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文档简介
1、23:47:29第第第第第第十一十一十一十一十一十一章章章章章章高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳分析法分析法分析法分析法分析法分析法一、一、离子分析离子分析analysis of ion二、二、药物分析药物分析analysis of pharmaceutics三、手性化合物分析三、手性化合物分析analysis of chiral compounds四、氨基酸分析四、氨基酸分析analysis of amino acids五、五、核酸分析及核酸分析及DNADNA测序测序analysis of nucleic acids and sequenc
2、e of DNA六、新进展及热点问题六、新进展及热点问题advances and special topics第五节第五节第五节第五节第五节第五节高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳高效毛细管电泳应用与进展应用与进展应用与进展应用与进展应用与进展应用与进展high performance capillary electrophoresis,HPCEapplication and advances of HPCE23:47:29一、离子分析一、离子分析一、离子分析一、离子分析一、离子分析一、离子分析 analysis of ionanalysis of iona
3、nalysis of ion阳离子分析阳离子分析 迁移方向和电渗流方向一致; 4.5min内分离了24种金属离子; 阳极进样,阴极检测; 具有很高的灵敏度;23:47:29阴离子分析阴离子分析阴离子分析阴离子分析阴离子分析阴离子分析 阴离子电泳方向和电渗流方向相反、速度接近,分析时间长、效率低; 质量小、电荷密度大的离子如:SO4-2、Cl-、F-等,电泳速率大于电渗流,阳极端流出,在阴极端无法检测; 加入电渗流改性剂,十六烷基三甲基溴化胺等,使电泳方向和电渗流方向一致,可在3.1min内分离36种阴离子;阴极进样,阳极检测;离子价态及存在形态分析;23:47:29二、药物分析二、药物分析二、
4、药物分析二、药物分析二、药物分析二、药物分析 analysis of pharmaceuticsanalysis of pharmaceuticsanalysis of pharmaceutics 检测体液或细胞中某些代谢产物的分析; 尿液中的氨基酸含量作为临床诊断糖尿病的辅助手段; 采用毛细管区带电泳方式,在11min内分离17种药物;23:47:29采用MEKC模式,鉴定违禁药物;效果优于HPLG法23:47:29三、手性化合物分析三、手性化合物分析三、手性化合物分析三、手性化合物分析三、手性化合物分析三、手性化合物分析 analysis of analysis of analysis o
5、f chiralchiralchiral compounds compounds compounds 合成获得单一手性化合物相当困难;528种手性合成药物,61中以单一对映体形式销售,其他为外消旋体;检测分析也相当困难;研究热点;R-反应停是安眠药,S-式致胎儿畸形; HPCE分离分析手性化合物的方法:加入手性选择剂;形成配合物的稳定常数有差异,结合HPCE的高效率; 常用手性选择剂:环糊精及其衍生物;手性冠醚;手性表面活性剂(氨基酸衍生物、胆酸钠、牛磺脱氧胆酸及其钠盐、低聚糖等天然手性表面活性剂)23:47:29四、氨基酸与蛋白质分析四、氨基酸与蛋白质分析四、氨基酸与蛋白质分析四、氨基酸与蛋
6、白质分析四、氨基酸与蛋白质分析四、氨基酸与蛋白质分析 analysis of amino acidsanalysis of amino acidsanalysis of amino acids采用MEKC模式,在25分钟内分离了23种丹酰化氨基酸;HPCE可取代传统的氨基酸分析仪;问题:吸附和检测;23:47:29蛋白质分析蛋白质分析蛋白质分析蛋白质分析蛋白质分析蛋白质分析23:47:29五、核酸分析及五、核酸分析及五、核酸分析及五、核酸分析及五、核酸分析及五、核酸分析及DNADNADNADNADNADNA排序排序排序排序排序排序 analysis of nucleic acids and s
7、equenceanalysis of nucleic acids and sequenceanalysis of nucleic acids and sequence of DNAof DNAof DNA重要分析手段;图,酶解的双螺旋DNA限制性片段的分离;23:47:30六、新进展六、新进展六、新进展六、新进展六、新进展六、新进展advances and special topicsadvances and special topicsadvances and special topics1.1.微型化微型化 整体化学分析系统(TAS)及TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作为毛细管,理论塔板
8、数105/m;2.2.联用仪器联用仪器 CE-MS;3.3.阵列毛细管凝胶电泳阵列毛细管凝胶电泳 应用于人类基因DNA测序; 510万个基因,30亿个碱基对,目前最有效的DNA序列分析仪,10小时/次;可同时电泳24个样品;速度1200碱基对/小时,提高速度!100支毛细管阵列电泳;速度280碱基对/小时/支23:47:30请选择内容请选择内容请选择内容请选择内容请选择内容请选择内容第一节第一节 概述概述generalization第二节第二节 高效毛细管电泳的理论基础高效毛细管电泳的理论基础basic theory of HPCE第三节第三节 高效毛细管电泳仪器高效毛细管电泳仪器high performance capillary electrophor
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