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文档简介

1、细胞工程题一、名词解释1.植物组织培养:是指将植物组织在适当培养条件下诱导长成完整植株的技术。2.植物的器官发生:指离体培养的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程。3.脱分化:已有特定结构和功能的植物组织的细胞,在一定的条件下被诱导改变原有的发育途径,逐步失去原有的分化状态,转变为具有分生能力的胚性细胞的过程。4.愈伤组织:脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团5.外植体:植物体上切下来进行培养的部分组织或器官。可以是器官、组织、细胞和原生质体。6.继代培养:指愈伤组织在培养基上生长一段时间后,营养物枯竭,水分散失,并已经积累了一些代谢产物,此时需要将这些

2、组织转移到新的培养基上,这种转移称为继代培养或传代培养7.体细胞胚:又叫胚状体,是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。8.植物胚胎培养:指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。9.人工种子:又称合成种子或体细胞种子,是指将植物离体培养的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中的类似种子的颗粒。10.植物脱毒:利用物理、化学或生物学方法脱除植物所感染的病毒,在无菌条件下培养不带病毒的植株,进行快速繁育无病毒种苗的技术。11.看护培养:指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖的一种培养方法。这块愈伤组织被称为看护组织。12

3、.细胞系:是以一种细胞为主、能在体外长期生存的不均一的细胞群体13.细胞株:是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。14.细胞融合:指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。15.体细胞杂交:指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。16.单倍体:细胞中含有正常体细胞一半染色体数的个体,即具有配子染色体组的个体。17.花药和花粉培养:指离体培养花药和花粉,形成花粉植株,从中鉴定出单倍体植株并使之二倍体化的细胞工程技术。18.杂交瘤技术:将骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合得到既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖的杂

4、交瘤细胞,经过克隆化培养得到可以分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,这种技术称为杂交瘤技术。19.单克隆抗体:经过免疫的哺乳类动物单一的B淋巴细胞可以分泌单一性抗体,具有特异性和同质性20.胚胎工程:对动物早期胚胎或配子进行工程技术操作,获得所需要的成体动物的一种技术。主要包括:体外受精、胚胎移植、胚胎性别鉴定、胚胎分割与融合、胚胎冷冻技术等21.胚胎分割:利用显微操作技术或徒手操作方法,切割早期胚胎成2、4等多等份,再移植给受体母畜,从而制造同卵多仔后代的技术。22.胚胎融合:胚胎融合又叫胚胎嵌合,是将两枚或两枚以上的胚胎(同种或异种动物)的部分或全部细胞融合在一起,使之发育成一个胚胎,然后移植到受

5、体母畜体内让其继续发育形成一种嵌合体后代的技术。23.组织工程:利用生命科学、医学、工程学原理与技术,单独或组合地利用细胞、生物材料、细胞因子实现组织修复或器官再生的一门技术。24.胚胎干细胞(ESC):是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞。25.胚胎移植:是将两种母畜配种后的早起胚胎取出,移植到同种的生理状态相同的母畜体内,使之继续发育成新个体。26.植物细胞的全能性:植物的任何一个细胞都具有该个体的全部遗传基因,它具有发育成一个完整支柱的潜在能力称为植物细胞的全能性。27.细胞杂交:指用人工方法把不同类型的两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。28.

6、体外受精:指将哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。29.接触抑制:当细胞在基质上分裂增殖,逐渐汇合成片即每个细胞与其周围的细胞相互接触时,细胞就停止增殖,即细胞密度不再增加,这一现象称之为接触抑制或密度依赖抑制现象。30.细胞核移植:是利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。31.细胞分化:指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,包括时间上和空间上的分化。32.试管婴儿:指卵子与精子在体外受精,培养发育成早期胚胎,再植回受体子宫内发育出生的婴儿33.连续细胞系:能连续培养下去的为连续培养细胞系。二、填空题1、植物组织培养再生植株

7、的途径有器官发生途径和体细胞胚发生途径。2、目前使用的最好的人工种子的包埋剂是海藻酸钠3、人工种子一般由人工种皮,人工胚乳,_胚状体_三部分组成4、植物组织培养再生植物的理论基础是细胞全能性,植物组织培养再生的植株称为试管植株。5、植物组织培养过程中,愈伤组织可以用继代培养的方式长期保存。6、1975年Kohler和Milstein肿瘤细胞融合,获得单克隆抗体,并由此获得1984年诺贝尔生理学与医学奖。7、植物细胞培养基最适pH是5.8-6.0,动物细胞培养基最适pH是7.2-7.4。8、根据植物外植体不同可分为胚胎培养,器官培养,组织培养,细胞培养,原生质体培养培养。9、根据包被的程度,可将

8、人工种子分为三大类:裸露的或休眠的繁殖体;人工种皮包被的繁殖体;水凝胶包埋再包被人工种皮的繁殖体。10、单倍体植株的二倍化方法自然加倍;人工诱导加倍(用0.5%秋水仙素溶液处理植株;从愈伤组织再生二倍体植株。11、培养条件下动物贴壁细胞可分为成纤维细胞;上皮细胞;游走细胞;多形细胞四种类型。12、组织培养细胞一代生长过程潜伏期;指数增长期;停止期三个阶段。13、根据其发育阶段,干细胞可以分为胚胎干细胞,成体干细胞。根据其分化潜能的大小,可分为:全能干细胞;多能干细胞;定向干细胞。14、植物的器官分化是指离体培养的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程。15、幼配培养是指早期原胚、球形期

9、胚、心形期胚、鱼雷期胚的培养。16、人工种皮起着保护胚状体的作用,需具有无毒、良好的通气性、抗污染、适合运输等特点。17、植物体上切取下来进行培养的部分叫外植体18、幼胚培养时其发育途径有_直接成苗、_早熟萌发_ 、_脱分化形成愈伤组织三种方式。19、原代培养方法组织块培养、组织消化培养20、HAT培养液:次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸腺嘧啶核苷(T)。21、目前使用最好的人工种子的包埋剂是海藻酸钠。21、细胞冻存和复苏要遵循的原则是慢冻快融。23、愈伤组织可以用继代培养的方式长期保存,可以通过悬浮培养而迅速增殖用作无性系。24、人工种子制备的关键环节是体细胞胚诱导。水凝胶法是最常用的人工

10、种子包埋方法,常用褐藻酸钠等水溶性凝胶经与Ca2+进行离子交换后凝固实现包埋。25、1975年Kohler和Milstein肿瘤细胞融合,获得单克隆抗体,并由此获得1984年诺贝尔生理学与医学奖。26、细胞融合技术主要包括制备原生质体、诱导细胞融合、筛选杂合细胞27、植物组织培养再生植株的途径有器官发生途径和体细胞胚发生途径。28、细胞冻存和复苏要遵循的原则是慢冻快融。29、植物胚胎发生过程:原胚球形胚心形胚鱼雷胚子叶胚30、若营养条件和技术条件满足时,外植体会发生脱分化形成愈伤组织。若培养基中细胞分裂素和生长素的比例合适,则愈伤组织会再分化出根和芽_,若细胞分裂素太多,则愈伤组织只长芽不长根

11、。若生长素太多,则愈伤组织只长根不长芽。31、若培养25 d后,发现外植体边缘局部污染,原因可能是消毒不彻底。三、选择题1、下列说法中错误的是(D)A、植物组织培养中,细胞分裂素/生长素比值低促进生根。B、植物的恶苗病是由赤霉素引起的。C、乙烯在农业生产上一般用于果实的催熟。D、幼嫩的植物组织中,脱落酸含量较高。2、下列植物激素中为赤霉素类的是(C)A、IAAB、NAAC、GA3D、IBA3、一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件( D )无毒的环境无菌的环境合成培养基需加血浆温度与动物体温相近需要02,不需要C02C02能调培养液pHA、B、C、D、4、在下列选项中,没有采用植物组织培养

12、技术的是(A)A、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,得到多倍体植株。B、利用花药离体培养得到单倍体植株。C、利用基因工程培育抗寒的番茄植株。D、利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株。5、贴附型细胞是动物细胞体外生长的主要形式,按照培养细胞的形态,贴附型细胞主要分为四种类型,下列哪种类型不属于贴附型细胞?(D)A、成纤维细胞型细胞B、上皮型细胞C、游走型细胞D、悬浮型生长细胞6、下列哪种方法能用于微生物细胞的融合?(C)A、电刺激B、灭活仙台病毒C、PEGD、以上三种7、下列哪种方法能诱导产生单倍体?(A)A、花药培养B、秋水仙素诱导C、胚乳培养D、原生质体培养8、动物细胞融合技术最重要的用途

13、是(B)A、克服远缘杂交不亲和B、制备单克隆抗体C、培育新品种D、生产杂种细胞9、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用.下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是(C)A、特异性强,灵敏度高B、与抗癌药物结合可制成生物导弹C、体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D、由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌10、中科院成员通过将大熊猫的体细胞核移植到去核后的兔子卵细胞中,成功培育出大熊猫的早期胚胎,这项研究成果属于。(B)A、杂交育种B、细胞工程C、基因工程D、染色体工程11、生长素包括(A)A吲哚乙烯B6-苄胺基嘌呤C玉米素D KT12、以下关于动物细胞哪种说法是正

14、确的?(C)A动物细胞和微生物差不多,无细胞壁B倍增时间短,生长快C培养过程需氧量少,对机械搅拌或剪切力敏感D主要以单个形式存在13、细胞培养的pH最适宜为(C)A6.8-7.0 B 7.0-7.2 C7.2-7.4 D7.4-7.614、细胞株的保存需要(B)A快冻快融B慢冻快融C慢冻慢融D快冻慢融15、以下哪些细胞属于贴附型细胞(A)A成纤维性细胞B血液白细胞C淋巴组织细胞D杂交瘤细胞16、下列哪种方法能诱导产生多倍体?(B)A、花药培养B、秋水仙素诱导C、胚乳培养D、原生质体培养17、下列有关植物细胞与组织培养的叙述中,错误的是(A)A.花药,胚不能作为组织培养的材料B.植物细胞具有全能

15、性C.外植体是指用于培养的植物组织或器官D.外植体可诱导出愈伤组织18、一杂合体植株(二倍体)的下列部分,经组织培养和秋水仙素处理后可获得纯合体的是(D) A.根B.茎C.叶D.花粉19、下列关于细胞工程的叙述,错误的是(D)A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同20、制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括(A) 细胞培养细胞融合胚胎移植细胞核移植A. B. C. D.21、下列培养基中属于富

16、盐平衡培养基的是(A)A、MS培养基B、B5培养基C、N6培养基D、White培养基22、人工种子必要结构不包括( A )A、人工果皮B、人工种皮C、人工胚乳D、胚状体或芽23、以一种细胞为主、能在体外长期生存的不均一的细胞群体称为(A)A、细胞系B、细胞株C、细胞亚系D、细胞亚株24、细胞融合要依次经过个步骤(C)胞质渗透质膜融合形成细胞桥两原生质体或细胞相互靠近细胞核融合A、B、C、D、25、细胞融合方法包括( D )A、物理法B、化学法C、生物法D、A、B和C都是26、动物细胞体外大量增殖是通过实现的(B)A、原代培养B、传代培养C、看护培养D、饲养层培养27、动物细胞培养基中含有血清的

17、有(D)A、天然培养基B、合成培养基C、无血清培养基D、A和B28、动物细胞消化液不可以是(D)A、胰蛋白酶溶液B、EDTA溶液C、骨胶原酶溶液D、抗生素溶液29、低温保存复苏动物细胞一般要求(B)A、慢冻慢融B、快冻慢融C、慢冻快融D、快冻快融30、动物细胞大规模培养采取(D)A、培养瓶培养B、转管培养C、悬滴培养D、悬浮培养31、融合后的杂交瘤细胞一般使用培养基来进行选择纯化(B)A、PDAB、HATC、天然D、无血清32、用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是(C)A都需用CO2培养箱B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性33、用动物细胞培养技术使细

18、胞传到50代以后仍能传下的传代细胞称为(C)原代细胞传代细胞细胞系细胞株34、能提高良种家畜繁殖能力的细胞工程技术是(C)组织培养细胞融合胚胎移植细胞核移植35、单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的(D)A.B淋巴细胞BT淋巴细胞C骨髓瘤细胞D杂交瘤细胞36、贴附型细胞类型不包括(D)A、成纤维细胞型B、上皮型细胞型C、游走型细胞型D、悬浮型细胞型37、控制组培中形态建成的激素模型是(A)A.生长素与细胞分裂素的比例B.生长素与赤霉素的比例C.生长素与脱落酸的比例D.生长素与乙烯的比例38、不属于单倍体植物的特点是(D)A体细胞染色体数减半B生长发育弱,体形小、各器官明显减小C雌雄配子严重败育,有

19、的甚至不能进入有性世代D有优势性状39、细胞株的特点是(B)A遗传物质没有改变,可以无限传代B遗传物质发生改变,且有癌变特点,可以无限传代C遗传物质没有改变,不可无限传代D遗传物质发生改变,不可无限传代40、下列有关植物细胞与组织培养的叙述中,错误的是(A)A花药、胚不能作为组织培养的材料B植物细胞具有全能性C外植体是指用于培养的植物组织或器官D外植体可诱导出愈伤组织41、下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是(D)A卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加B胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割C胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点D胚胎干细胞是一类未分化细胞,

20、可从早期胚胎中分离获取42、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是(C)诱导融合的方法完全相同所用的技术手段不相同所采用的原理完全相同都能形成杂种细胞AB CD43、单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长;而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是(B)A骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B脾细胞之间形成的融合细胞C骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D脾细胞44、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错

21、误的是( D )A将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇(PEG)作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体45、常用的生长素中,诱导愈伤的是(B)。A、吲哚乙酸(IAA)B、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)C、萘乙酸(NAA)D、吲哚丁酸(IBA)46、植物组织培养过程中的脱分化是指(C)。A、植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B、未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C、植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程D、植物的枝芽培

22、育成一株新植物的过程47、下列植物细胞全能性最高的是(A)。A、形成层细胞B、韧皮部细胞C、木质部细胞D、叶肉细胞48、马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖,种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产,为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是(C)。A、选择优良品种进行杂交B、进行远缘植物体细胞杂交C、利有芽尖进行组织培养D、人工诱导基因突变49、下列属于贴附型细胞的是(B)。A、淋巴组织细胞B、成纤维细胞C、杂交瘤细胞D、血液白细胞50、动物细胞的最适培养温度是(C)A、30C B、35C C、37C D、40C51、HAT选择培养基中的(B)可阻断细胞正常途径合成DNA。A

23、、次黄嘌呤B、氨基蝶呤C、胸腺嘧啶核苷D、鸟嘌呤核苷52、(A)应选择与供体发情周期同步、生殖道正常、无疾病、繁育史良好的受体。A、胚胎移植B、体外受精C、胚胎分割与融合D、基因导入53、动物细胞培养渗透压的维持一般采用(A)。A.平衡盐溶液B.蔗糖溶液C.无机盐溶液D.有机物溶液54、英国生物学家首次用羊的体细胞成功地克隆出小羊“多利”。克隆羊的生殖方式属于( C )A分裂生殖B孢子生殖C无性生殖D有性生殖55、在动物体细胞克隆技术中,不一定涉及(D)A卵母细胞的培养B细胞核移植C早期胚胎培养D导入外源基因56、现代生物工程的组成(D )发酵工程酶工程细胞工程基因工程蛋白质工程生物化学工程A

24、.B.C.D.57、下列不属于人工胚乳配制成分的是(B)A.无机盐B.激素C.碳水化合物D.蛋白质58、下列关于细胞工程的叙述中,错误的是(C)A植物细胞融合必须先制备原生质体B试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面C经细胞核移植培育出新个体只具有一个亲本的遗传性状D用于培养的植物器官或属于外植体59、下列人体细胞中分化程度最低的是(A)A胚胎干细胞B造血干细胞C胰腺细胞D肌肉细胞60、动物细胞融合的目的中最重要的是(B)A克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C培养新物种D生产杂种细胞61、动物细胞融合与植物细胞杂交比较,在动物细胞融合中有特殊性的是(C)A、融合的原理B、融合的优点C、融合

25、的诱导手段D、融合的过程是指把处理过的无活性的或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞(B)A.看护培养B.饲养层培养C.植物细胞培养D.植物组织培养62、愈伤组织是一类(A)A高度渡泡化呈无定形的具有分生能力的薄壁细胞B排列紧密呈正方形的一群薄壁细胞C具有特定的结构和功能的植物组织D经细胞再分化过程产生的具有分生能力的薄壁细胞63、细胞融合主要经过了以下几个步骤:质膜融合形成细胞桥细胞核融合胞质渗透两原生质体或细胞相互靠近,正确的顺序为:(B)A.B.C.D.64、为了使培养的动物组织细胞分散开,以便制成一定浓度的细胞悬浮液,选来的动物组织应先用下列哪种物质处理(B)A胃蛋白酶B胰蛋白酶C盐酸D

26、胰脂肪酶65、植物组织培养技术可以用于( D)A生产无病毒植株B微型繁殖C生产紫草素DA、B、C均是66、下列技术中能克服远缘杂交不亲和的障碍的是(B)A组织培养B细胞融合C动物胚胎移植D单倍体育种67、动物细胞培养中胰蛋白酶所起的作用是( C )A、消化细胞膜易于融合B、分解培养基的蛋白质供给细胞营养C、使组织分散成单个细胞D、用于细胞内物质的分解68、单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英国科学家米尔斯坦和柯勒设计了一个用被免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验,下图为其实验流程图。则相关的叙述或说法中,不正确的是(B)A、a是骨髓瘤细胞,表示在选择性培养基上进行培养B、制备

27、单克隆抗体时,选择B淋巴细胞的原因是它只能分泌多种特异性抗体C、过程如在体外培养,则需要无菌、无毒,营养充足,温度适宜,pH适宜,空气充足等环境条件D、诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇69、利用植物的茎尖和叶片、茎段、花药、花粉等,在无菌的条件下,培养在玻璃器皿中人工配制的培养基上,使它发育成完整的植株。这种技术可以用来培育新品种,可以在较短时间内大量繁殖植物,还可以防止植物病毒的危害。下列关于这种技术的叙述正确的是(D)(1)这种技术利用了植物细胞的全能性(2)这种技术叫做组织培养,可以克隆生物体(3)这种技术属于细胞工程的应用领域之一(4)这种技术属于无性繁殖的方式A、(

28、1)B、(1)(2)C、(1)(2)(3)D、(1)(2)(3)(4)70、当干细胞进入期时,其增殖速度开始逐渐加快,以适应组织器官生长,发育和修复的需要( B )A、分裂期B、分化期C、成熟期D、衰老期71、运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是(B)植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养转基因植物的培育ABCD72、用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是(B)A、该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B、该愈伤组织的细胞没有全能性C、该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成D、该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构73

29、、1975年Kohler和Milstin成功获得单克隆抗体,由于单克隆抗体与血清抗体相比具有非常明显的优点,因而得到广泛的应用。单克隆抗体制备技术被誉为“免疫学上的一次技术革命”。下列有关单克隆抗体的叙述中错误的是(C)A、组成单克隆抗体的基本单位是氨基酸B、单克隆抗体仅特异地针对同一抗原决定簇进行免疫反应C、生物导弹就是一种单克隆抗体D、单克隆抗体可以广泛应用于疾病的诊断、治疗和预防74、用于核移植的供核细胞和受体细胞一般选用(D)A受精卵和减数第二次分裂时期的卵母细胞B传代10代以内的细胞和减数第一次分裂时期的卵母细胞C传代1050代以内的细胞和减数第二次分裂时期的卵母细胞D传代10代以内

30、的细胞和减数第二次分裂时期的卵母细胞75、幼胚培养不包括一下那个时期(B)A、早期原胚B、囊胚期C、球形期胚D、心形期胚76、体外受精动物培育一般经过一下几个步骤:(D)精子采集与体外获能、卵子采集与成熟培养体外受精重组胚激活与体外培养胚胎移植体内发育、出生1B、C、D、77、下列哪一项属于克隆(B)A.将鸡的某个DNA片断整合到小鼠的DNA分子中B.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系C.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内D.将鼠的骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞78、动物细胞培养时渗透压的维持一般采用(A)A平衡盐溶液B.蔗糖溶液C.无机盐溶液D.有机物溶液79、科学家用小鼠骨

31、髓瘤细胞与经过免疫的淋巴细胞融合,对得到的杂瘤交细胞不正确的叙述是(B)A.有双亲细胞的遗传物质B.无增殖的本领C.可分泌特异性抗体D.有大量增殖的本领80、用于核移植的供体细胞一般都选用(B)A.受精卵B.传代10代以内的细胞C.传代1050代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞81.、促进幼苗茎伸长生长的是(B)A、细胞分裂素B、赤霉素C、生长素D、维生素82、运用此植物体细胞杂交法可使本来存在着生殖隔离的物种进行杂交,培育出兼有两种品质的优良品种。要大量繁殖这样的优良品种,最好用下列哪种方法(C)A单倍体育种法B杂交育种法C植物组织培养法D花药离体培养法83、下列关于细

32、胞工程的叙述中,正确的是(C)A细胞工程的原理是细胞的全能性B绵羊多利的诞生,说明高度分化的动物细胞质具有全能性C植物组织培养技术可用于培育新物种D试管婴儿技术包括核移植和胚胎移植技术84、在动物细胞培养过程中,遗传物质肯定发生改变的细胞是(A)A传代培养至50代以后的细胞B原代培养细胞C传代培养至10代以内的细胞D克隆的细胞85、下列关于植物组织培养的叙述,正确的有(C)培养对象只能是细胞目的一定是为了得到植株培养过程需要某些植物激素单倍体育种用到了植物组织培养技术植物组织培养的全过程需要照光A、B、C、D、86、对比植物体细胞杂交和动物细胞融合,以下论述完全正确的是(A)A.两者都必须经过

33、人工诱导,但方式不同B.两者细胞融合的基本原理都是细胞的全能性C.两者都必须用灭活的病毒进行诱导D.两者的用途都是为了培养新品种88、下列技术培育出的新个体中,遗传物质只来源于一个亲本的是(C)细胞和组织培养细胞融合扦插诱导产生多倍体杂交育种动物胚胎移植哺乳动物体细胞克隆转基因工程A、B、C、D、89、对于花药培养和花粉培养,下列说法正确的是(A)A花药培养属器官培养,花粉培养属细胞培养B花药培养属细胞培养,花粉培养属器官培养C两者都属于器官培养D两者都属于细胞培养90、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养,又可以分化形成根、芽等器官,这一过程称为(C)A、脱分化B、去分化C、再分化D、脱分化或

34、去分化91、下列实验中可能获得三倍体植株的是( C )。A小麦的茎尖培养;B番茄花药培养;C玉米胚乳培养;D玉米花粉培养四、简答题1、细胞工程的主要应用 动植物快速繁 品种改良与新品种培育 细胞工程生物制品 组织工程2、人工种子制作有哪些环节? 胚状体同步发育 人工种皮制作 人工胚乳配制 包埋3、简述人工种皮的基本要求1.装配理想的人工种皮应该是:具有一定的封闭性以保证人工胚乳的各种成分不易流失;2同时又具有良好的透气性;3.具有一定的坚硬度,以加强人工种子的耐储运性和适于机械化操作;4.无毒无害,能保证繁殖体顺利穿透发芽;5.配制简单易行,成本低。常用的人工种皮材料,早期使用Elvax 42

35、60涂膜,新近试验使用的有二氧化硅化合物材料。4、植物脱毒的原理与生物方法有哪些?原理略(1)、茎尖培养(2)、珠心胚培养法(3)、加热法5、细胞融合经过几个步骤?答:(1)、两原生质体或细胞互相靠近(2)、质膜融合形成细胞桥(3)、胞质渗透(4)、细胞核融合6、植物组织培养具有哪些优点?(1)便于人工控制培养条件,周期短,繁殖速度快(2)占用空间小,不受地区、季节限制(3)利于刷选突变体,是优良品种培育的有效途径(4)利于繁殖珍稀、濒危动物,保持品种的特性7、 简述体外培养动物细胞所需要的条件。无菌、无毒的环境;充足的营养供给;适宜的温度和pH;气体环境。8、体外受精动物培育的步骤精子采集与

36、体外获能,卵子采集与成熟培养;体外受精;重组胚激活与体外培养;胚胎移植;体内发育与再生9、植物组织培养问题分析答:试管苗玻璃化现象;褐变问题;微生物污染问题;其他问题试管苗玻璃化现象:玻璃化指组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变,试管苗呈半透明状、外观形态异常的现象,又称过度水化现象。玻璃化现象主要是适应性的生理问题,是不能很好适应培养基和培养环境的结果。褐变问题:褐变产生机理褐变分为2类,即酶促褐变和非酶促褐变。微生物污染问题:外部污染菌:外植体的种类、取材季节、部位、预处理及消毒方法;内源菌:改进外植体消毒方法;反复检查培养物;使用适当种类和浓度的抗生素其他问题:目前还有许多植物的组

37、织培养没有成功;成本高10、人工种子的含义,优点及制作步骤答:人工种子,又称合成种子或体细胞种子,是指将植物离体培养的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中的类似种子的颗粒。人工种子具有以下优点:(1)便于运输和储藏。(2)人工胚乳可根据不同植物的要求配制,如可加入植物激素、有益微生物或抗病、抗虫成分等,这样获得的人工种子优越于天然种子,生产效率更高。(3)可以固定杂种优势,可保存珍贵稀有植物品种。(4)利于快速繁殖,生产效率高。人工种子制作:胚状体同步发育人工种皮制作人工胚乳配制包埋11、胚状体理想的包埋介质(人工胚乳和人工种皮)条件答:(1)对所要包埋的胚乳无伤害。(2)

38、有足够的柔软性,可以保护胚乳,并允许其发育。(3)具有一定硬度,避免运输、操作过程中的伤害。(4)具有穿透性,传递细胞生长所需的营养;并能容纳其他附加成分,如防腐剂、杀虫剂等。(5)可以用现有的温室或农机机械进行播种。12、什么是干细胞,干细胞培养有什么意义?干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞培养的意义:干细胞培养可以实现组织修复与再生,因为它具有发育分化为所有类型组织细胞的能力。结合克隆技术创建病人特异性的胚胎干细胞可以克服移植免疫排斥反应。干细胞是基因治疗的较理想的靶细胞,因为它可以自我复制更新,治疗基因通过它带入人体中,能够持久地发挥作用,而不必担心像分化的细胞那样在细胞更

39、新中可能丢失治疗基因。13、什么是体外受精?体外受精:是指将哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术14、杂种细胞筛选方法有哪些?(1)选择性培养基筛选法(2)遗传互补筛选法(3)抗性互补筛选法(4)利用物理特性筛选法(5)利用生长特性筛选法15、什么是器官发生?由外植体或单个细胞经愈伤组织再生植株一般要经过哪几个步骤?(1)植物的器官发生是指离体培养的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程(2)四个步骤启动期、愈伤组织诱导与继代培养、拟分生组织的形成、器官原基和器官形成16、简述植物组织培养的基本步骤。培养材料的采集培养材料的消毒制备外植体接种和培养根的诱导组培苗

40、的炼苗移栽17、简述哺乳动物细胞核移植的一般操作步骤。答:(1)核供体细胞获得与取核;(2)核受体细胞去核;(3)细胞核移植;(4)重组胚的激活;(5)重组胚胎的培养和移植。18、利用杂交瘤技术进行单克隆抗体制备的技术步骤有哪些?技术步骤:动物免疫与免疫脾细胞的制备 骨髓瘤突变缺陷细胞株的培养和选择饲养层细胞培养HAT培养基筛选细胞融合与杂交瘤筛选杂交瘤细胞的克隆化培养单克隆抗体的制备19、细胞融合的方法有哪些?(1)物理法:是利用离心、振动、电刺激等促进细胞融合。(2)化学法:用聚乙二醇等试剂作为诱导融合。(3)对于动物细胞,还用灭活的病毒作诱导剂。20、简述植物组织培养有哪些应用?微型繁殖

41、(即快速繁殖)作物脱毒生产药品人工种子植物种质资源的保存挽救濒于灭绝的植物获得单倍体植株,缩短育种年限细胞融合,获得体细胞杂种21、动物细胞体外培养有哪些类型?(一)贴附型细胞(1)成纤维型细胞细胞大致呈梭形,多数细胞间排列松散,有较大的细胞间隙,起源于胚肺细胞。(2)上皮型细胞细胞扁平状,形态较为规则,排列紧密,呈“铺路石状”,起源于内胚层与外胚层的细胞。(3)游走型细胞外形不规则且不断变化,生长位置不固定。如具有吞噬作用的单核巨噬细胞系统的细胞。(4)多形型细胞形态不规则,一般分胞体和胞突两部分,如神经元和神经胶质细胞。(二)非贴附型细胞(悬浮细胞)细胞体外生长不必贴壁,密度较高,胞体始终

42、为球形。如血液白细胞、淋巴组织细胞等。22、微繁的意义?答:意义有:(1)繁殖速度快,经济效益高;(2)占用空间小,不受季节限制,便于工厂化育苗;(3)保持植物种性,具有良好品质;(4)繁殖各种珍稀、濒危、名贵、突变物种;(5)便于国家和地区间种质交换;(6)安全方便地保持植物种质。23简述细胞冻存的方法。(1)预先配制冻存液:含20%血清培养基,10%DMSO,DMSO液用培养液配好;(2)取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1106 5 106细胞/ml);(3)加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期;(4)于液氮中冷冻。24、简述体

43、细胞胚的概念及形成过程。答:离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物,统称为体细胞胚。直接形成:外植体体细胞胚间接形成:固体培养:外植体 愈伤组织 体细胞胚悬浮培养:外植体 胚性细胞团 体细胞胚25在动物细胞培养中常用的溶液有哪些?(1)平衡盐水:由生理盐水和葡萄糖制成。Hanks液(HBS)和Earle液(EBS)是两种常用的BSS基础溶液。(2)培养基pH调整液:常用3.7%,5.6%,7.4%的碳酸氢钠溶液。(3)细胞消化液: 主要用胰蛋白酶(0.125%和0.25%)和EDTA(0.02%)。胶原酶、透明质酸酶等也用于消化,但代价高,保存困难,特殊细胞使用。(

44、4)抗生素溶液:主要用的是青霉素和链霉素,青霉素为100单位/毫升培养液,链霉素为100微克/毫升培养液。26如何鉴定胚胎干细胞?(1)、形态学检测(2)、核型分析(3)、碱性磷酸酶(AKP)活性的检测(4)、SSEA-1免疫荧光标记(间接免疫荧光法)(5)、OCT-4转录子表达产物的检测(6)、分化能力的检测a. 体外分化试验b. 体内分化试验c. 嵌合体形成d. 核移植27、器官发生有哪几种方式?(1)先发芽后生根(2)先生根后发芽(3)同时生根发芽五、论述题1、利用杂交瘤技术进行单克隆抗体制备的原理、技术步骤与要点有哪些?答:原理:正常的B淋巴细胞不能在体外条件下长期生存,因而不能在体外

45、持续产生抗体。而骨髓瘤细胞可以在体外快速生长但不能分泌抗体,研究者将骨髓瘤细胞和淋巴细胞进行杂交融合,获得杂交瘤细胞,从而获得该细胞分泌的单克隆抗体。技术步骤: 动物免疫与免疫脾细胞的制备骨髓瘤突变缺陷细胞株的培养和选择饲养层细胞培养HAT培养基筛选细胞融合与杂交瘤筛选杂交瘤细胞的克隆化培养单克隆抗体的制备要点:脾脏细胞应该取自经过特定抗原刺激,产生免疫的肌体,可以产生相应抗体。操作过程中要防止污染的产生,避免产生杂交瘤不生长或不产生抗体。1细胞融合时,选择合适的方法,减少负面影响。2、什么叫组织培养?以烟草为例说明植物组织培养的步骤。答:(1)准备工作:准备好培养基试剂以及要取材的烟草。(2

46、)培养基制备:按照培养基配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中在搪瓷杯中加入所需水量,加热溶解加琼脂溶化用1N NaOH或1N HCl调至培养基规定的pH值分装加塞培养基灭菌培养基灭菌后必须在37下恒温培养24h,确定无菌生长保存备用(3)外植体制备:烟草外植体取材(烟草根、茎、叶均可)自来水冲洗70%酒精表面消毒2060S无菌水冲洗消毒剂处理35次无菌水充分冲洗35次备用(4)接种:消毒后,对外植体进行修剪、剪切,并接入培养基中。并标上日期。(5)培养:培养条件一般控制在12小时光照,201。(6)定期检查:定期检查烟草的培养情况,及时记录和处理污染的材料。(7)移栽、炼苗:培养一段时间后的烟草需

47、要经炼苗后才能正常种植。3、什么是细胞核移植技术 ? 克隆的基本方法有哪些 ?细胞核移植技术:是指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中,产生与供细胞核动物的遗传成份一样的动物的技术。克隆的基本方法:(1)胚胎分割( 2)胚胎细胞核移植(3)胚胎干细胞核移植(4)胚胎嵌合(5)体细胞核移植4、下图为细胞工程中的一项重要技术,请根据图片回答下列问题。(1)该技术为胚胎工程中哪项重要技术?细胞核移植(或体细胞克隆)(2)该项技术主要步骤有哪些?核供体细胞获得与取核受体细胞去核细胞核移植重组胚激活 重组胚培养和移植(3)该项技术有什么应用?制备转基因克隆动物,进行生物药物生产 培育优良品种,扩大育种种群2开展异种动物克隆,拯救濒危动物 与干细胞技术相结合,开展医疗性克隆5、动物细胞在体外培养的生长过程分为哪些时期?每个时期有何特点?原代培养期特点:细胞独立生存性差,有不旺盛的细胞分裂,多呈二倍体核型;传代期特点:持续时间最长,增殖旺盛,一般为10-50代,能维持二倍体核型,特性稳定。衰退期特点:细

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