有机合成实验技能Purification

1、Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C实验技能（一）实验技能（一） 纯化、薄层色谱纯化、薄层色谱Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C第一部分第一部分 实验技能实验技能 这部分针对保诺的实际情况介绍一些实这部分针对保诺的实际情况介绍一些实用的实验技能，主要包括产品纯化、薄用的实验技能，主要包括产品纯化、薄层色谱、柱层析、无水无氧操作、催化层色谱、柱层析、无水无氧操作、催化氢化和色谱分析六个部分。这部分内容氢化和色谱分析六个部分。这部分内容是做是做Reference S

2、tandard项目的基础，项目的基础，应认真掌握。应认真掌握。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1-1 产品纯化产品纯化 当有机合成反应完成后，如何将产物从当有机合成反应完成后，如何将产物从反应体系中分离出来就成了最重要的事反应体系中分离出来就成了最重要的事情了，也就是说需要进行产品纯化，产情了，也就是说需要进行产品纯化，产品纯化是有机合成工作中非常重要的一品纯化是有机合成工作中非常重要的一环。环。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C一、一、 柱色谱柱色谱 柱色

3、谱的分离原理是利用混合物中各个柱色谱的分离原理是利用混合物中各个成分的物理化学性质的差别，当选择某一成分的物理化学性质的差别，当选择某一个条件使各个成分流过支持剂或吸附剂时，个条件使各个成分流过支持剂或吸附剂时，各成分可由于其物理性质的不同而得到分各成分可由于其物理性质的不同而得到分离。离。它可用于小量（和微量）的物质的分离、它可用于小量（和微量）的物质的分离、纯化处理。纯化处理。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C二、二、 重结晶重结晶 重结晶的原理是利用混合物中各组分在某种重结晶的原理是利用混合物中各组分在某种溶剂中的溶解度

4、不同，而使它们互相分离。溶剂中的溶解度不同，而使它们互相分离。它可用于固体物质（一般它可用于固体物质（一般1 1克以上）的分离、克以上）的分离、纯化处理。纯化处理。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1.重结晶提纯法的一般过程为重结晶提纯法的一般过程为 选择适宜的溶剂；选择适宜的溶剂； 将粗产品溶于适宜的热的溶液中制成饱和溶液；将粗产品溶于适宜的热的溶液中制成饱和溶液； 乘热过滤除去不溶性杂质。如溶液的颜色深，则应先脱乘热过滤除去不溶性杂质。如溶液的颜色深，则应先脱色，后过滤；色，后过滤； 冷却溶液，使之慢慢析出结晶而杂质则留在

5、母液中，冷却溶液，使之慢慢析出结晶而杂质则留在母液中，或者杂质析出，而欲提纯的化合物则留在溶液中；或者杂质析出，而欲提纯的化合物则留在溶液中； 抽气过滤分离母液，分出结晶体或杂质；抽气过滤分离母液，分出结晶体或杂质； 洗涤结晶，除去附着的母液；洗涤结晶，除去附着的母液； 干燥结晶。干燥结晶。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C2. 溶剂的选择溶剂的选择 与被提纯的有机物不起化学反应，对被提纯的有机物应在热与被提纯的有机物不起化学反应，对被提纯的有机物应在热溶液中易溶，而在冷溶液中几乎不溶，如果杂质在热溶液中不溶液中易溶，而在冷溶

6、液中几乎不溶，如果杂质在热溶液中不溶的，宜乘热过滤去杂质，溶剂的沸点，不宜太低，也不宜过溶的，宜乘热过滤去杂质，溶剂的沸点，不宜太低，也不宜过高。太低，溶解度改变不大；过高，附于晶体表面的溶剂不易高。太低，溶解度改变不大；过高，附于晶体表面的溶剂不易除去。除去。常用的溶剂有苯、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、乙醇等。常用的溶剂有苯、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、乙醇等。混合溶剂也经常被采用，如乙醇与水，乙醇与乙醚，乙醇与混合溶剂也经常被采用，如乙醇与水，乙醇与乙醚，乙醇与丙酮，石油醚与乙醚，苯与石油醚等。丙酮，石油醚与乙醚，苯与石油醚等。溶剂的用量一般是溶质用量的溶剂的用量一般是溶质用量的10-30倍量。倍

7、量。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C3.晶体的析出晶体的析出 过滤得到的滤液冷却后，晶体就会析出。用冷水或冰水迅速冷却过滤得到的滤液冷却后，晶体就会析出。用冷水或冰水迅速冷却并剧烈搅动溶液时，可得到颗粒很小的晶体，将热溶液在室温条件并剧烈搅动溶液时，可得到颗粒很小的晶体，将热溶液在室温条件下静置使之缓缓冷却，则可得到均匀而较大的品体。下静置使之缓缓冷却，则可得到均匀而较大的品体。 如果溶液冷却后晶体仍不析出，可用玻璃抹摩控液面下的容器壁，如果溶液冷却后晶体仍不析出，可用玻璃抹摩控液面下的容器壁，也可加入品种，或进一步降低溶液

8、温度也可加入品种，或进一步降低溶液温度(用冰水或其它冷冻溶液冷用冰水或其它冷冻溶液冷却却)。 如果溶液冷却后不析出晶体而得到油状物时，可重新加热，至形如果溶液冷却后不析出晶体而得到油状物时，可重新加热，至形成澄清的热溶液后，任其自行冷却，并不断用玻璃棒搅拌溶液，摩成澄清的热溶液后，任其自行冷却，并不断用玻璃棒搅拌溶液，摩擦器壁或投人品种，以加速品体的析出。若仍有油状物开始忻出，擦器壁或投人品种，以加速品体的析出。若仍有油状物开始忻出，应立即剧烈搅拌使油滴分散。应立即剧烈搅拌使油滴分散。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C三、蒸馏

9、三、蒸馏 首先了解一些常用有机溶剂的沸点数据：二首先了解一些常用有机溶剂的沸点数据：二氯甲烷、丙酮、甲醇、苯、乙酸乙酯、乙醇、氯甲烷、丙酮、甲醇、苯、乙酸乙酯、乙醇、甲苯等甲苯等Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1.1. 蒸馏蒸馏就是将液态物质加热到沸腾变为蒸气，又将就是将液态物质加热到沸腾变为蒸气，又将蒸气冷凝为液体这个过程的联合操作。它可蒸气冷凝为液体这个过程的联合操作。它可以分离液体混合物。以分离液体混合物。2.2. 减压蒸馏减压蒸馏可分离或提纯沸点教高或性质比较不稳定的可分离或提纯沸点教高或性质比较不稳定的液态有机化合

10、物。液态有机化合物。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C四、萃取四、萃取 萃取也是分离和提纯有机化合物常用的操作之一。萃取也是分离和提纯有机化合物常用的操作之一。萃取的原理：设溶液由有机化合物萃取的原理：设溶液由有机化合物X X溶解于溶剂溶解于溶剂A A而成，而成，现如要从其中萃取现如要从其中萃取X X，可选择一种对，可选择一种

11、对X X溶解度极好，而与溶解度极好，而与溶剂溶剂A A不相混溶和不起化学反应的溶剂不相混溶和不起化学反应的溶剂B B。仪器的选择仪器的选择液体萃取最通常的仪器是分液漏斗，液体萃取最通常的仪器是分液漏斗，一般选择容积较被一般选择容积较被萃取液大萃取液大1-21-2倍的分液漏斗倍的分液漏斗Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 萃取溶剂的选择萃取溶剂的选择 根据被萃取化合物的溶解度而定，同时要易于和溶质分开，根据被萃取化合物的溶解度而定，同时要易于和溶质分开，所以最好用低沸点溶剂。一般难溶于水的物质用石油醚等萃取；所以最好用低沸点溶剂

12、。一般难溶于水的物质用石油醚等萃取；较易溶者，用乙醚萃取；易溶于水的物质用乙酸乙酯等萃取。较易溶者，用乙醚萃取；易溶于水的物质用乙酸乙酯等萃取。 每次使用萃取溶剂的体积一般是被萃取液体的每次使用萃取溶剂的体积一般是被萃取液体的1/51/3，两者，两者的总体积的总体积不应超过不应超过分液漏斗总体积的分液漏斗总体积的2/3。乳化现象解决的方法乳化现象解决的方法 较长时间静置；较长时间静置； 若因碱性而产生乳化，可加入少量酸破坏或采用过滤方法除去若因碱性而产生乳化，可加入少量酸破坏或采用过滤方法除去 若由于两种溶剂（水与有机溶剂）能部分互溶而发生乳化，可加若由于两种溶剂（水与有机溶剂）能部分互溶而发

13、生乳化，可加入少量电解质（如氯化钠等），利用盐析作用加以破坏。另外，入少量电解质（如氯化钠等），利用盐析作用加以破坏。另外，加入食盐，可增加水相的比重，有利于两相比重相差很小时的分加入食盐，可增加水相的比重，有利于两相比重相差很小时的分离；离；Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 1-2 薄层色谱薄层色谱 薄层色谱（薄层色谱（TLCTLC）是快速分离和定性分析少）是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术。最典型的量物质的一种很重要的实验技术。最典型的在玻璃板上均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄在玻璃板上均匀铺上一薄层吸附剂，

14、制成薄层板，用毛细管将样品溶液点在起点处，把层板，用毛细管将样品溶液点在起点处，把此薄层板置于盛有溶剂的容器中，等溶液到此薄层板置于盛有溶剂的容器中，等溶液到达前沿后取出，晾干，喷以显色剂，测定色达前沿后取出，晾干，喷以显色剂，测定色斑的位置。斑的位置。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C一、吸附剂一、吸附剂 一般常用的是：硅胶一般常用的是：硅胶H/H/GFGF254 254 （含荧光物（含荧光物质）质） ，这是一种含荧光物质的

15、层析用硅，这是一种含荧光物质的层析用硅胶，可在胶，可在254 nm254 nm的紫外光下观察荧光。的紫外光下观察荧光。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C二、二、 点样点样在距薄层板（在距薄层板（2x5cm, 2x5cm, 自制）下端自制）下端5 mm5 mm处，处，划一条线，作为起点线。用毛细管划一条线，作为起点线。用毛细管( (內径內径0.3 0.3 mm) mm) 吸取样品溶液（一般以乙酸乙酯、二氯吸取样品溶液（一般以乙酸乙酯、二氯甲烷等作溶剂，配成甲烷等作溶剂，配成0.0.1%1%溶液），垂直地轻溶液），垂直地轻轻接触到

16、薄层的起点线上。轻接触到薄层的起点线上。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C三、展开剂的选择三、展开剂的选择 极性小的及中等的一般采用石油醚和乙酸乙酯作展开剂，通极性小的及中等的一般采用石油醚和乙酸乙酯作展开剂，通过调整其配比，使过调整其配比，使R Rf f值调到值调到0.3-0.60.3-0.6为佳。为佳。 极性大的一般采用二氯甲烷和甲醇作展开剂，通过调整其配极性大的一般采用二氯甲烷和甲醇作展开剂，通过调整其配比，使比，使R Rf f值调到值调到0.3-0.60.3-0.6为佳。为佳。如上述系统不适合可尝试使用石油醚和丙酮、三

17、氯甲烷和甲醇如上述系统不适合可尝试使用石油醚和丙酮、三氯甲烷和甲醇等展开体系。等展开体系。 酸或碱性物质由于在薄层板拖尾严重，所以分别在展开体系酸或碱性物质由于在薄层板拖尾严重，所以分别在展开体系中加入中加入0.1%0.1%乙酸或氨水。乙酸或氨水。 如反应物与生成物如反应物与生成物R Rf f值接近，可点交叉点加以区别。值接近，可点交叉点加以区别。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 化合物的吸附能力（亲和力）化合物的吸附能力（亲和力）:化合物的吸附能力（亲和力）与分子极性有关。分子极性越强，化合物的吸附能力（亲和力）与分子极性

18、有关。分子极性越强，其吸附能力也就越大。分子中所含极性较大的基团，其吸附能其吸附能力也就越大。分子中所含极性较大的基团，其吸附能力也较强。通常吸附能力按下列排列次序递增：力也较强。通常吸附能力按下列排列次序递增： -Cl,-Br,-IC=C-OCH3CO2RC=O-CHO-SH-NH2-OH-CO2H 色谱常用的洗脱剂及其洗脱能力（按次序递增）：色谱常用的洗脱剂及其洗脱能力（按次序递增）： 己烷、石油醚环己烷四氯化碳二硫化碳甲苯苯己烷、石油醚环己烷四氯化碳二硫化碳甲苯苯二氯甲烷三氯甲烷乙醚乙酸乙酯丙酮丙醇乙醇二氯甲烷三氯甲烷乙醚乙酸乙酯丙酮丙醇乙醇甲醇水吡啶乙酸。甲醇水吡啶乙酸。Spannin

19、g Drug Development & the Globe BioDuro C四、显色剂 紫外灯：多环芳烃基团等多环芳烃基团等碘蒸气：很多有机物显黄棕色很多有机物显黄棕色茚三酮、浓硫酸等特殊显色剂等特殊显色剂Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C柱层析Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C柱层析柱层析概述概述层析柱的选择层析柱的选择吸附剂吸附剂洗脱剂洗脱剂装柱装柱上样上样洗脱分离洗脱分离快速柱层析快速柱层析反相硅胶板和反相硅胶柱反相硅胶板和反相硅胶柱 Spa

20、nning Drug Development & the Globe BioDuro C一、概述概述 柱层析，又叫柱色谱(Column Chromatography)，通常在玻璃管中填入表面积很大、经过活化的多孔性或粉状固定吸附剂（如硅胶和氧化铝）。当待分离的混合物从柱顶加入，流经吸附剂（固定相）时就被吸附在柱的上端，然后从柱顶加入洗脱剂（流动相）。当洗脱剂流经吸附剂时，便发生了吸附和解吸吸附和解吸过程，即混合物的各组分在固定相和流动相之间发生无数次的交换。由于各组分对吸附剂的吸附能力（或称亲和力）不同，便以不同的速度随流动相下移，形成若干色带。吸附能力最弱的组分随洗脱剂首先流出。分别

21、收集各组分，进行逐个鉴定，从而达到分离纯化的目的。 作为一种十分高效的分离提纯方法，柱色谱有着相当广的应用范围，适用于大量、少量甚至微量物质的分离。关键词：吸附和解吸、吸附能力、物理过程。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C二、层析柱二、层析柱.任何细颈玻璃管或带旋塞的滴定管均可用作层析柱。. 专门定制各种尺寸规格的带有特氟珑旋塞和底部配备砂芯（以代替玻璃棉）的层析柱。 . 层析柱的选择。 Column Size (ml) Fr

22、action Size (ml) Sample Size (g) 200 10 12 400 20 35 600 30 58 1000 50 10 2000 100 2030 4000 150200 50 8000 250400 100 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug Development & the Globe BioDuro C三、吸附剂三、吸附剂常用的吸附剂有硅胶、氧化铝等，颗粒大小一般以通过200目左右筛孔为宜。颗粒太大，洗脱时溶剂推进太快，分离效果不好，反之如果颗粒太小，展开慢

23、而造成拖尾不集中，分离效果也不好。1、硅胶硅胶一般分为硅胶G(掺入13%的粘合剂煅石膏)、硅胶H（不含粘合剂，层析用）和硅胶H/GF254（含荧光物质）。柱层析一般用比表面积300-400 米2/克，颗粒度在300目以下的硅胶H做吸附剂。 2、氧化铝色谱用氧化铝一般可分为酸性、中性和碱性三种。酸性氧化铝是用1%盐酸浸泡后用蒸馏水洗至悬浮液PH=44.5，用于分离酸性物质。中性氧化铝PH=7.5,用于分离中性物质，其应用最广。碱性氧化铝PH=910，一般用于分离生物碱等化合物。 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C3、吸附剂的选择

24、 选择吸附剂的首要条件是与被吸附物无化学作用。选择吸附剂的首要条件是与被吸附物无化学作用。氧化铝的极性比硅胶大，比较适合用于分离极性较小的化合物如烃、醚、醛、酮、卤代烃等。因为极性化合物被氧化铝较强烈地吸附，分离较差。相反，硅胶适合用于分离极性较大的化合物如羧酸、醇、胺等，而非极性化合物在硅胶上吸附较弱，分离较差。 4、吸附剂的活性 吸附剂的活性与其含水量有关。含水量越低，活性越高。将氧化铝放在高温炉（350-400）烘3小时得无水氧化铝，加入不同量水分得不同程度活性氧化铝。一般常用-级（硅胶也可如法处理）。 Activity Alumina(% water) Silica gel(% wat

25、er) 0 0 3 5 6 15 10 25 15 38 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C5、化合物的吸附能力（亲和力）化合物的吸附能力（亲和力）与分子极性有关。分子极性越强，其吸附能力也就越大。分子中所含极性较大的基团，其吸附能力也较强。通常吸附能力按下列排列次序递增：-Cl,-Br,-IC=C-OCH3CO2RC=O-CHO-SH-NH2-OH0.2 Rf0.1 ml 1 100 100 40 5 2 200 400 160 10 3 400 900 360 20 4 600 1600 600 30 5 1000 250

26、0 1000 50The height of the column normally ranges 1525cm depending on the resolution.Operation Dry pack adsorbent(silica gel) into the appropriate column. Gently tap vertically to pack the gel. Clamp and assemble. Fill with solvent, pressure slightly to compress the silica gel and force solvent and

27、air through the column. The top of the column should not be allowedSpanning Drug Development & the Globe BioDuro Cto run dry. Apply the samples as a 20 - 25% solution and elute at a flow rate of 5cm/min. Generally, it takes about 510 minutes to run the column. Gram quantities are expected toacqu

28、ired, typically 0.5 - 2.0g. Can be increased to 10g if less resolution is required and/or larger columns are used.SummaryFlash Chromatography is a fast, cost efficient Prep LC approach. Separations are based upon traditionally obtained TLC results which are simply extrapolated to prep scale. Best of

29、 all, elaborate equipment and the purchase of expensive equipment is not necessary.Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C九、九、反相硅胶板和硅胶柱反相硅胶板和硅胶柱 当被分离的样品为极性很大的化合物（如氨，酸等），用普通的以硅胶为填充料的柱子可能很难有效分离，这时就可以选择反相硅胶板和硅胶柱。其主要的区别在于吸附剂的不同，主要以硅胶作基质，在其表面键合十八烷基官能团（ODS）的非极性填料，（其他还可键合C8、C4、C2、苯等）。洗脱剂一般用甲醇（乙

30、睛）和水的混合物。 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CChromatography Pre-TLC Column ChromatograghySpanning Drug Development & the Globe BioDuro C 分离时间短，效率高分离时间短，效率高 操作简便操作简便 分离样品少分离样品少特点特点Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C原理原理各组分对吸附剂吸附能力不同各组分对吸附剂吸附能力不同 吸附能力弱（即极性较弱的）随流动相移动

31、快吸附能力弱（即极性较弱的）随流动相移动快 吸附能力强（即极性较强的）随流动相移动慢吸附能力强（即极性较强的）随流动相移动慢Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C展开缸展开缸PTLC 板板点板点板展板展板显色显色刮板与洗脱刮板与洗脱PTLC过程过程Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C展开缸展开缸 24 24 7cm 使用混合溶剂时使用混合溶剂时, 可能会发生边缘效应可能会发生边缘效应 预防措施预防措施: 在四壁放上滤纸有助于蒸气饱和，防止边缘效应在四壁放上滤纸有助于

32、蒸气饱和，防止边缘效应 流动相液面高度一般为流动相液面高度一般为 10-15mm. 使用混合溶剂体系，应在每次爬板后清洁展缸使用混合溶剂体系，应在每次爬板后清洁展缸 每次只准备一天的溶剂每次只准备一天的溶剂 在爬板时保持展缸密闭在爬板时保持展缸密闭Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CPTLC 板板 吸附剂吸附剂 最常用的吸附剂是硅胶最常用的吸附剂是硅胶 硅胶是无定型多孔物质，略具酸性硅胶是无定型多孔物质，略具酸性 适用于中性或酸性物质的分离。适用于中性或酸性物质的分离。 制备和活化制备和活化 负载量负载量 1.0mm， 5mg/

33、cm2 e.g. 20 20cm, 10100mg Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C点样点样-A key step工具工具 自动自动 TLC 取样器取样器 自制的玻璃滴管自制的玻璃滴管 溶剂溶剂 推荐挥发性溶剂推荐挥发性溶剂乙酸乙酯乙酸乙酯,己烷己烷, 二氯甲烷二氯甲烷 避免使用不挥发溶剂避免使用不挥发溶剂 甲醇甲醇, 水水. 引起问题引起问题: 扩散扩散样品的浓度样品的浓度 PTLC-510% Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CSpanning Drug

34、Development & the Globe BioDuro C 用滴管吸取样品溶剂，缓慢并且匀速地在板上划一条直线用滴管吸取样品溶剂，缓慢并且匀速地在板上划一条直线 如果点样太宽，可用大极性溶剂将其展开至如果点样太宽，可用大极性溶剂将其展开至24cm，再吹干，再吹干 不要污染板不要污染板 线条尽可能细线条尽可能细 如果可能，点样后先在如果可能，点样后先在 UV下检查下检查 小心小心: UV 光线直接照射进眼里是有害的光线直接照射进眼里是有害的,最好带上眼镜，并用镊子夹住板最好带上眼镜，并用镊子夹住板 样品不能太多，否则会过载样品不能太多，否则会过载 由于边缘厚度不均匀及边缘效应由于

35、边缘厚度不均匀及边缘效应,应留应留 58mm.Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C展板展板 在展在展PTLC板之前，必须先用板之前，必须先用TLC 选用溶剂条件选用溶剂条件. PTLC可以直接使用可以直接使用TLC条件条件 将准备好的将准备好的PTLC 板放入展开缸板放入展开缸,盖上盖子盖上盖子. 溶剂前沿离板上端大约溶剂前沿离板上端大约0.5cm1cm即可取出即可取出Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C几个常用的溶剂体系：几个常用的溶剂体系： 己烷（石油醚）己烷

36、（石油醚）/乙酸乙酯乙酸乙酯 己烷（石油醚）己烷（石油醚） / 丙酮丙酮 氯仿氯仿/甲醇甲醇 Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C选择溶剂系统，必须经过多次的尝试，不断改变溶剂极性，根据板层情况，选择溶剂系统，必须经过多次的尝试，不断改变溶剂极性，根据板层情况，选择最佳的溶剂体系选择最佳的溶剂体系一般来讲，提高溶剂极性，化合物爬的越高一般来讲，提高溶剂极性，化合物爬的越高 （反之则相反（反之则相反).溶剂溶剂 （展开剂）（展开剂）烷烃烷烃 (己烷己烷,石油醚石油醚)甲苯甲苯二氯甲烷二氯甲烷,氯仿氯仿乙醚乙醚乙酸乙酯乙酸乙酯丙酮丙

37、酮醇醇醋酸醋酸极性极性Spanning Drug Development & the Globe BioDuro CPTLC中的问题：中的问题：板上的化合物是一片板上的化合物是一片 样品过载样品过载 . 或者是由于你的样品十分不纯或者是由于你的样品十分不纯. 板上的化合物拖尾板上的化合物拖尾. 样品有酸性或碱性基团样品有酸性或碱性基团 (胺或羧酸胺或羧酸) 有时在有时在PTLC板会有严板会有严重的拖尾。加入几滴氨水或重的拖尾。加入几滴氨水或TEA(胺胺) 或醋酸或醋酸 (羧酸羧酸) Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C显

38、色显色 如果样品是有颜色的如果样品是有颜色的,用铅笔轻轻标出用铅笔轻轻标出 如果样品需在紫外灯下看如果样品需在紫外灯下看,则在紫外灯下用铅笔标出则在紫外灯下用铅笔标出 从板上割下一条或用玻璃盖住大部分板，然后从板上割下一条或用玻璃盖住大部分板，然后 如果样品无色，且在紫外下也不显色如果样品无色，且在紫外下也不显色,那么试一试碘那么试一试碘 你也可选择在板上喷洒事先准备好的显色剂你也可选择在板上喷洒事先准备好的显色剂Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C刮板及洗脱刮板及洗脱在确定好所要的带后，可用刮刀将其刮下，碾细在确定好所要的带后

39、，可用刮刀将其刮下，碾细 以玻璃漏斗洗脱以玻璃漏斗洗脱 通过柱层析洗脱通过柱层析洗脱Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C操作过程请注意操作过程请注意: 尽快处理你的化合物尽快处理你的化合物,长时间与吸附剂接触会增加你的样品变坏的可能性长时间与吸附剂接触会增加你的样品变坏的可能性 小心选择溶剂小心选择溶剂, 甲醇可能会溶剂硅胶板里的融解黏合剂及荧光物质甲醇可能会溶剂硅胶板里的融解黏合剂及荧光物质, 选择氯选择氯 仿，丙酮和乙醇会好一些仿，丙酮和乙醇会好一些; 如果可能的话，尽量选择低极性的溶剂如果可能的话，尽量选择低极性的溶剂 1

40、g吸附剂需用大约吸附剂需用大约5ml溶剂溶剂 柱层析有助于除去黏合剂和荧光物质柱层析有助于除去黏合剂和荧光物质Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C无水无氧操作无水无氧操作Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1-4 无水无氧操作无水无氧操作 一、一、 常用溶剂的纯化常用溶剂的纯化二、敏感化合物的实验操作装置二、敏感化合物的实验操作装置 三、敏感化合物的实验操作技术三、敏感化合物的实验操作技术 四、敏感化合物的储存四、敏感化合物的储存 Spanning Drug De

41、velopment & the Globe BioDuro C 常用溶剂的纯化常用溶剂的纯化 化学供应商提供的常用试剂仅可满足一般化学反应的需要。为了确保一些有机合成反应的顺利进行，常常要对试剂进行进一步的纯化处理。常用的溶剂处理方法是蒸馏。如果反应要求仅仅是无水，可在冷凝管上加干燥管，油封或充氮气球即可，如果需要达到无水无氧的条件，溶剂则需要脱氧处理。一般在氮气氛下进行。Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 1. 试剂级溶剂的纯化试剂级溶剂的纯化 无水的试剂级溶剂常有足够的纯度，有时可以不用蒸馏。 为保证充分的干燥度，

42、可在储藏时向其加入活性分子筛。 欲使溶剂脱氧，可利用注射器或玻璃管向其中鼓入氮气约五分钟。2. 一般溶剂的纯化一般溶剂的纯化 大多数溶剂，只要在惰性气氛中将其从干燥剂中蒸馏出来， 就可以达到足够的纯度。（1） 烷烃烷烃 如己烷、戊烷等。首先用浓硫酸洗涤几次以除去烯烃，水洗， CaCl2干燥，必要时用钠丝或P2O5干燥，蒸馏。存放于带塞的 试剂瓶中。（2）芳香烃类芳香烃类 如苯、甲苯、二甲苯等。CaCl2干燥，必要时用钠丝或P2O5干燥， 蒸馏。存放于带塞的试剂瓶中。 常用溶剂的纯化常用溶剂的纯化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro

43、C （3） 氯代烷烃类氯代烷烃类 如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷等。水洗除去醇等， CaCl2干燥，在P2O5，或CaH2中回流蒸出。绝对不能用钠丝干燥， 否则会发生爆炸。长期储藏应放于密闭的瓶中，并保存于黑暗中。（4） 醚类及呋喃类醚类及呋喃类 如乙醚、四氢呋喃等。许多醚类在和空气接触下会慢慢生成 不易挥发且结构不明的过氧化物。过氧化物在加热下容易分解而爆炸。 因此贮藏过久的醚类和呋喃类化合物在使用前，尤其是在贮藏过久的醚类和呋喃类化合物在使用前，尤其是在蒸馏前应当检验是否有过氧化物的存在蒸馏前应当检验是否有过氧化物的存在。检验的方法：用包含一滴淀粉指示剂的1 mL 10% KI 溶液

44、和10 mL 醚液混合，没有颜色变化， 则没有过氧化物。或者用1%硫酸亚铁铵溶液，硫酸亚铁和硫氰化钾 溶液测试。若有，则加入5% FeSO4 或偏亚硫酸氢钠溶液于醚中 并摇动，使过氧化物分解。CaCl2预干燥，在钠丝或LiAlH4中回流 蒸出。储藏于密闭的瓶中，并保存于阴凉黑暗中。 常用溶剂的纯化常用溶剂的纯化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C（5）酰胺类酰胺类 如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，HMPT等。加入CaH2回流， 减压蒸出，否则其容易分解。加入新活化的分子筛储藏于瓶中， 并注明日期。（6）二甲基亚砜二甲基亚砜 加入C

45、aH2搅拌过夜，然后减压分馏。加入新活化的分子筛 储藏于小瓶中，并注明日期。（7） 吡啶吡啶 可以用KOH，NaOH, CaO, BaO 或钠，然后蒸出。加入新活化的 5分子筛密闭保存，并注明日期。 常用溶剂的纯化常用溶剂的纯化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C（8）乙醇乙醇 主要杂质为杂醇油，醛，醇，酮和水。可用的纯化方法为镁屑 和碘回流，与CaO一同回流并蒸出。加入新活化的3A分子筛 储藏于小瓶中。注意：在应用金属化合物作为纯化剂时，蒸馏时蒸馏瓶中注意：在应用金属化合物作为纯化剂时，蒸馏时蒸馏瓶中 的溶剂应最少保持在四分之

46、一的体积，绝不允许蒸干，的溶剂应最少保持在四分之一的体积，绝不允许蒸干， 否则会发生危险。否则会发生危险。这里介绍的仅仅是部分溶剂的处理方法，其它溶剂的纯化见有关参考书（如Purification of laboratory chemicals, fourth edition, 世界图书出版社 2000.6.）。 常用溶剂的纯化常用溶剂的纯化Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C 所谓敏感化合物，这里指在空气中的氧或水汽的作用下会迅速发生明显变化的那些物质。涉及这类物质的反应，可在普通的磨口仪器中进行，也可在专门的玻璃仪器中进行。

47、所需的附件包括：一个惰气源，真空泵和双排管。敏感化合物的实验操作装敏感化合物的实验操作装置置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1. 反应装置反应装置 1）普通装置）普通装置一般用二口瓶或三口瓶。敏感化合物反应的普通装置敏感化合物反应的普通装置敏感化合物的实验操作装置敏感化合物的实验操作装置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C2）实验室常用的其它专门反应仪器）实验室常用的其它专门反应仪器 敏感化合物反应的其它专门装置敏感化合物反应的其它专门装置 敏感化合物的实验操

48、作装置敏感化合物的实验操作装置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C2. 双排管双排管双排管的一端接惰性气体，另一端接真空泵。向下的接口通向反应装置。(图7)图图7 双排管双排管 敏感化合物的实验操作装置敏感化合物的实验操作装置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C3. 惰性气体和真空泵惰性气体和真空泵常用的惰性气体是氮气，氩气和氦气。由于氮气价廉易得，大多数有机金属试剂在其中均能保持稳定，因此最为常用。它还有密氮气度与空气相近的优点，所以再其中称量物质时无须校正。一

49、般来说，含量在99.998%的氮气即能保护大多数空气敏感化合物。实验室存放氮气一般用氮气钢瓶。为了防止发生意外，氮气钢瓶一般存放于实验室内的固定位置，并用铁链固定。打开或关闭氮气钢瓶都是首先要拧动钢瓶开关，然后再旋动减压阀和调节旋钮。为了纯化气体，在惰性气体进入反应器之前，通常需要用氧化银柱，分子筛柱等进行干燥和纯化。 在双排管的一端连接惰性气体，另一端则连接真空泵。之所以连接 真空泵，是为了节约惰性气体。对于很大的反应器，若仅靠以惰性 气体冲洗来置换空气，则不但费时，也颇浪费。一般先将反应器 抽成真空，然后再充以惰性气体。如此重复几次，即可将氧气除净。 期间若以小火烘烤，效果更佳。为了保护真

50、空泵，要在真空管道上 装干燥塔。敏感化合物的实验操作装置敏感化合物的实验操作装置Spanning Drug Development & the Globe BioDuro C1. 反应器的除水除氧反应器的除水除氧 一般先将反应器抽成真空，然后再充以惰性气体。如此重复几次， 即可将氧气除净。期间最好小火烘烤，效果更佳。2. 液体的转移液体的转移 1） 注射器注射器将洗净烘干的注射器装好后，通过吸入和挤出氮气将针管冲洗几次。用注射器从惰性气体冲洗装置中，吸取相当于总容量四分之三的氮气，将针筒推至总行程的一半处，借此对针筒进行最后一次清洗。然后刺入储器，将针筒内的氮气全部推出。将针头深入液面下，利用储器中液面上的压力，让液体进入针筒