定31菊花的组织培养[通用]

1、3.1菊花的组织培养(一)、植物组织培养的基本过程1理论基础：_。2细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在_、结构、生理功能上出现_的过程。细胞的全能性形态稳定性差异一、基础知识3过程：_的植物组织或细胞脱分化,愈伤组织再分化,根、芽完整植株。离体离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽植物体植物组织培养的基本过程移栽(1)愈伤组织的特点：细胞排列疏松而无规则，是高度_的呈无定形状态的_细胞。(2)脱（去）分化：由高度分化的植物组织或细胞产生_的过程。(3)再分化：_继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 (4)如何控制细胞的脱分化与去分化？液泡化薄壁愈伤组织愈伤组织阅读32页解

2、决下列问题：通过激素控制1外植体的选取不同植物的组织培养难度 _ 差别很大如烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导比较难如菊花的组织培养，一般选择_植株茎_。对于同一种植物材料，材料的_、 _等也会影响实验结果。年龄保存时间的长短（二）影响植物组织培养的因素未开花上部新萌生的侧枝 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。思 考？ 在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？2.培养基的配制常用的一种培养基为_其主要成分包括：_元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S_元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I

3、、Co_ ：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等_ ：生长素、细胞分裂素、赤霉素等MS培养基大量微量有机物植物激素思 考？ 各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压； 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养。 在植物组织培养的过程中，为什么需要无菌操作？思 考？ 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。 用于植物组织培养的培养

4、基同样适合于某些微生物的生长。使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于_，但_先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用_提高细胞分裂细胞不分化分化频率3.植物激素植物激素中_和_是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。_、_以及_等，都会影响实验结果。 生长素细胞分裂素植物激素的浓度使用的先后顺序用量的比例生长素/细胞分裂素比值高时 促进_，抑制_生长素/细胞分裂素比值低时促进_，抑制_生长素/细胞分裂素比值适中时促进_ 根分化芽形成芽分化根形成促进愈伤组织生长使用量 实验结果4.环境因素 (pH、温度、光照)不同的植物对各种条件的要求往往_。 如进行菊花的组织培

5、养，一般将pH控制在_左右；温度控制在_ ；并且每天用日光灯照射_ 。 不同5.81822 12h5.无菌环境在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境。无菌技术包括对_和_ 的消毒灭菌培养基外植体制备MS固体培养基外植体消毒 接种培养栽培移栽二、实验操作（一）制备MS固体培养基 实验室一般使用_保存的配制好的培养基母液来制备1.配制各种母液 配制母液时，大量元素浓缩_ ，微量元素浓缩_ ，常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照_的质量浓度单独配制母液。 用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。1mg/ml410倍100倍二、实验操作2.配制培养基。植物激素在

6、菊花组织培养中，可以不添加_ ，原因是菊花茎段组织培养_ 。比较容易配制培养液调PH培养基的分装 3.灭菌将分装好的培养基连同其他器械一起进行_。高压蒸汽灭菌（二）外植体消毒 将菊花嫩枝茎段用流水冲洗后，用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，先用70%的酒精消毒67 s，再用_清洗，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒12 min，最后再用无菌水至少清洗3次。流水冲洗酒精无菌水氯化汞无菌水浓度_摇动_次时间_s浓度_时间_min至少清洗_次漂净_无菌水70%23670.1%123消毒液 不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受能力。 在外植体消毒过程中，是不是强度越大越好，

7、为什么？ 思 考？（三）接种 接种操作都必须在_旁进行。将菊花茎段插入_时应注意方向，不要倒插。酒精灯培养基（四）培养 接种后的锥形瓶最好放在_中培养。培养期间定期进行_，温度控制在_，并且每天用日光灯光照_h。无菌箱消毒182212（五）移栽和栽培：移栽前用流水清洗根部的_，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗生长情况，适时烧水，施肥，直至开花。培养基1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个

8、操作过程中，是如何来实现无菌环境的？思 考？你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。思 考？植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光(1)分离出来的胡萝卜根细胞成为细胞团是通过_分裂方式来完成的。(2)细胞团中相同的细胞在发育成胚状体和植株的过程中，形态结构和生理功能逐渐向不同的方向发生了变化，这种现象叫做细胞的_。(3)本实验说明了植物

9、细胞具有_。(4)图示培育新的胡萝卜植株的技术在生物学上属于何种生殖方式？_。1.美国科学家将分离得到的成熟胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养，由单个细胞发育成完整的新植株，如图所示，开花的胡萝卜，胡萝卜根的切片，从根的切片分离的细胞，由单个细胞分裂后形成的细胞团，胚状体，试管植物。请分析：无性生殖有丝分化全能性A3.回答下列有关植物组织培养的问题。(1)用于植物组织培养的植物材料称为_.(2)组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为 _。(3)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示，据图指出两种激

10、素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：脱分化外植体当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，_；_。(4)若植物激素Y是生长素，在植物组织培养中其主要作用是_；则植物激素X的名称是_。(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状，其原因是_。未分化细胞群经分裂形成愈伤组织当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根促进细胞的生长、分裂和分化细胞分裂素组织培养形成试管苗的过程属于无性繁殖，后代不发生性状分离【解析】本题主要考查植物组织培养的相关知识。(1)用于植物组织培养的材料叫外植体。(2)植物组织培养的核心过程是脱分化与再分化，脱分化指由分化状态变为未分化状态，再分化指由未分化状态变为分化状态。(3)仔细分析所给示意图，可知植物激素X与植物激素Y浓度比为l时，利于愈伤组织的形成，大于l时利于细胞群分化出芽，小于1时利于细胞群分化出根。(4)生长素在植物组织培养中主要作用是促进细胞生长、分裂和分化，植物组织培养过程中除需要生长素外还需细胞分裂素，二者