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文档简介
1、思考:转基因技术实现了一种生物的某些性状在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关?基因工程专题甲生物乙生物新类型生物表达生物产品取出优秀基因“剪切”“拼接” 基因工程,又叫 。是指 ,在DNA 上进行严格的设计,并通过 DNA ,赋予生物以 ,从而创造出更符合人们需要的新的 _和 。DNA重组技术分子水平新的遗传特性生物产品按照人们的愿望 生物类型体外重组和转基因技术基因工程的概念基因工程基本工具1.限制酶2.DNA连接酶3.载体原理操作程序1.目的基因的获取2.基因表达载体的构建(核心)3.目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定PCR技术扩增 基因文库人工合成方
2、法组成用同一种限制酶切割;用DNA连接酶链接目的基因启动子终止子标记基因植物细胞动物细胞微生物细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法导入目的基因的植物细胞经植物组织培养形成植株显微注射技术导入受精卵中用Ca2+处理分子水平个体水平DNA分子杂交技术分子杂交技术抗原-抗体杂交技术抗虫或抗病接种实验基因重组应用植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆性等动物基因工程:基因工程药物:转基因工程菌基因工程治疗基因工程基本工具限制酶DNA连接酶载体原理操作程序1.目的基因的获取2.基因表达载体的构建(核心)3.目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定PCR技术扩增 基因文库人工合成方法组成用同一种限制酶切割;用
3、DNA连接酶链接目的基因启动子终止子标记基因植物细胞动物细胞微生物细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法导入目的基因的植物细胞经植物组织培养形成植株显微注射技术导入受精卵中用Ca2+处理分子水平个体水平DNA分子杂交技术分子杂交技术抗原-抗体杂交技术抗虫或抗病接种实验基因重组应用植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆性等动物基因工程:基因工程药物:转基因工程菌基因治疗区分下列相近概念(1)载体与运载体 载体运载体1)细胞膜上的载体蛋白: (如:主动运输和协助扩散)2)细胞内的载体蛋白:如血红蛋白3)基因工程中载体:与目的基因结合,将基因送入受体细胞。如:质粒、噬菌体的衍生物、动病毒、植物病毒等。同上 3
4、)基因工程中载体质体:质粒:(2)质体与质粒是一类与碳水化合物的合成与贮藏密切相关的细胞器,它是植物细胞特有的结构。根据色素的不同,质体可分成三种类型:叶绿体(chloroplast)、有色体(chromoplst)和白色体(leucoplast)。是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。(3)逆转录与反转录反转录是进行基因工程过程中,人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA,并以之为模板人工合成DNA的过程。逆转录是某些RNA类病毒自主行为,在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程;二者虽同为RNADNA的过程,但地点不同,相对
5、性的来说,逆转录在体内,反转录在体外。?酶DNA聚合酶?酶DNA聚合酶DNA链接酶(4)DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶 DNA聚合酶催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不需要模板 需要DNA的链为模板游离的DNA片段双链上的两个缺口同时连接起来 将单个的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链DNA连接酶作为“针线”将目的基因与载体连接 没有参与 相同点 不同点 是否需要模板 是否参与基因工程 PCR全称为_,是一项 在生物_复制_的核酸合成技术。 多聚酶链式反应体外特定DNA片段(6)PCR扩增与DNA分子复制PCR技术的操作过程a、变性(90-95):双链DNA模板在高温作用下,_断裂,形成_b、复性(复性55-65):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部_.c、延伸(70-75):在Taq酶的作用下,合成与模板互补的_。 氢键单链DNA双链DNA链d.重复a.b.c步骤(7)启动子、终止子、起始密码子、终止密码子RNA聚合酶结合位点外显子内含子终止子启动子真核细胞一个基因:(DNA序列)转录的终止信号AUGGAUAUC起始密码子UAG终止密码子mRNA基因文库的概念:将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中
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