达1年3、配制好的酶和底物试剂,要保管在4的冷藏箱内。 保质期为
6、一周4、配制好的提取液常温下可以长期保管。5、配制好的显色剂需避光保管;常温或冷藏,可以 保管1年。.第二部分联机运用.第一步 仪器衔接.1、衔接电源将仪器的电源接头和数据信号线接好。 如图:.2、衔接电脑 把数据信号线串口线接入电脑主机背后的COM口串口上,然后把数据信号线与仪器联接起来,这样就完成了仪器与电脑的硬件衔接。.第二步 软件安装.安装“农产质量量平安检测软件 把“农产质量量平安检测软件光盘放入电脑光驱中,等自动读取或在光盘目录下找到并双击“setup后,按提示点击“下一步安装。安装完成以后,桌面上会出现“食质量量平安检测平台的图标。安装完成桌面上出现的图标.第三步 仪器设置.仪器
7、设置翻开仪器电源,按仪器“确认键2次,然后按1次“设置键,再按 “确定键,选择 “受控后再按1次“确定键。出现“现正处于受控任务方式即可。翻开检测软件,检测软件的用户名默以为“管理员,密码是“111111。 检测软件登陆设置为受控形状.调0/100注:以上是一个检测窗口的步骤,其他七个窗口都是如此。 等待10-15秒 按“确定 放入黑块 等待10-15秒 按“确定 拿出黑块 按“ 键按“ 键按“ 键 按“ 键.第四步 空白对照.空白对照 用小移液枪取0.1ml酶试剂参与试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂参与试管中 用小移液枪取0.1ml底物参与试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开
8、场对照分析键 等待对照终了 用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中.装入对照 按“装入对照分析键选择所需对照选择需求装入对照的通道号在通道号码前 按“读取键完成装入任务 注:对照终了后,对照曲线会自动保管. 规范对照库中已有30种蔬菜的对照,在做这30种蔬菜时,请参照这些对照。 .装入规范对照库 按“装入对照分析键选择所需的空白对照和相应的样品修正值选择需求装入对照的通道号在通道号码前 按“读取键完成装入任务 .第五步 样品检测.用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液参与到烧杯中 静置15分钟或震荡1分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中
9、用小移液枪取0.1ml酶试剂参与试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂参与试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物参与试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开场样品分析键 等待检测结果 .第六步 保管检测结果.保管检测结果样品终了后,系统自动弹出“检测结果对话框 选择该通道所测蔬菜名 填写选择检测单位 按“退出键 填写选择被检单位和消费单位 按“保管键,保管检测结果 .备 注“统计分析 中的“农残检测数据查询统计对话框有一切保管过的检测数据,在该对话框中有“开场日期“、“终了日期、“果蔬种类、“被检单位等九项选项,对这些选项进展组合选择后,再按“查询键,就可以将您需求的信息从一切的
10、数据中挑选出来。另外,“农残检测数据查询统计对话框中还有“统计分析和“转存等功能,中选择出需求的检测数据后,就可以按“统计分析键或者“转存键,对数据进展统计分析或制成相应报表。假设需求打印单项检测结果,那么点选该结果后,按“打印当前记录键,阅读打印效果,再按打印键后打印。.检测结果上传翻开“设置项下的“系统选项 在“系统选项中在“注册ID号处填入ID号 及ID密码 经过右半边的条件选择,查询出需求上传的数据点击“发送下的“发送查询的数据 当检测终了后需求发送数据时,翻开“统计汇总中的“农残检测数据查询统计 前往目录.第三部分单机运用.第一步 设置仪器.1、衔接电源将仪器电源衔接好,如需打印,那
11、么要将公用打印机衔接到仪器的打印接口上。如图: .2、仪器设置 翻开仪器开关后,按提示进入仪器操作主界面。按“设置键进入仪器设置功能,在“设置里可以对 “日期、“打印方式、“对照查询等进展设置。设置完成后再按“设置键退回到主界面。 .3、调0/100 在主界面形状下,按0/100键,根据屏幕提示逐一调1-8通道的100值,最后按“确定键终了。.第二步 空白对照.空白对照注:对照的时间默以为3分钟,如需修正,那么先要在“设置中进展设置。 用小移液枪取0.1ml酶试剂参与试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂参与试管中 用小移液枪取0.1ml底物参与试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入第一通道的比色池
12、 按“对照键,并选择“新建 等待对照终了 用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中.第三步 样品检测.用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液参与到烧杯中 静置15分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂参与试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂参与试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物参与试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“样品键 等待检测结果 注:按“样品键后,会从1-8通道依次提示能否预备好开场进展检测,假设该通道不需求进展检测,那么选择“不用。 .第四步 数据打印及退出 .数据打印及退出前往目
13、录按“打印键 按“确定键 用/键选择检测数据的编号 按“打印键进展打印 按“确定键退出打印形状 .第四部分相关技巧与常识.常见问题及相关技巧11.仪器联机操作的情况下,在检测过程中或者开场检测时,电脑出现“没有检测到指定的设备,是怎样回事? 普通来说出现这种提示阐明您的检测仪与电脑硬件衔接出现问题,检查的步骤如下: 第一步、确定检测软件的设备设置中相关设置与硬件衔接相匹配; 第二步、电脑串口通讯缺点,检测方法:重新启动电脑,确认能否缺点依然存在,假设缺点依然存在,检查下一步; 第三步、改换一下电脑串口,并在检测软件的设备设置中进展相应的改动,或者换一台电脑,确认缺点能否存在,假设缺点处理,那么
14、阐明是电脑本身的问题,否那么可进展下一步检查; 第四步、改换RS232485转换器,确认问题能否存在,假设缺点处理,那么阐明为RS232485转换器衔接不通。.常见问题及相关技巧22.仪器联机操作的情况下,调100时看不到红线是怎样回事? 首先我们要学会看图谱,图谱的横坐标为时间,纵坐标为投射比,我们所所的调100准确的所是指将投射比值调整为100。 图谱在没有迁延的情况下,最高只能显示到100,假设在调100的过程中,其投射比值大于100,那样就看不到红线了,但图谱右边的小白框中有数字显示,他只需正常的调0/100就可以了。 另外,对于小白框内数字,显示的是当前的投射比值。在做对照或调0/1
15、00时,小白框内的数字前有一短红线,在做样品时那么为短绿线。大家不要把这个短线以为是负号。.常见问题及相关技巧33.如何检测仪器的重现性? 做一空白对照后,做一个双倍量的样品,然后一分为二,先后或同时做检测,即:取2克样品,加10ml提取液浸泡,然后取5ml检液,分别加0.2ml的酶、显色剂,15分钟后,假设直接加0.2ml底物,然后一分为二在两个通道中同时做检测,那么是检查不同通道的重现性;假设15分钟后先将溶液一分为二,先后参与0.1ml底物做检测,那么是检查同一通道的重现性。4.如何添加种类称号? 普通来说有两种添加方法: A.可以在根底数据维护中进展添加。 B.在检测结果弹出是,经过 进展添加。另外,在添加时一定要按“添加键,填好相关信息后按“保管完成。 .常见问题及相关技巧45.如何晋级检测软件? 对于检测软件的晋级有两种方法: A.在线晋级:翻开检测软件并衔接因特网,然后在协助中选择在线晋级。 B.本地晋级:执行新版检测软件的安装程序,选择“修复或晋级项,然后按照提示完成安装即可。6.如何上传数据? 上传数据有三个步骤: 1翻开“设备菜单中的“系统选项,并将注册ID号和ID密码填写好; 2翻开“统计汇总菜单中的“农残检测数据查询统计,经过查询项将需求上传的数据查询出来; 3按“上传键完成
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