MERSCoV实验室生物安全+采样送样要求(中东呼吸综合征冠状病毒(MERSCoV)实验室生物安全)

1、 中东呼吸综合征（中东呼吸综合征（MERS）MERS病毒是一种新型的冠状病毒，与SARS类似，大多数MERS病毒感染病例发生在沙特，因此又被命名为中东呼吸综合征冠状病毒（ Middle East Respiratory Syndrome ,MERS）。从2012年夏天开始，从沙特逐步扩散到其它国家。u 2015年5月27日晚10时世界卫生组织通报：韩国一例确诊中东呼吸综合征(MERS)病例的密切接触者经香港入境广东省惠州市，已出现发热症状。u2015年5月29日，我国出现首例输入性中东呼吸综合征（MERS）确诊病例。最新进展最新进展On 29 May 2015, the National He

2、alth and Family Planning Commission (NHFPC) of China notified WHO of one confirmed case of Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus (MERS-CoV)./csr/don/30-may-2015-mers-china/en/中东呼吸综合征冠状病毒实验室生物安全中东呼吸综合征冠状病毒实验室生物安全依据：依据：病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例 中华人民共和国国务院令（第中华人民共和国国务院令（第

3、424424号）号）20042004. .11 11. .12 12起实施起实施可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定 卫生部第卫生部第4545号令，号令，20062006年年2 2月月1 1日起施行日起施行 人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法 卫生部第卫生部第5050号令，号令，20062006年年8 8月月15 15日起施行日起施行人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办

4、法 卫生部第卫生部第6868号令，号令， 2009 2009年年10 10月月1 1日起施行日起施行人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录 卫生部（卫科教发卫生部（卫科教发200615200615号），号），20062006年年1 1月月11 11日发布日发布实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求 中华人民共和国国家标准（中华人民共和国国家标准（GB19489-2008GB19489-2008）根据国家卫生和计划生育委员会颁布的人间传播的病原微生物名录中的SARS风险和相关规定，2012年经过专家委员会论证，中东呼吸综合征病毒按照管理。凡涉及病毒的分离、培养和动物实验需在生物安

5、全三级（BSL-3）实验室内进行；未经培养的感染材料需在生物安全三级（BSL-3）实验室内进行；灭活材料和无感染性材料的操作可在生物安全2级（BSL-2）实验室内进行。一、病原微生物样本采集n 具有与采集病原微生物标本所需要的生物安全防护水平相适应的设备；n 具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员；n 具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施；n 具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。n 样本的来源、采集过程和方法等作详细记录。病原微生物实验室生物安全管理条例1.采集标本者基本素质采集标本者基本素质 经过专门培训。经过专门培训。 采集标本前要穿戴好防护装置。采集标本前要穿戴好防护装置。

6、2.标本的采集标本的采集 由受过培训的人员采集标本；由受过培训的人员采集标本； 所有操作均要戴手套；所有操作均要戴手套； 规定的程序和方法；规定的程序和方法； 置于适当容器中运至实验室。置于适当容器中运至实验室。3.采集标本的包装采集标本的包装 螺口塑料管。螺口塑料管。 A、B类包装类包装/专用标本运输箱；专用标本运输箱；4. 记录记录（一）（一） 依据依据 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定卫生部第45号令 2006年2月1日起施行 审批范围：第一类病原微生物菌（毒）种或样本第二类病原微生物菌（毒）种或样本第三类病原微生物运输包装分类为A类的病原微生物菌（毒）种或样本

7、疑似高致病性病原微生物菌（毒）种或样本二、病原微生物样本运输A类感染性物质的包装与标签B类感染性物质的包装与标签 （二）（二） 包装包装（三）运输审批（三）运输审批运输审批申请材料运输审批申请材料：1. 运输申请表；2. 法人资格证明材料（复印件）；3. 接收高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的单位（简称接收单位)同意接收的证明文件；4. 接收单位的有关证明文件（复印件）； (1) 具有法人资格； (2) 具备从事高致病性病原微生物实验活动资格的实验室； (3) 取得有关政府主管部门核发的从事高致病性病原微生物实验活动、菌（毒）种或样本保藏、生物制品生产等的批准文件；5. 容器或包装材料的批准

8、文号、合格证书（复印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输容器或包装材料承诺书；6. 其它有关资料。 未经批准，不得运输。省内运输，省内审批跨省运输，由运输出发地省级卫生行政部门进行初审；符合要求的，上报卫生部审批。根据疾病控制工作的需要，应当向中国疾病预防控制中心运送高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，由中国疾病预防控制中心审批。紧急运输多次运输（四）运输要求（四）运输要求运输之前的包装以及送达后包装的开启，应当在符合生物安全规定的场所中进行。运输前应当仔细检查容器和包装是否符合安全要求，所有容器和包装的标签以及标本登记表是否完整无误，容器放置方向是否正确。 有专人护送，护送人员不

9、得少于两人。护送过程中采取相应的防护措施。 护送人员应进行相关的生物安全知识培训。（五）冷藏或冷冻样品（五）冷藏或冷冻样品 使用冰或干冰时，必须有内部支撑物，以保证在冰或干冰消融后辅助包装仍处于原位。如果使用冰，外包装或合成包装件必须防漏；如果使用干冰，包装设计和构造 必须留有能排出二氧化碳的孔， 以防产生可能使包装破裂的压力。 主容器和辅助包装材料必须能承受制冷剂的温度，并承受失去制冷作用后所产生的温度和压力。（六）实验室间转运（六）实验室间转运应制定对危险材料运输的政策和程序，包括危险材料在实验室内、实验室所在机构内及机构外部的运输，应符合国家和国际规定的要求。应以防止污染人员或环境的方式

10、运输危险材料，并有可靠的安保措施。危险材料应置于被批准的本质安全的防漏容器中运输。不同的标本检测生物安全级别要求如下：疑似标本或病例接触者的分装可在生物安全二级实验室的生物安全柜内进行；确诊病例的标本分装、灭活应在生物安全三级实验室进行；病毒培养物的灭活应在生物安全三级实验室进行。灭活标本的抗原快速检测和ELISA检测血清抗体时，可在生物安全二级实验室内操作； 非灭活的中东呼吸综合征冠状病毒相关实验应在生物安全三级实验室里进行。阳性标本和分离物的保存及销毁应按照病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院第424号令）执行。中东呼吸综合征冠状病毒相关动物实验应在动物BSL-3实验室进行，并且按照动

11、物BSL-3实验室操作要求进行。三、实验活动四、样本保藏与销毁集中保藏。制定严格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）种和样本进出和储存的记录，建立档案制度，并指定专人负责。对高致病性病原微生物菌（毒）种和样本应当设专库或者专柜单独储存。实验室在相关实验活动结束后，应当依照国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定，及时将病原微生物菌（毒）种和样本就地销毁或者送交保藏机构保管。五、废物处置实验室危险废物处理和处置的管理应符合国家或地方法规和标准的要求。废水、废气及固体废物分类处置废水废水处理设备废气HEPA固体废物高压蒸汽灭菌分类收集容器暂存实验室工作人员应穿戴合适正确的个人防护设备（PPE）；

12、生物安全三级实验室工作人员应穿戴N95或以上的防护口罩、连体防护服、戴眼罩、双层手套、鞋套等。六、个体防护七、人员培训及健康管理u从事中东呼吸综合征冠状病毒检测的技术人员应经过生物安全培训，并取得相应资格和具备相应的实验技能。u实验室工作人员应进行健康监测，每年组织进行体检，并建立健康档案；u凡是具有发热、患有基础性疾病、免疫力低下、免疫抑制、免疫缺陷的人群以及年老体弱者和孕妇不适合操作本实验。u实验室工作人员出现与MERS-CoV有关的感染临床症状或者体征时，实验室负责人应当向负责实验室感染控制工作的机构或者人员报告，同时派专人陪同及时就诊；实验室工作人员应当将近期所接触的病原微生物的种类和

13、危险程度如实告知诊治医疗机构。根据风险评估编写实验室意外事故应急处置预案应急预案要经过评审，正式发布应急物资配备要齐全应急物资储备要充分对实验室工作人员进行应急处置的培训定期组织实验室工作人员进行应急演练出现意外事故要及时上报八、应急处置 二、医院感染预防与控制二、医院感染预防与控制建筑布局和工作流程-医院隔离技术规范消毒用品和防护用品-数量充足、符合要求医务人员遵守标准预防与额外预防原则落实手卫生、口罩及隔离等防护措施医务人员转运疑似与确诊患者时做好防护22（一）发热（一）发热门（急）诊门（急）诊（二）收治疑似或确诊病人的病区（房）二）收治疑似或确诊病人的病区（房）23建筑布局和工作流程 符

14、合医院隔离技术规范要求防护用品和消毒用品 应当配备数量充足、符合要求及时采取隔离措施及时采取隔离措施 疑似患者和确诊患者应当分开安置 疑似患者单间隔离，确诊的同类患者可以置于多人房间病房管理具体措施病房管理具体措施医务人员进入/离开隔离病房时，应当遵循医院隔离技术规范的有关要求，并正确穿脱防护用品。原则上患者的活动限制在隔离病房内，若确需离开时，应当采取措施防止交叉感染疑似患者的听诊器、温度计、血压计等医疗器具实行专人专用。非专人专用的复用器具使用后应按要求进行消毒清洁。患者出院、转院后应当按照要求进行终末处理严格探视制度，不设陪护。患者病原学检测连续两次阴性， 可根据相应规定解除隔离措施。医

15、务人员防护原则与具体措施医务人员防护原则与具体措施标准防护飞沫隔离空气隔离接触隔离25额外额外预防预防防护用品应当符合国家有关标准。每次（每个操作）接触患者前后正确进行手卫生。防护用品被污染后应当及时更换，进入和离开隔离病房时应当按要求穿脱防护用品医用防护口罩执行标准医用防护口罩执行标准强制性国强制性国家标准家标准2010版增加版增加密合性要求密合性要求2010-09-02发布发布 2011-08-01实施实施医用外科口罩执行标准医用外科口罩执行标准强制性行强制性行业标准业标准2011-12-31发布发布 2013-06-01实施实施医用一次性防护服技术要求医用一次性防护服技术要求国家质量监督

16、检验检疫总局发布2003/04/29发布；2003/04/29实施GB-19082-2003-GB-19082-2009关键技术指标关键技术指标合成血穿透不低于2级（1.75kPa）；关键部位断裂强力不小于45N；伸长率不小于15%；关键部分材料及接缝处过滤效率不小于70%标准预防标准预防视所有病人，均为具有潜在感染性的病人；视所有病人，均为具有潜在感染性的病人；即认为病人的血液、体液、分泌物、排泄物、均具有即认为病人的血液、体液、分泌物、排泄物、均具有传染性，必须进行隔离；传染性，必须进行隔离；不论是否有明显的血液污染或是否接触非完整的皮肤不论是否有明显的血液污染或是否接触非完整的皮肤与粘膜

17、，接触上述物质者，必须采取防护措施。与粘膜，接触上述物质者，必须采取防护措施。29额外预防额外预防 接触疑似（具有重要流行病学意义的感染者）或确接触疑似（具有重要流行病学意义的感染者）或确诊的患者，应在标准防护的基础上，针对传播途径增诊的患者，应在标准防护的基础上，针对传播途径增加防护加防护呼吸道防护（医用防护口罩，通风，负压病房等）呼吸道防护（医用防护口罩，通风，负压病房等）接触防护接触防护 （防护服与手卫生、环境卫生）（防护服与手卫生、环境卫生）额外预防额外预防以传播途径为基础的预防措施以传播途径为基础的预防措施根据导致感染的风险采取相应防护措施根据导致感染的风险采取相应防护措施接触患者的

18、血液、体液、分泌物、排泄物、呕吐接触患者的血液、体液、分泌物、排泄物、呕吐物及污染物品时应当戴清洁手套，脱手套后洗手。物及污染物品时应当戴清洁手套，脱手套后洗手。可能受到患者血液、体液、分泌物等物质喷溅时，可能受到患者血液、体液、分泌物等物质喷溅时，应当戴外科口罩或医用防护口罩、护目镜、穿隔应当戴外科口罩或医用防护口罩、护目镜、穿隔离衣。离衣。对疑似、临床诊断或确诊患者进行气管插管等有对疑似、临床诊断或确诊患者进行气管插管等有创操作时，应当戴外科口罩或医用防护口罩、医创操作时，应当戴外科口罩或医用防护口罩、医用乳胶手套、护目镜、防护面屏、穿防渗隔离衣。用乳胶手套、护目镜、防护面屏、穿防渗隔离衣

19、。外科口罩、医用防护口罩、护目镜、隔离衣等防外科口罩、医用防护口罩、护目镜、隔离衣等防护用品被血液、体液、分泌物等污染时应当及时护用品被血液、体液、分泌物等污染时应当及时更换。更换。正确穿戴和脱摘防护用品，脱去手套或隔离衣后正确穿戴和脱摘防护用品，脱去手套或隔离衣后立即洗手或手消毒。立即洗手或手消毒。MERS-CoV感染标本采集对象感染标本采集对象l中东呼吸综合征冠状病毒感染疑似病例、临床诊断病例及需要进一步研究的确诊病例；l其它需要进行MERS-CoV感染诊断或鉴别诊断者。标本采集要求1.从事MERS-CoV检测标本采集的技术人员应经过生物安全培训，培训合格且具备相应的实验技能。在标本采集过

20、程中，采样人员进行安全防护(采集人必须穿戴连体防护服、帽子、眼罩、N95口罩、脚套和手套)。住院病例住院病例的标本由所在医院医护人员在当地疾控机构专业人员指导下采集。密切接触者密切接触者标本由当地疾控机构负责采集。根据实验室检测工作的需要，结合病程再次采样再次采样。采集标本种类和要求采集标本种类和要求l呼吸道（上、下呼吸道）和其他样品（血清、尿液和粪便）、尸检标本。l每个病例应尽可能同时采集上、下呼吸道标本，下呼吸道标本最佳，建议同时采集粪便和尿液标本。l应尽可能采取发病初期和恢复期双份血清标本以确定是否感染，双份血清样品间隔1421天采集比较理想，第一份血清应在发病第一周内采集。但单份样品的检测对于确定疑似病例也有价值，如果只能采集一份样品，应该在出现症状后至少14天采集。l 标本管标识明确：患者姓名，性别，样品类型，检测指标，采样日期和送检单位；与样品送检单一致。l 院内转运时，标本应该放置在耐用、防渗透的二级容器中进行转运。为减少任何标本破、漏的风险，不要使用任何气动传输系统来转运任何可能疑似患者标本。l 转运至CDC的MERS-CoV标本应该充分包裹，转运时不能开盖或分装标本。标本转运应该符合三重包装系统要求：内层是主要的容器（一个可密封的标本袋缠绕以可吸收材料），第二层是防水、防渗漏的容器，外层是用于转运的包装。MERS-CoV感染