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文档简介
1、检验项目标准操作规程(SOP)- 1 -检验标本的采集检验标本的采集一、标本的正确采集一、标本的正确采集标本采集必须符合 2 个条件,即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情,避免干扰因素的存在。二、标本的贮存二、标本的贮存标本采集后尽快送至实验室,若不能及时送检,已采集的标本要按检验规定的贮存条件,如室温、冰浴、温浴或防腐贮存,将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中,避免振摇,以免标本遗洒或溶血影响检测结果。三、标本的运送三、标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。四、标本的签收四、标本的签收临床工作人员从口才采集标本并
2、将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本,均应按标准化要求进行,做到认真核对,包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。五、标本的处理五、标本的处理 1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理,否则会影响检测结果的准确性。 2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆,血清与血块簪时间接触可发生变化。 3、实验室接收标本后处理应注意事项: (1) 、时间:实验室接收标本后应尽快予以分类和离心。 、促凝标本应尽早处理,可在采血 5-15 分钟后离心;抗凝标本可采血后立即离心;非抗凝(无促凝)标本采血 30-60 分钟后
3、离心;抗凝全血标本(全血细胞分析、ESR 等)不需要离心。 (2) 、温度:一般标本为室温(最好是 22-25)放置;冷藏标本(对温度依赖性分析物)应保持在 2-8直到温度控制离心。 (3) 、采血管放置:应管口(盖管塞)向上,保持垂直立位放置。 (4) 、采血管必须封口:管塞移去后会使血 PH 改变,影响检测结果,封口可以减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。六、分析前的可变因素六、分析前的可变因素 1 1、生物因素:可引起所检测物质在体内的变化,此种变化与检测方法无关,分为可变的和固定的生物因素。 2 2、干扰因素:在收集和分析标本过程中,干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符。七、标本采集的
4、基本原则七、标本采集的基本原则遵照医嘱采集各种标本均应按医嘱执行。凡对检验申请单有疑问,应核实清楚后再执行。1、充分准备(1)采集标本前,应明确检验项目、检验目的及注意事项并向病人作耐心解释,以取得合作。(2).应根据检验目的选择适当容器,容器外必须贴上标签,注明病人姓名、科室、床号、检查目的、送检时间等。检验项目标准操作规程(SOP)- 2 -2、严格查对(1).采集前应认真查对医嘱,核对申请项目、病人姓名、床号等。(2).采集完毕及送检前应重复查对。3、正确采集采集标本既要保证及时,又须保证采集量准确,这样才能保证送检标本的质量。4、及时送检标本采集后应及时送检,特殊标本还应注明采集时间。
5、八、标本采集方法八、标本采集方法(一) 、静脉血液采集静脉血液采集1. 目的目的抽取静脉血标本以做各项检验。2. 适用范围适用范围适用于本科做生化、免疫、血常规等项目所需血液标本的采集。3. 物品准备物品准备:止血带、一次性垫巾、无菌棉签、复合碘消毒液、一次性采血针、负压真空管(数量和种类根据要求选取后检查灭菌日期、有效期及有无漏气) 、试管架、编号笔、口罩。4. 检验申请单填写要求检验申请单填写要求:4.1 检验申请单用钢笔填写,使用正楷字,字迹清楚,填写完整。4.2 填写内容包括:受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。5. 操作步骤操
6、作步骤:5.1 查对检验申请单、受检者姓名及是否已按医嘱准备,向受检者解释操作目的,以取得合作。在采血管上贴好与检验申请单相对应的标签。5.2 选择血管,常用肘窝静脉、肘正中静脉、前臂内侧静脉,小儿可采用颈外静脉、大隐静脉。5.3 在穿刺部位肢体下放一次性垫巾、止血带。5.4 用复合碘棉签消毒穿刺部位。5.5 在静脉穿刺部位上方 4-7 厘米处扎止血带,嘱受检者握紧拳头,使静脉充盈显露。5.6 穿刺:推荐使用真空采血技术。摘掉静脉穿刺针上的保护套,进行静脉穿刺,穿刺成功后,用贴好标签的负压真空管采集静脉血,松开止血带,受检者松拳,用棉签压住进针处,拔出针头,嘱采血对象按压 2-3 分钟。5.7
7、 为受检者整理衣袖。5.8 采血完毕后,产生的医疗垃圾按规定分类处理。6. 注意事项注意事项6.1 采血前应核对好姓名和检验项目,明确标本要求。6.2 抗凝管收集血标本后,立即将试管轻轻颠倒 56 次,使血液与抗凝剂充分混匀。6.3 一般生化、免疫检验用干燥非抗凝管收集标本,采样量 3-5ml。若检验项目较多,应适当增加采样量。6.4 血常规检验用 EDTAK2 抗凝管收集标本,采样量 0.5-1 毫升。6.5 凝血四项、血红蛋白电泳、3P 试验用枸橼酸钠(0.2ml)抗凝管收集标本,采样量必须准确,为 1.8ml。血沉用枸橼酸钠 0.4ml 抗凝,抽血 1.6ml。6.6 高铁血红蛋白还原试
8、验(G6PD)以枸橼酸钠 0.2ml 抗凝,另加入葡萄糖 20mg,抽静脉血 1.8ml,混匀。检验项目标准操作规程(SOP)- 3 -6.7 糖化血红蛋白测定需用肝素管抗凝。6.8 血液粘度测定需同时抽取血常规、血沉和肝素抗凝血(5ml)三份样本。6.9 餐后,血糖、血脂可增加而影响测定结果,故一般应空腹抽血。有些食物成分:高蛋白、高脂及饮食可引起血中蛋白、血脂、尿酸增高;香蕉、咖啡等可引起尿中儿茶酚胺代谢产物的测定等。6.10 药物影响:如异菸肼、庆大毒素、氨芐青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加。因此,建议检查前几天就停止使用有干扰的药物,且申请单最好能注明近期用药情况。7
9、. 标本运输及实验前存放标本运输及实验前存放:低温条件 2-8或室温运输,1 小时内送检。1 小时内分离出血清,室温放置不超过 4 小时,4保存不超过 8 小时,长时间保存需在冰冻条件下,且只能冻融 1 次。8. 附加检验项目申请附加检验项目申请:8.1 标本采集送出后需附加检验项目的,其申请应在标本采集当天上午 11 点 30 分以前电话通知实验室。8.2 附加检验项目申请为本检验科目录外项目的需提前一天与检验科联系,以便联系其它实验室进行检测。9. 其它其它:如分析失败,将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者,分析原因并告知受检者重新采样检验。 (二)(二) 、末梢血采集、末梢血采集
10、1. 目的目的采集末梢血标本以做门诊血常规检验。2. 适用范围适用范围适用于门诊检验科做血常规等项目所需血液标本的采集。3. 物品准备物品准备:一次性采血针、75%酒精、无菌棉球、0.5 毫升离心管(EDTAK2 抗凝管)、试管架、编号笔、微型震荡器、口罩。4. 检验申请单填写要求检验申请单填写要求:4.1 检验申请单用钢笔填写,使用正楷字,字迹清楚,填写完整。4.2 填写内容包括:受检者姓名、性别、年龄、化验单编号、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集标本年月日时、申请医生及采样者签名。5. 操作步骤操作步骤:5.1 查对检验申请单、受检者姓名及是否已按医嘱准备,向受检者解释操作目的,以取
11、得合作。5.2 常用选择无名指,先用酒精棉球消毒,然后用一次性采血针穿刺,让血液自然流出,用消毒棉球轻拭去第一滴后,将血液收集在 0.5 毫升离心管(EDTAK2 抗凝管),约 0.2-0.3毫升。5.3 用干棉球压住穿刺部位,嘱采血对象按压 2-3 分钟。5.4 在微型震荡器混匀。马上送检。6. 注意事项注意事项6.1 采血前应核对好姓名和检验项目,明确标本要求。6.2 血常规用 EDTAK2 抗凝管收集血标本后,在微型震荡器混匀,使血液与抗凝剂充分混匀。6.3 除特殊情况外,不要在耳垂采血。婴幼儿可自拇指或足跟两侧采血。烧伤患者可根检验项目标准操作规程(SOP)- 4 -据情况选用皮肤完整
12、的肢体末端。采血部位应无炎症或水肿。末梢采血不可用力挤压。7. 标本运输及实验前存放:标本运输及实验前存放:立即送检,如需保存,可置 2-8存放不超过 8 小时。8. 其它其它:如分析失败,将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者,分析原因并告知受检者重新采样检验。 (三)尿液标本采集(三)尿液标本采集 1. 目的目的采集尿液标本以做尿液常规、生化检验。2. 适用范围适用范围适用于本科做尿液常规、生化项目所需尿液标本的采集。3. 物品准备物品准备:专用一次性尿杯、编号笔。4. 检验申请单填写要求检验申请单填写要求:4.1 检验申请单用钢笔填写,使用正楷字,字迹清楚,填写完整。4.2 填写内
13、容包括:受检者姓名、性别、年龄、化验单编号、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集标本年月日时、申请医生及采样者签名。5. 操作步骤:操作步骤:5.1 查对检验申请单、姓名,向受检者解释操作目的,以取得合作。5.2 发一次性尿杯一个给受检者,嘱受检者留取新鲜尿立即送检,以清晨第一次中间段尿为宜。5.3 受检者按要求自己用一次性尿杯留取半杯尿标本交检验科编号待检。6. 注意事项注意事项6.1 根据采集时间,可分为晨尿、随机尿、空腹尿、餐后尿、计时尿(2h、3h、12h、24h)等。一般定性分析测定,可在任意时间留取标本。常规定性分析,多采用晨尿。计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的估计。许多定量
14、分析需收集 24 小时尿液。微生物检验的标本应取尿道排出的中段尿并立即送检。一般尿液检查应留取新鲜尿液置清净、干燥容器中立即送检。 (静脉滴注大剂量青霉素、VitC 时可影响尿蛋白、尿糖及尿隐血结果,应尽量避免) 。6.2 特殊检验如尿妊娠试验、尿糖定性试验一般应取空腹晨尿送检。6.3 标本应避免污染。一般定性分析标本,应在留取后马上检测。若需保存、或收集 24 小时尿液,原则上应首选 04冷藏,必要时可添加化学防腐剂。常用的化学防腐剂有:a. 甲苯(或二甲苯):较常用,如 24h 尿糖定量、尿蛋白定量测定。100ml 尿液中加1ml。不能制止尿液中已有细菌的繁殖。b. 氯仿:防腐效果较甲苯好
15、。可能干扰尿沉渣镜检。c. 盐酸:分析测定甾体激素及其衍生物或儿茶酚胺以及含氮物质时常选用。100ml 尿液中加 1ml,或 24 小时尿液中 10-15ml。d. 甲醛:100ml 尿液中加 0.5ml。用于 24h 尿无机离子定量及艾迪氏计数测定可干扰尿糖测定和干化学法的白细胞测定。7. 其它其它:如分析失败,将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者,分析原因并告知受检者重新采样检验。九、标本正确采集的医学意义九、标本正确采集的医学意义(一) 取样技术引起的分析前变异姿势、静脉加压的持续时间、最后一次进食、体力付出、诊断方法、血样采集时间、溶血、输液、外源性污染等。检验项目标准操作规程
16、(SOP)- 5 -1、姿势从仰卧位到直立位的过程中大约有 8的体内水由血管中进入间质组织中。患者由直立位转为坐位或仰卧位后,抽血测得的蛋白质、蛋白质结合物、细胞比至少让患者仰卧 10 分钟后抽血所测定的结果要高 38。对于一些参数,由上述原因所导致的影响要比分析不精确的影响还要大例如血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、红细胞压积、总蛋白、胆固醇、白蛋白、免疫球蛋白和钙离子。这种改变在有水肿的患者中比在健康人中更明显。人体直立、手臂下垂时的血液浓度比保持手臂于心房水平要高。由于体内循环的改变,由仰卧位到直立位可以导致去甲肾上腺素、醛固酮和肾素水平的升高两倍以上。2、静脉加压的持续时间静脉加压和体
17、位从水平位变为垂直位有相同的效应。所有的高分子物质增高,如 10 分钟的加压时间可使总蛋白升高 20。最多 2 分钟的短期加压几乎不引起什么变化。如对水肿患者的手臂加压,血液浓度的问题将非常突出。3、最后一次进食进食可引起血中葡萄糖、磷酸盐和胆红素的增加,ALT 和钾离子明显增高和尿酸、蛋白质、钙离子、胆固醇中到轻度增高。脂肪摄入的程度决定了甘油三脂的水平。OLewis 阳性血型的人在进食脂肪餐后可呈现碱性磷酸酶明显升高。在实际诊断为目的时,低脂肪的简单早餐对许多血液成分的浓度无明显影响。而另一方面,如果要评估脂肪代谢,就必须坚持12 小时禁食葡萄糖耐量试验前,要求连续几天摄入高碳水化合物。4
18、、体力付出体液临时性的从血管内流入间质中,致使血液中蛋白质、蛋白质结合物和血细胞浓度升高。经过几个小时的运动,尤其是对未经训练过的个体,由于体力所致的细胞损伤导致肌肉组织中的酶如 AST、LD、CK 的浓度升高。5、诊断方法诊断方法对临床实验室结果有许多影响。在采血样之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶的升高在糖耐量试验中,钾、磷和镁离子浓度升高。肌肉注射一些药物如苯二氮卓类、度冷丁、喷他左辛、氯丙嗪、利多卡因、苯巴比妥、异丙嗪,可引起 CK 和肌红蛋白的升高。外科手术可引起急性时相蛋白浓度的升高,从而导致红细胞沉降率加快。6、血样采集时间在每日的不同时间,铁浓度都有明显的变化,在下午的变化最大;而
19、皮质醇、肾上腺素和去甲肾上腺素在早晨的变化最大;肾素、醛固酮、生长激素和甲状旁腺素在晚上的变化最大。7、溶血长时间过度的加压可使血管内溶血,用注射器采血时用力过大或不正确的穿刺吸入静脉周围血导致血管外溶血。溶血可致钾离子浓度升高和 LD、ALT、AST 和酸性磷酸酶活力的升高。如血红蛋白浓度超过 0.2gL 肉眼即可见到溶血。8、输液不可在输液同时及同侧取血样检测。(二) 需要考虑的生物因素1、性别许多实验室检测都列出了不同性别的参考值。对一些被测物,性别间的差异可能是由于体重、体表面积和肌肉重量的不同而导致的。下列试验在男性中所测得的结果比在女性中所测得的高:GGT、甘油三酯、尿酸、肌酐、氨
20、、CK、AST、ALP、铁、尿素、胆固醇。2、种族就酶的参考值来说,种族不会导致明显的差异。就一些底物如胆固醇、甘油三酯、尿酸检验项目标准操作规程(SOP)- 6 -来说,不同社会经济阶层的饮食习惯不同所导致的差异要比种族不同所导致的差异大。在血型的频率分布上,种族差异起着很重要的作用,同样,种族差异在一些血浆蛋白表型和它们蛋白质浓度之间的关系中也起一定的作用,如结合珠蛋白和 a1 一抗胰蛋白酶。3、年龄和老化钙、磷酸盐、总蛋白和白蛋白水平下降而葡萄糖、尿素、胆固醇的浓度和 LD 活性增高。单克隆丙种球蛋白病发病率上升和肌酸清除率的下降都是与年龄相关的改变。肌酸、ALP、GGT 的升高和男性中
21、年龄相关性尿酸的增高仍没有被明确的证实。与成人相比,儿童期的酶活性较高,而铁、铜和免疫球蛋白的浓度较低。4、生物节律个体的不规则的血液成分在 1 天内的变化必须与人体的生理节律相鉴别。后者是 24h 内有规律的反复出现的特定现象。时区改变时常常出现生物节律的改变如穿越经线。机体需要 68h 去适应新的时区。并不是所有的人都出现昼夜节律和生物节律的改变。这些改变常伴有暂时性的血液成分的改变(如在早晨常有几分钟的皮质醇的改变)或血液成分在较长时间内发生变动。个体间的变化、生理节律和长期的变动只在纵向检测时有意义。在横向检测中,因为有参考值范围,所以这些改变没什么意义。5、体重肥胖的男性有较高浓度的
22、尿酸、胆固醇、LD、胰岛素、餐后葡萄糖、AST、肌酐、总蛋白和尿酸。磷酸盐在男性和女性肥胖者中较低,而钙离子只在女性肥胖者中较低。6、酒精饮酒几分钟后AST 会轻度升高3h 后达到最大,但仍在不饮酒的参考范围内。一段时间后,GGT 轻度增高对别的酶的影响很难检测到。饮酒后,甚至是少量的饮酒后,在一些个体中可以检测到甘油三酯持续几个小时或几天的大量增高。慢性饮酒可显示持续性的 GGT 水平升高。7、紧张儿茶酚胺和 1 7 一羟皮质类甾醇的产生增加。皮质醇、肾素、醛固酮和生长激素的血浆水平升高。促甲状腺激素和催乳素的血浆水平也可能增加。8、卧床休息肾脏排泄钠、钙、氯化物、磷酸盐和氨增加ALP 的血
23、浆水平升高。9、外科手术对血细胞计数和血清中酶活性和底物浓度的影响取决于所患的疾病和手术类型。通常,手术后的第一个 24h 内会发生下列改变:血红蛋白浓度下降、白细胞增多、红细胞沉降率升高,像 C 反应蛋白等急性时相蛋白增加、暂时性的中度高胆红素血症和尿素增高。CK 水平明显升高,尤其是在腹部或胸腔手术时,其水平在最高参考限值的 310 倍胆囊切除术后,经常可见到中度转氨酶升高,但在别的外科手术中,很少见到转氦酶的升高。10、电离辐射电离辐射治疗,由于肿瘤组织的溶解,常可导致血小板和白细胞的下降,尿酸升高至 1 785 umoIL(30mgd1)。11、怀孕ALP、胆固醇、甘油三酯、铜、血浆铜
24、蓝蛋白、运铁蛋白、白细胞计数、孕酮、雌二醇、雌三醇和催乳素升高。随怀孕而上升的人绒毛膜促性腺激素(hCG)和甲胎蛋白。铁、镁、钙、总蛋白、白蛋白、胆碱酯酶、血红蛋白、红细胞压积和红细胞计数下降。12、口服避孕药(OC)服用 OC 后,血清中的酶在一定周期内升高,然后降低。任何升高都保持在正常值范围内。甲状腺素结合球蛋白和血浆铜蓝蛋白在女性分别升高 44和 70。检验项目标准操作规程(SOP)- 7 -(三) 、影响检验结果的因素在临床医疗工作中临床医生面对尿沉渣报告中极少量的红血球,会针对导尿或女性患者与男性患者,给予不同的解读。但是对未怀疑的疾病,检验室居然出现阳性报告,临床医师绝不能掉以轻
25、心,简单认定检验报告有误,应小心求证以得到正确的解释。另外尚有一些饮食、生理现象、标本处置不当、药物因素,也会造成判读的偏差。本节主要就影响检验结果的疾病外因素予以简单介绍。1、饮食因素() 、必须空腹(通常指禁食 810 小时,其间只允许喝白开水)的检验项目如:G L u、脂类(L ipid Profile)、铁(FE)、总铁结合力(TIBC)、转肽酶(GTT)、胆汁酸(BileAcid)、胰岛素(1nsulin)等。其它血清学检验如需血清澄清最好空腹:如各种病毒抗体等。() 、空腹超过 48 小时可能会造成胆红素(BIL)两倍以上的增加,而 Glu、白蛋白(ALB)、补体 (Complem
26、entC3)及转铁蛋白(Transferrin)下降。() 、餐后立即抽血,造成高 K 低 P,混浊的血清其 BlL、LDH、TP 增高,有可能造成 UA、BUN 降低。() 、高蛋白饮食者,其 BUN、尿酸(Urate)高而高嘌呤(Purines)食物影响的当然就是 Urate 增高。() 、口服避孕药使 T4(RlA)、TG、ALT、FE、GGT 升高,ALB 低等可影响的检验报告据称有 100 多项。() 、酒精可导致检验结果立即上升的有:UA、乳酸(Lactate);嗜酒者的影响如:GGT、ALT、TG,成瘾者甚至影响其它如:BlL、AST、ALP。2、生理因素() 、怀孕造成甲胎蛋白
27、(AFP)、AMY、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)偏高,BUN、NA、ALB 偏低。() 、剧烈运动后,CK、CREA、BUN、UA、WBC、K+、BlL、LACT、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)会升高。运动员的 LDH、BUN 较高。长期的运动促使 HDLC、Lactate等升高。() 、采血部位、姿势和止血带的使用、采血时要避开水肿、破损部位,应“一针见血”,防止组织损伤,外源性凝血因子进入针管;如果采血过慢或不顺利,可能激活凝血系统使凝血因子活性增高、血小板假性减低。输液病人应在输液装置的对侧胳膊采血,避免血液被稀释。决不能在输液装置的近心端采血。、姿势的影响结果。卧姿、坐姿或站姿
28、,由于造成静脉承受压力不同,会造成影响(站姿较高)如:TP、ALB、CA、HCT、ALT、FE、CHOL 及尿中儿茶酚胺(Catecholamines)。测血中 Catecholamines 时,采血前一周,应避免抽烟,食用如核桃、香蕉及肾上腺素类(epinephrinelike)药物;保持平静勿使其受压力、兴奋等情绪变化仰卧三十分钟后抽血。、对于血色素、白细胞计数、红细胞计数、红细胞比积等检验指标来说卧位采血与坐、立位采血结果有区别。正常人直立位时血浆总量比卧位减少 12左右,血液中以上成分不能通过血管壁转移到间质中去,使其血浆含量升高 51 5。、止血带压迫时间不能过长,最长不超过 1 分
29、钟。压迫时间过长,可引起纤溶活性增强,血小板释放及某些凝血因子活性增强,影响实验结果。、肥胖人士除了 GLU、CHOL、UA 普遍偏高外,肥胖男性尚会有 CREA、TP、HtGB、AST 偏高及 P 偏低的现象,而肥胖女性则有 CA 偏低的情形。3、时辰影响因素检验项目标准操作规程(SOP)- 8 -() 、皮质醇(Cortisol)在睡眠时浓度会增加,因此上下午所测之值可能有明显差异,最好于上下午各采血一次,其它如尿钾(可造成 5 倍之改变)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。() 、促甲状腺素(TSH)在每日不同时辰,其浓度也会出现若干变化。() 、Transferrin 高值出现
30、于 4PM-8PM。() 、WBC 及 LYM 早晨较高,嗜酸粒细胞(EOS)下午较低。() 、TG、P、BUN、HCT 的高值出现于下午 BIL 反之。() 、性别、昼夜节律、季节、海拔高度对试验结果的影响:如晨 6 点左右皮质醇值达最高峰,随后逐渐降低,午夜最低。4、样本处置不当() 、溶血:LDH、HBDH、BlL、AST、CK、CKMB、AST、MG、ACP、K 偏高。其它影响较小的,诸如凝血因子、蛋白质分析、ALP、FE、P。等在交叉配血试验中血样溶血严重干扰对结果的判断。红细胞膜完整性被破坏会严重影响实验结果的项目主要有:LDH、K+、Hb、ACP;有值得注意的影响的项目主要有:F
31、e、ALT、T4;有轻微影响或不太受影响的项目主要有:TP、ALB、ALP、 AST、TBIL、WBC、APTT、TT、Cr、Urea、UA、P、Mg 、Ca。() 、未分离血清过久:K+、LDH、FE、AST(可能)偏高,GLU、ALP(可能)偏低。() 、日晒:WBC、PLT、ESR 偏高,BlL 偏低。() 、禁止从静脉注射处、套管处取血,严重影响 GLU、电解质及凝血因子报告之准确性。() 、绑止血带时间及握拳会影响电解质、Lactic Acid、PC02、pH。() 、微血管穿刺样本可用于血细胞分析、电解质及一般生化检验, 但有可能挤入组织液造成不准确的结果。5、药物因素(1) 、抗
32、生泰药物青霉素类和磺胺类药物能增高血液中尿酸浓度,常误报作“痛风阳性” 。磺胺类抑制肠内细菌繁殖,使尿胆素不能还原为尿胆原,无法得出尿胆原的正确结果。(2) 、镇痛消炎药物阿斯匹林、氨基比林等会使尿中胆红素检测值升高;吗啡、杜冷丁和消炎痛、布洛芬等,可导致检验中淀粉酶和脂肪酶含量明显升高,在用药后 4 小时内影响最大,24 小时后消失。(3) 、抗癌药物绝大多数抗癌药物对人体造血系统有抑制和毒害作用,可导致血液中红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白数量的减少(少数药物可使血细胞异常升高),肝功能改变,有的使血脂值升高。其中甲氨蝶啶抑制骨髓,且损害肾功能;硫唑嘌呤损害肝功能,出现黄疸;阿糖胞苷使谷丙
33、、谷草转氨酶异常升高。(4) 、激素类药物雌激素类药物能影响人体中血脂的正常含量,使葡萄糖耐量试验减低,并可引起血小板和红细胞量的减少。盐皮质素易致水、钠潴留和低钾血症。肾上腺素减少钙、磷的吸收,且排出量增加,故血钙、血磷偏低,另外可明显升高血糖值。(5) 、利尿药物临床上常用的为双氢克尿噻、速尿、三氯噻嗪和利尿酸等。典型的临床反应为:低血钾、低血容量和低血氯,长期应用后可见高氮质血症和高尿酸血症。检验项目标准操作规程(SOP)- 9 -(6) 、抗糖尿病药胰岛素使用后可出现低血糖症,这已为大家所熟知。其它抗糖尿病药(如 D 60、氯磺丙脲等), 可损害肝功能,使谷丙、谷草转氨酶升高,出现黄疸
34、,血细胞减少等。(7)抗癫痫药如苯妥英钠因抑制叶酸的吸收,常见巨细胞性贫血。因轻度抑制骨髓,故使血细胞(尤其是白细胞和血小板)减少,偶有再生障碍性贫血的报道。卡马西平可致粒细胞、血小板减少,长期应用损害肝功能。(8) 、使检验标本着色的药物主要为药物使尿液染色,从而干扰比色测定和荧光分析的测定结果。如服利福平后尿呈橙红色;服维生素 B2、黄连素等使尿呈黄色;服苯琥珀后尿呈桔红色;服氨苯喋啶后使尿呈绿蓝色,并有蓝色荧光。许多药物对大便的色泽也产生影响。为了最大限度地避免和清除“药物干扰检测”这一现象,临床医师、检验医师和药师必须结合不同给药途径给药后的药物代谢动力学,判定检验结果时要综合考虑给药
35、途径、药物的血药浓度水平、药物的半衰期、排泄途径和清除率等。许多药物对检验结果的干扰,常与血药浓度呈正相关,故检验取样应尽量避开血药高峰期。当然,疾病条件许可时,应提早几天停药,以完全排除药物对检测影响,但这并不是每个病人都能做到的。 检验项目标准操作规程(SOP)- 10 -血常规及血常规及 URIT-3010 血球仪使用操作程序血球仪使用操作程序一、目的目的规范血细胞分析仪检测试验,确保结果准确性和重复性。二、原理二、原理由于血细胞的非传导性质,电解质溶液中悬浮的血细胞在通过检测小孔时会引起小孔的电阻变化,这种进行血细胞计数和体积测量的方法称为电阻抗法或库尔特原理。三、仪器的运行坏境三、仪
36、器的运行坏境1. 仪器应安装在平稳干燥的地方。2. 安装于不受高温、潮湿、灰尘、阳光直射等可能对仪器产生不良影响的地方。3. 仪器应避免受到强烈的震动或冲击。4. 不要安装化学药品的保管场所或产生气体的地方。5. 温度 18-30,最佳 23,空调冷却能力必须约为 172kal/小时,相对湿度 50%-85%,电压 200V10%.6. 避免强光照射及辐射源辐射。四、授权操作者四、授权操作者 经实验室上岗培训合格的各级检验人员五、工作前检查五、工作前检查1. 将质控品从冰箱中取出,放置 20 分钟,恢复至室温待用。2. 开启仪器执行自动清洗并进行空白测量。3. 检查试剂并将废液处理。六、试剂装
37、载程序六、试剂装载程序试剂不足时准备好相应的新试剂,确认其在使用期限内装载。七、操作程序七、操作程序1、开机前的准备(1) 、确认各电气、外接管路连接正确无误,各试剂瓶内试剂充分够用。(2) 、检查仪器外部液路导管是否有打折或脱落;废液桶内的废液是否已满。2、开机启动 开启主机后面板电源开关,仪器进入自检。3、空白测试 (1) 、放置清洁的试管于采样针下,在血细胞分析窗口,点击“排液” ,仪器排出稀释液到试管中。检验项目标准操作规程(SOP)- 11 - (2) 、在血细胞分析窗口,选择“资料” ,在弹出的“资料编辑”对话框中将样本编号改为“0” 。 (3) 、将盛有稀释液的试管放于采样针下,
38、应确保采样针轻触试管底部。 (4) 、按仪器前面板的计数键,待听到“滴”的一声后,方可移走试管。仪器开始计数测量。 (5) 、计数完成后,显示屏上显示出空白测试结果,空白测试结果可接受范围见:参数数值单位WBC0.2109LRBC0.021012LHGB1gLPLT10109L 注:序号 0 是仪器空白测试的专用序号,在给临床的血液样本编号时请勿输入此序号。4、血样的采集 (1) 、静脉血的采集:采用静脉穿刺采取静脉血,注入含有抗凝剂的干净采血管,轻摇 5 次。 (2) 、末梢血的采集:从指端穿刺采集,采用 20ul 定量采血管。5、血样计数、分析 1、预稀释方式:将空试管置于采样针下,点击“
39、排液” ,仪器排出稀释液到试管中,将 20ul 采血管内的血样迅速注入准备好的盛有稀释液的试管中,轻轻摇匀;将盛有血样的试管置于采样针下,按仪器面板前的计数键,指示灯变成橙色,听到蜂鸣器发出清脆的“滴”声后,移走试管。仪器开始自动分析样本。 2、全血方式:轻轻摇动试管使血样混匀后,将试管置于采样针下,按计数键,指示灯变成橙色,等到“滴”声后,移走试管。仪器开始自动分析样本。6、打印 样本分析完成后,按打印键打印,或设为自动打印。7、关机 (1) 、选择“关机”菜单,按“确认”键,屏幕弹出关机窗口; (2) 、移动光标到“确认” ,按“确认”键关闭系统; (3) 、仪器开始对液路进行清洗、保养。
40、 (4) 、关机程序运行完毕后,仪器屏幕会显示“谢谢使用,现在请关闭电源”的提示,此时关闭仪器后面板的电源开关; (5) 、清理工作台并处理废液。8、仪器维护保养 (1) 、日维护:擦拭分析仪台面、检查试剂、检查废液桶、检查管路 (2) 、月维护:清洗废液桶、润滑电机轴、润滑采样导向杆 (3) 、不定期维护:灼烧、排堵、清洗、清洁采样针八、仪器校准频率八、仪器校准频率 1.投入使用前,必须校准,合格后方可使用。 2.更换仪器的部件,移动位置。 3.若检测结果有漂移时需对仪器进行校准。 4.每半年至少进行一次仪器校准。九、标本处理九、标本处理 1.全血标本检测后,室温保存 1 天。 2.稀释模式
41、标本检测后不用保存。 3.超过保存期的血标本,装入黄色塑料袋,有专人统一回收处理。 4.有约定的按约定执行。检验项目标准操作规程(SOP)- 12 -十、故障处理指引十、故障处理指引 在一般情况下,故障的排除应遵循如下三个步骤进行:1、 故障确认2、 故障分类3、 故障排除十一、参数分析十一、参数分析1.白细胞指数检测在 35450fl 范围内将血细胞分为三群。正常白细胞直方图的左侧峰又高又陡,跨越3593fl,定为淋巴细胞峰(小细胞群) ,以成熟小淋巴细胞为主。最右侧峰又低又宽,跨越160450fl,定为中性粒细胞峰(大细胞群)以中性粒细胞为主,包括杆状核细胞和晚幼粒细胞,左右两峰之间较平坦
42、区,定为单个核细胞区(中间细胞群)主意以单核细胞为主,也含有嗜酸、嗜碱性粒细胞及白血病细胞等。(1)白细胞计数的可接受性能为15%。(2)样本必须在 6 小时内测定完毕。(3)对特别异常的结果须用手工计数复检,手工计数应用高精度的微量吸管,加液器计数盘等。(4)常见问题报警处理:细胞计数问题,应采用手工计数法;三分群鉴别线报警,应确认血涂片标本。(5)直方图上白细胞计数值的异常信息。当出现 RBC 溶血不全时,在白细胞直方图上,WBC 低鉴别线与直方图曲线的交点位置异常高,可通过血样稀释、或用稀释液对血样中的血浆进行置换(清洗细胞)或用较强烈的溶血剂的仪器进行测定;当出现白细胞凝聚时,直方图上
43、可见三峰分布混乱,在超出 250fl 的区域也有颗粒存在可以引起白细胞计数假性减低。可将血样加温,用生理盐水等清洗,消除白细胞凝聚;当出现有核红细胞的影响时,红细胞与小细胞之间的低谷位置上升,并有报警,有核红细胞几乎全部被当做白细胞计数。可以引起白细胞计数假性增高,因此须按下式进行校正:校正白细胞计数值=仪器白细胞检测值100/(100+有核红细胞数) ,有核红细胞数;100 个白细胞中的有核红细胞数;当出现血小板聚集时,可使白细胞假性增高,应重新采血测定。(6)冷凝集现象、检出纤维蛋白均可使白细胞计数值产生正误差;小淋巴细胞可使白细胞计数产生负误差;不恰当的溶血剂作用可使白细胞计数值产生正的
44、或负的误差。(7)开展室内质控和参加室间质评。2.红细胞指数检测红细胞直方图:仪器在体积为 36360fl 范围内分析红细胞,横坐标表示红细胞体积,纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。正常红细胞主要分布在 50200fl 范围内,直方图上,可见两个细胞群从 30125fl 区域有一个几乎两侧对称、较狭窄的正态分布曲线,主峰右侧约分布在 125200fl 区域的细胞,为大红细胞和网织红细胞。红细胞的 体积发生变化,直方图峰可左移或右移,或出现双峰。(1) 红细胞计数的可接受性能为6%。(2) 对特别异常的结果须用手工计数复检,手工计数应用高精度的微量吸管,加液器计数盘等。(3) 红细胞在一天内有
45、波动,上午 7 时为高峰,随后下降。(4) 采血部位不同结果有影响,静脉血比末梢血的结果低 1015%。(5) 开展室内质控和参加室间质评。(6) 异常信息与处理方法:出现破碎的红细胞,大血小板增多,血小板聚集。处理检验项目标准操作规程(SOP)- 13 -方法:手工计数,确认血涂片;受冷球蛋白、破碎红细胞,白血病细胞的血比质碎片等干扰。处理方法:将标本加温后后再捡,手工法、确认血涂片标本;受冷凝集素的干扰,有白细胞混入。处理方法:将标本加温后后再捡,确认血涂片标本;红细胞有很明显的大小不均。处理方法:确认血涂片标本;贫血治疗时及受输血的影响,出现多群红细。处理方法:确认血涂片标本。 (7)直
46、方图显示红细胞计数值的异常信息。当出现有核红细胞时,红细胞直方图 RDW 增大,须作血涂片检查确认;当 RDW 增大提示有多种大小的红细胞出现。须与 RBC 直方图做相关分析,RBC 直方图显示分布较宽;当 RBC 直方图显示以小细胞性红细胞为主,同时有大小不一的红细胞,须作涂片检查(检查畸形红细胞)当 RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW 显示异常值时,同时直方图上也能观察到一低峰,此时应考虑为冷凝集样本,可先涂片确认是否冷凝集样本,如果是将样本加温,凝块消失后重新测定。(8) 分裂细胞、凝集现象可使红细胞计数值产生误差;巨血小板可使红细胞计数产生正误差;仪器运行异常可使红细胞计
47、数产生正误差和负误差。十二、危急值(警告值)十二、危急值(警告值)HGB250g/LRBC2.51012 /LWBC:成人:50109/LPLT600109/L十三、医学决定水平十三、医学决定水平HGB轻度:正常下限91g/L中度:9060 g/L重度:6031 g/L极重度:30 g/LRBC1.高于 6.81012L,应采取治疗措施。2.低于 3.51012L,为诊断贫血界限,应寻找病因。3.低于 1.51012L,应考虑输血。WBC1.0.5109/L,检验对象有高度易感性,采取相应的预防性治疗及预防感染措施。2.3.0109/L,为白细胞减少症,应在做其他实验,如白细胞分类计数、外周血
48、涂片等并询问用药史。3.11109/L,为白细胞增多此时做白细胞分类计数有助于分析病因和分型,如果需要应查找感染源。4.5g/L 或尿液中含有大剂量先锋霉素等药物时,可使结果偏低或出现假性结果。(4)试条中的试剂主要和白蛋白发生反应对球蛋白的反应灵敏度不高,应注意。(5)肉眼可见的血尿也可能出现假阳性反应由于尿液分析仪白细胞检测与显微镜下计数实验原理截然不同,其报告方式也是两种不同的概念,很难找出两者的对应关系,迄今还没有一种直接的换算方式,因此仪器法白细胞检查只是一个筛选试验,绝不可代替显微镜检查。11.抗坏血酸检测原理:采用还原法。抗坏血酸具有 1,2-烯二醇还原性基团,在碱性条件中,将氧
49、化态蓝色的 2,6 二氯酚靛酚染料还原为无色的 2,6 二氯二对酚胺。干扰因素:当尿中含有氧化剂时(如高锰酸钾,次氯酸盐等)会影响本实验的灵敏度。 四、四、 标本要求标本要求1.标本来源:清晨第一次尿液或随机尿液,留取中段尿。2.不可接受逇标本:超过 2 小时,没有按规定使用洁净、干燥的容器以及低于 10ml 的尿液。3.标本的保存:应在 2 小时内对尿液进行检验。五、五、 设备和试剂设备和试剂1.设备:URIT-500B 尿机2.试剂。与尿液配套的尿 11G.3.质控品。阴性和阳性,2 个水平。六、六、 检测步骤检测步骤1、仪器的使用 1) 、一般使用:开启仪器电源开关,仪器进入自检状态,开
50、始初始化,显示屏显示主界面。如设置正确,仪器可开始测试。如果测试出现故障结果,在主界面会显示“故障表”键,按此键,可列出最近出现故障结果表明的序号,便于重新检测这些序号的样本。 2) 、仪器设置选择:1)按“设置”键,进入设置菜单,可以对“时间” 、 “初始化” 、 “系统” 、 “打印”、 “串口” 、 “升级”进行设置。2)按“查阅”键,进入查阅菜单,可以查询测试的历史记录。3)按“序号”键,输入标本序号。4)按“试纸”键,用循环键可进行 14G、13G、11G、10G 试纸的选择。5)按“进纸”键,打印纸向前进一行。6)按“关于”键,显示有关生产商的信息。7)按“返回”键,返回上一级菜单
51、。2、仪器的校验使用人员要经常用随机附带的 11G 标准试纸条对仪器进行校验检查,标准试纸条共两条,日常使用一条,另一条作为保存备用。确保仪器处于主界面且使用尿试纸项为11G,用标准试纸条进行检测后,将检测的打印结果与标准盒上的标准值相比较,如果相符则说明仪器正常,表示可以使用;如果不符,可用另外一条标准试纸条再重复检测一次;如仍不符,需查找故障原因并排除故障后再使用。3、常规尿液测试1) 、将待测的尿试纸条完全浸入示经离心的待测尿液中,在尿液容器壁缓慢抽出,用检验项目标准操作规程(SOP)- 19 -吸水纸除去多余尿液,但不可吸得太干。2) 、把尿试纸条旋转在固定平台上,位于拨动杆的右边附近
52、,试纸面向上。3) 、放置的尿试纸条被检测到后,拨动杆开始启动,将尿试纸条送到移动台板上,再由移动台板将尿试纸条关到扫描检测区,检测头检测后由移动台板推到废料盒。4) 、尿试纸条被测试结束后,显示屏显示测试结果,同时打印机打印出测试结果。5) 、如果测试过程中发生问题,可按暂停键暂停当前检测。当故障排除后,按开始键重新开始检测。注:检测尿液标本必须,仪器测试和镜检同时进行,不能省略镜检步骤。七、七、 结果报告结果报告将仪器打印的原始小票贴于相应的申请单上检查无误后,并将镜检结果写在申请单上,发出报告。有疑难问题必须向科主任汇报。八、八、 注意事项注意事项1.不的使用过期或变质的试剂条;试剂的变
53、质会影响反应区的颜色变浅或变深。2.试剂条必须在原瓶中保存取出试纸后立即盖严瓶盖。不的移去包装内的干燥剂,每条试纸只能使用一次。3.为保护试剂的反应活性必须隔绝周围环境中的潮气、光和热。4.不要触摸试剂条的反应区,避免阳光直射。5.对检验结果有疑问,与预期结果不一致时,请查找原因;仪器状态,试纸条的有效期、质控品的状态人员操作等 ,纠正后,室内质控合格方可检测临床标本。6.用过的试剂条按实验室生物危害性材料处理方法进行处理。九、九、 质量控制质量控制1.分析前的质量控制(1)正确留取标本,并在规定的时间内送检,避免阳光直射。(2)避免标本污染(含有强氧化剂如漂白粉)出现假阳性和假阴性(如含有维
54、生素C);标本久置葡萄糖被细菌分解或细胞酶分解,引起假阴性。(3)了解检验对象可能影响化学检测的进食及使用药物的情况。(4)尿样的保存:尿样收集后应在 2 小时内完成检测,否则选用适当的防腐剂并冷藏保存。注意准确有效的标记尿标本。2.分析中的质量控制(1)用尿液质控品监控仪器的工作状态;(2)严格、规范正确的实验操作;(3)应使用与尿液分析仪配套的专用试带,注意试带的效期,注意防潮避免变色后干扰试验。3.分析后的质量控制(1)分析结果的相关性,如有不符应及时复检,如下表所示化学分析结果镜检结果可能原因潜血阴性多量 RBC药物或其他干扰物质潜血阳性不见或少量 RBCRBC 破碎WBC 阴性多量
55、WBC药物干扰或慢性炎症WBC 阳性不见或少量 WBC其他物质干扰出现假阳性蛋白质阴性WBC/RBC/管型增多其他物质干扰出现假阴性化学分析亚硝酸盐为阳性,而尿蛋白和白细胞检测均为阴性,可能因摄食含有硝酸盐丰富检验项目标准操作规程(SOP)- 20 -的食物有关而造成的假阳性。 糖尿病检验对象尿糖检测阴性,而维生素 c 含量很高,会出现假阴性。(2)检测结果又异议时应了解检验对象可能影响尿化学检测的 进食和用药情况。(3)综合考虑检验对象的病史;特别是肾脏疾病检验对象,尿蛋白定性应当用磺基水杨酸法。如尿化学分析结果与镜检不一致,应进一步查明原因。(4)参考范围的认可:尿干化学分析仪检测白细胞、
56、红细胞出现“假阴性”时,应以镜检结果为准;但当“假阳性”时,仪器的 结果可能正确。这种情况见于白细胞:当尿在膀胱贮存时间长,白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿中,导致仪器分析(+) ,镜检反而(-) ;红细胞:肾病检验对象尿中红细胞常被破坏而析出血红蛋白或尿中有高活性不耐热的触酶时均可导致仪器分析(+) ,镜检却为() 。尿液煮沸冷却后在测试可排除不耐热的触酶造成的假阳性。其他情况要结合临床实践,不能一概否定或肯定仪器结果,更不能随便改变仪器的 灵敏度。十、十、 生物参考区间及临床意义生物参考区间及临床意义1. 1、尿糖(UGlu)正常参考值:阴性临床意义:a、生理性糖尿为一过性糖尿,是暂时性
57、的,排除生理因素后恢复正常。主要有三种:饮食性糖尿,即在短时间内服用大量糖类,引起血糖浓度过大;应急性糖尿,在脑外伤、脑血管意外、情绪激动、剧烈运动周期性四肢麻痹等情况下,延脑糖中枢受刺激,使肾上腺激素或胰岛素分泌异常,可出现暂时性的糖尿;妊娠中后期多可见糖尿。b、病理性糖尿也可分为三种:真性糖尿,既胰岛素的分泌量相对或绝对不足,使血糖浓度超过肾糖阈尿糖检查不仅可以诊断糖尿病,还可以指导临床医生决定胰岛素的用量、判断疗效;肾性糖尿,即肾小管对葡萄糖的重吸收功能减退,新生儿的近曲小管功能未完善也能出现糖尿;其他糖尿,如生长激素过多(肢端肥大症)、甲状腺激素过多(甲亢)、肾上腺激素过多(嗜铬细胞瘤
58、)、皮质醇(Cushing 综合症)、胰高血糖素等都可使血糖浓度高过肾糖阈而出现糖尿;另外,肥胖病、高血压也可能出现糖尿。2、尿酮体(U-Ket)正常参考值:阴性临床意义:阳性a、糖尿病酮症酸中毒。糖利用减少,脂肪分解产生过量酮体,尿酮体的检查对未控制或治疗不当的糖尿病出现酸中毒或昏迷的诊断很有价值,可以与低血糖、心脑疾病酸中毒或高血糖渗透性糖尿病昏迷相区别。b、感染性疾病(如肺炎、伤寒、败血症、结核等发热期),严重呕吐、腹泻,长期饥饿、禁食,全身麻醉后等都可能出现酮尿。另外妇女孕期因妊娠反应呕吐多、进食少,体脂肪代谢明显增多,也能出现酮尿。c、氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等情况也能出现酮尿。d、
59、服用双胍类降糖药如降糖灵后,由于药物抑制细胞呼吸,也可能出现酮尿。检验项目标准操作规程(SOP)- 21 -注意事项:a、由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都是挥发性物质;乙酰乙酸受热易分解成丙酮;尿液被细菌污染后,酮体消失,因此,尿样必须新鲜,检测应该及时,以免测试结果偏低或出现假阴性。b、干化学法测定酮体时对乙酰乙酸的敏感度约是丙酮的 710 倍,因此,与其他的检测方法存在一定的差别3、尿胆原(URO 或 UBG)正常参考值:弱阳性。临床意义:阳性,见于溶血性黄疽、肝病等。阴性,见于梗阻性黄疽。4、尿比重(SG)正常参考值:1-5 岁1.010-1.014;5-8 岁,1.010-1.019;8
60、-14 岁,1.010-1.025;14 岁以上至成人,1.002-1.030临床意义:增高见于急性肾炎、糖尿病、高热、呕吐、腹泻及心力衰竭等。降低,见于慢性肾炎、慢性肾盂肾炎、急慢性肾功衰竭及尿崩症等。5、尿蛋白(R-PRO)正常参考值:阴性。临床意义:阳性见于各种急慢性肾小球肾炎、急性肾盂肾炎、多发性骨髓瘤、肾移植术后等。此外,药物,汞、铺等中毒引起肾小管上皮细胞损伤也可见阳性。6、红细胞(UBLO)正常参考值:显微镜法阴性或2 个HP。仪器法阴性。临床意义:阳性或增多见于泌尿系统结石、感染、肿瘤、急慢性肾炎、血小板减少性紫癌、血友病等。7、尿白细胞(ULEU)正常参考值:5 个HP。临床
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