原子吸收分光光度法标准操作规程

1、标准操作文件 审批 首次分发部门及数量 1 目的：建立原子吸收分光光度法的标准操作规程，保证操作的正确性。2 范围：本标准适用于进行原子吸收测定的供试品。3 责任：QC 负责对本规程进行实施，QC 主管负责对本规程的实施进行监督。 4 制定依据：中华人民共和国药典2010年版二部附录 D中国药品检验标准操作规范2010年版5 内容5.1 简述供试品在高温下经原子化产生原子蒸气时，如有一光辐射作用于原子，当辐射频率相应于原子中电子从基态跃迁到较高能态所需要的能量时，即引起原子对特定波长的吸收。吸收通常发生在真空紫外、紫外及可见光区。原子吸收光谱为线光谱，通过测定该特征波长光谱线的吸光度可以计算出

2、该待测元素的含量。原子吸收一般遵守吸收分光光度法的比尔定律。实验条件固定时特定波长处的吸光度值与样品中原子浓度成正比。但实验参数的变化会影响结果值。原子吸收分光光度法测量对象是成原子状态的金属元素和部分非金属元素。测定的样品一般经高温破坏成原子态，在气态下利用自由原子的光谱性质进行测量，常用在药物中无机元素的测定。原子吸收分光光度计主要由光源、原子化器、单色器、检测器、记录显示系统和数据 处理系统等部分组成。（1） 光源由于原子光谱为线光谱，原子吸收分光光度计的光源应能在窄的光谱范围内有高强度的辐射，否则检测器得不到准确测量信号。因此，需要应用能满足上述要求的线光源。原子吸收分光光度计常用的光

3、源为空心阴极灯。灯的阴极由待分析元素的物质构成，工作时使该元素激发并发射特征光谱。被测元素只能用该元素的空心阴极灯进行分析。（2） 原子化器：常用的原子化器有火焰型、电热型、氢化物发生型和冷蒸气型四种。A 火焰型原子化器：样品溶液导入雾化器中使试样溶液雾化成气溶腔，并与燃气和助燃气充分混合后在燃烧器上成火焰燃烧，不同物质需要不同能量使其离子态转变成基态 的原子。入射光通过基态原子时部分能量被吸收，并由传感器转变为电信号，用记录 仪进行记录。改变燃气和助燃气种类及比例可以控制火焰温度，以提供使供试品转变成原子状态所需的能量。最常用的混合气体为空气-乙炔。B 电热型原子化器：又称无火焰原子化器，其

4、中又以石墨炉应用最广。石墨炉原子化器为用电流控制温度的炉子，其中放入可置放样品的石墨管或其它合适的样品置放装置。 在测定过程中炉内通入氩或其它保护气体，以防上炉的氧化。以一定体积的样品溶液 加入石墨管后用电加热使其原子化。电加热的过程至少有三个阶段：干燥阶段用略高 于溶剂沸点的温度，以较长的时间使溶剂蒸发至干。灰化阶段是去掉比分析元素容易 挥发的样品基体以减少背景吸收，根据具体情况选择合适的灰化温度及时间。最后阶 段为原子化阶段。温度应升至能使样品转变成气态原子，该阶段的升温速度必须很快， 加热时间应尽可能短，以延长石墨炉的寿命。原子蒸气迅速从入射光束通道中扩散出 去，形成一个瞬态吸收信号，用

5、记录仪记录。C 氢化物发生原子化器：利用某些元素易形成低沸点氢化物的性质而设计的氢化物发生原子化器可以减少或避免因高温导致的背景干扰与化学干扰。As 、Sb 、Bi 、Ge 、Sn 、 Pb 、Se 等元素在存在还原剂（除另有规定外，通常采用硼氢化钠）的酸性介质中易 生成低沸点的易受热分解的氢化物，再依次由载气导入由石英管与加热器组成的原子 吸收池中，在石英管中氢化物因受热而分解，并形成基态原子。D 冷蒸气原子化器：测汞时，在汞蒸气发生器中，汞离子被还原成汞，然后将汞蒸气直接导入原子吸收池中。(3 单色器：通常用衍射光栅为色散元件。仪器光路应能保证有良好的光谱分辨率和在相当窄的光谱带（0.2n

6、m ）下正常工作的能力。单色器的结构与一般紫外可见分光 光度计相同。(4 检测器：一般采用对紫外及可见光敏感的宽光谱工作范围的光电倍增管作为检测元件。要求检测器的输出信号灵敏度高、噪声低、漂移小及稳定性好。(5 记录仪和数据处理系统：原子吸收分光光度计常用绘图打印机记录测定结果。数据处理系统需能测量信号积分值和制备标准曲线以及统计计算处理。有的仪器将参数设定 和操作系统和数据处理系统放在一起工作。 多种多样，并往往随样品情况的变化而变化。一般认为，背景来源于样品中共存组分及其在原子化过程中形成的次生分子或原子的热发射，光吸收和光散射。其中有些干扰可以通过适当的样品前处理或优化原子化过程的条件得

7、以消除或减少，但许多干扰仍难以避免。必须另辟蹊径，通过改进仪器设计予以克服。背景校正的基本原理是将分析谱线两侧的读数作为背景读数，然后从分析线的峰值读数中扣除之。最常用的背景校正方法有三种：一是连续光源校正法，采用二个光源，主光源为线光源（即空心阴极灯），另一光源为连续光源，在紫外区通常用氘灯。来自线光源的样品光束通过样品时，其吸光度读数为待测元素与背景吸收之和，来自连续光源的参比光束通过样品时测定背景读数，二者之差即为校正的待测元素的吸光度；二是塞曼效应校正法，多电子原子的发射谱线通过强磁场时，由于空间量子化的缘故使谱线发生分裂，分裂后的中心线称成分，两侧谱线称±成分。成分作为样品

8、光束测定样品和背景的总吸光度。±成分作为参比光束测定背景吸收，二者之差即为样品吸收；三是强脉冲自吸校正法，在空心阴极灯的工作周期内依次施加二个不同强度的脉冲，在弱脉冲作用下发射正常的谱线，在强脉冲作用下多谱勒效应和阴极溅射增强，从而使谱线变宽而且引起明显的自吸收，造成辐射能在中心波长处缺失而分布于中心波长的两侧。将弱脉冲作用下的发射谱线作为样品光束，强脉冲作用下的自吸谱线作为参此光束，依次测定吸光度，此实施校正。连续光源校正由于使用双光源，样品光束和参比光束的准直较为困难，导致在高背景时校正不足或补偿过度；另外，当共存元素的吸收线邻近分析线时，也往往造成补偿过度。塞曼背景校正没有上述

9、缺点，但当样品浓度较高时，工作曲线向浓度轴弯曲。强脉冲自吸校正效果较好，但仍存在高浓度时工作曲线弯曲及灯寿命缩短等缺点。5.2 原子吸收分光光度计的检定 为/次测定中最大值与最小值之差。分辨率检定方法 将锰灯点亮，稳定后在光谱带宽为0.2nm 时调节光电倍增管的高压， 使279.5nm 谱线能量读数为100。扫描测量锰双线，应能分辨出279.5nm 和279.8nm 两条谱线，且两线间峰谷能量应不超过40%。表的指标。火焰原子化法静态基线和点火基线的稳定度 （1） 基线稳定性检定法A 静态基线稳定性的测定：光谱带宽0.2nm 、量程扩展10倍、点亮铜灯，原子化器未工作状态下测定。单光束仪器与铜

10、灯同时预热30min ，用“瞬时”测量方法，或时间 常数不大于0.5s ，测定324.7nm 谱线的稳定性。双光束仪器预热30min 、铜灯预热 3min 后，按上述相同条件测定。B 点火基线稳定性的测定：按测铜的最佳条件，用乙炔/空气火焰，吸喷去离子水10min后，在吸喷状况下重复（1）A 的测量。852.1nm 谱线进行测量，谱线的峰值应能调到100%，背景值/峰值应不大于2%。5min 内谱线的最大瞬时噪声（峰-峰值）应不大于0.03A 。谱线能量为100%时，光电倍增管的高压应不超过最大高压值的85%。0.02g/ml和1.5%。(1 检出限的检定：仪器参数调至最佳工作状态，用空白溶液

11、0.5mol/LHNO3调零，分别对3种铜标准溶液（0.05、1.00、3.00g/ml）各进行3次重复测定，取3次测定平 均值，按线性回归法求出工作曲线的斜率，即为仪器测定铜的灵敏度（S ）。高温季节混凝土施工温控措施1、工程概况*2、气象条件*县地处北亚热带北缘，受季风进退影响，四季分明。一年中春秋两季较短，冬夏历时较长。春季温度回升快，前期少雨干旱，后期间有低温阴雨；夏季受西太平洋副热带高压控制，气温高而降雨多；秋季昼暖夜凉，温差较大，并时有连绵阴雨；冬季受强大的西伯利亚和蒙古冷高压控制，干燥寒冷，雨雪稀少。该区域属北亚热带湿润地区，雨量较充沛，多年平均降雨量大于700mm。据*气象站实

12、测气象资料统计，*段总干渠沿线多年平均气温14.9，多年年平均地温（距地面0cm）17.7，多年平均风速2.8m/s。极端最高气温42.6，极端最低气温-14.7.*气象站主要气象特征值见表1-1。表1-1 *气象站主要气象特征值表项 目1月2月3月4月5月6月7月8月9月10月11月12月年多年平均降水量（mm）9.512.928.657.468.580.3171.2105.881.853.226.28.1703.4最大日降水量（mm）19.422.133.547.0 56.8 120.1 221.2 145.2 61.0 67.0 24.915.3221.2多年平均气温（）1.33.38.

13、715.120.925.827.126.521.416.0 9.3 3.0 14.8极端最高气温（）20.123.128.133.53842.640.84036.333.527.621.942.6极端最低气温（）-14.7-12.4-7.1-0.74.310.616.513.97.4-1.8-6.7-12.6-14.7多年平均地温（地表,）2.34.911.018.625.330.531.531.424.618.110.33.817.7多年平均风速（m/s）2.73.13.23.0 2.72.92.72.72.62.52.52.52.8最大风速（m/s） 14.317.0 18.0 20.3

14、13.7 13.0 14.0 16.0 15.0 18.0 15.0 15.720.3多年平均相对湿度（%）62636670686479777472706469多年平均日照时数（h）123.6114.6139.6167193.1198.8182.9205.6147158142.1141.51913.7多年平均霜日数（d）11.87.43.60.2000000.35.514.343.1多年平均雾日数（d） 2.0 1.3 1.0 1.3 1.0 0.51.20.51.11.21.71.914.73、混凝土温度控制为加快施工进度，我部工程部分混凝土施工需要6月8月份施工。在该时段外界气温较高，水的

15、蒸发量大，对于新浇筑混凝土可能出现干燥快、凝结快或出现裂缝等现象，为了保证薄壁砼及体积较大混凝土浇筑质量，我部采取降低混凝土出机口温度、减少运输浇筑过程中温度回升、加强混凝土养护等措施对混凝土浇筑质量进行控制。在混凝土从生产到浇筑的全过程中，通过以下环节控制混凝土浇筑温度。3.1混凝土出拌和机前的温度控制对组成混凝土拌和物的各种材料采取不同的方法进行降温，以降低混凝土的出机口温度。将砼出机口温度控制在27左右.（1）在骨料堆放场上部搭设防晒遮阳棚，避免骨料受太阳光暴晒；（2）如果气温过高，以上措施不能满足要求时，采取对骨料进行喷水冷却的方式对骨料进行降温。（1）水泥出厂后，自身温度会伴随储备期

16、的延长而降低，因此要根据施工进度安排提前进场水泥，尽可能延长水泥储存时间。（2）合理选择水泥标号，在配合比设计时，采用发热量较低的普通硅酸盐水泥，控制水泥用量，以有效降低混凝土的水化热。本工程中拌和机距离水井较近，故采用温度较底的地下水直接进行混凝土拌和。如果气温过高，采取加冰措施。3.2混凝土运输过程中的温度控制（1）运输中采取防晒隔热设施在混凝土运输过程中，对混凝土罐车遮盖或洒水降温，防止混凝土在运输途中温度回升。（2）确保运输路况为减少混凝土在运输过程中的温度回升，随时维护施工路线，保证运输路线畅通，无堵塞，无坑坑洼洼，缩短混凝土运输时间。3.3混凝土浇筑过程中的温度控制（1）降低仓面温

17、度混凝土浇筑前，用地下水浸润仓面，降低仓面初始温度，同时仓面上部搭设遮阳棚，降低浇筑过程中的仓面温度。 （2）避开高温时段浇筑混凝土尽量避免在高温时段浇筑，在安排仓位时，随时了解和跟踪天气预报，掌握天气变化的趋势走向，一有阴天或低温时间，就抓住时机，抢浇快浇。平时混凝土浇筑尽量安排在下午16时至次日上午10时进行，白天高温时段只作浇筑前的准备工作。（3）科学配备资源、加快入仓速度合理调配混凝土搅拌运输车，缩短混凝土运输时间，利用胎带机等入仓设备，加快混凝土入仓覆盖速度。混凝土入仓后，快速平仓，快速振捣。混凝土浇筑完毕后，及早覆盖养护。4、加强混凝土养护高温季节浇筑的混凝土，必须加强混凝土的养护

18、，尤其是薄壁砼施工。(1砼初凝后，对于水平面，立即在其表面覆盖工业毛毡进行保湿养护。(2混凝土浇筑完毕610h内开始养护，对洒水养护部位，在养护期间采取连续不间断养护，始终使混凝土表面处于充分的湿润状态。养护期不少于14天，对大体积部位根据外界温度情况适当延长。(3混凝土养护期间，每隔2 h检查一次养护情况，气温高时加密巡查，检查内容为：水养护表面的湿润状态、混凝土表面发白面积等内容。5、温度观测混凝土浇筑过程中，实际温差小于容许温差，就可避免产生温度裂缝，故必须加强施工中的温度观测。温度观测设专人进行，在混凝土浇筑过程中，每4h测量一次混凝土原材料的温度、机口温度、入仓温度以及气温，并作好记

19、录。温度的测量，每100m2仓面面积不少于一个测点，每一浇筑层不少于3个测点，测点均匀分布在浇筑层面上。 （量筒1）内。另一量筒（量筒2）内注入10ml 水，在上述条件下将毛细管插入水中，至10ml 水全部吸喷完毕，废液管中无废液排出后，测量排出废液体积V （ml ），并计算表观雾化率（）。=(10-V/10×100%（1） 火焰原子化器的仪器在镉228.8nm 时先用无背景校正方式测量，调零后将吸收度约为1A 的屏网插入光路读得吸收度A1，再在背景校正方式调零，插入屏网读取吸收度A2， A1/A2值应符合2.8的规定。（2） 石墨炉原子化器的仪器参数调至测镉的最佳状态，先用无背景校

20、正方式，用移液管加5.3 样品测定操作方法金属按规定方法配制，亦可从有关单位中购得，用通常用作空白的溶液稀释成标准工作液。再按测定方法的操作步骤配制一组合适的系列标准溶液。在仪器推荐的浓度范围内，制备含待测元素的标准溶液至少3份，浓度依次递增，并分别加入供试品溶液配制中的相应试剂。除另有规定外，一般用去离子水制成水溶液。将仪器按规定启动后，先将去离子水喷入火焰，调读数为零，再将最浓的标准溶液喷入火焰，调节仪器至近满量程的读数，然后依次喷入每一标准溶液，读数。每喷完1份溶液后，均用去离子水喷入火焰充分冲洗灯头并调零。取每一浓度3次读数的平均值，与相应浓度作标准曲线。按各品种项下的规定制备供试品溶

21、液，使待测元素的估计浓度在标准曲线浓度范围内，将供试品溶液喷入火焰，取3次读数的平均值，从标准曲线上查得相应的浓度，计算元素的含量。供试品溶液测定完后，应用与供试品溶液浓度接近的标准溶液进行回校。标准曲线应取符合线性范围的浓度。样品的测定读数宜在线性范围中间或稍高处。 石墨炉原子化器的标准曲线可以用相同体积不同浓度的系列标准溶液或用相同浓度不同体积的 标准液制备，一般以前者为佳。积的量瓶中，除（1）号瓶外，其他（2）、（3）、（4）号量瓶分别再准确加入比例量的待测元素标准液，均用去离子水稀释至刻度，形成标准液加入量从零开始递增的一系列溶液。按上述标准曲线法自“将仪器按规定启动后”操作，并依法将

22、溶液喷入火焰，读数；将读数与相应的待测元素加入量作图，延长此直线至与含量轴的延长线相交，此交点与原点间的距离即相当于供试品溶液取用量中待测元素的含量（如图）。再以此计算供试品中待测元素的含量。0.3供试品溶液取用量 0.2 (3 (4中 待测元素的含量(2 (1待测元素加入量标准加入法仅适用于上述标准曲线法的工作曲线呈线性并通过原点的情况。加入限量的待测元素溶液，制备成对照溶液。照上述标准曲线法自“将仪器按规定启动后”操作，并将对照溶液喷入火焰，调节仪器使具合适的读数（a ）；在相同的操作条件下喷入供试品溶液，读数（b ）；b 值应小于（a-b ）。标谱线的吸收度比值，并以此对被测元素的含量或

23、浓度绘制工作曲线。内标元素要求与被测元素在基体或原子化器中表现的物理、化学性质相同或相似。且试样中不应含有这种元素。该方法只适用于双通道原子吸收分光光度计。5.4 测量操作注意事项精度决定。标准样品的组成应尽可能与被测样品接近。 焰条件的选择如火焰类型，燃气和助燃气的比例，供气压力和气体流量等。石墨炉原子化器应注意干燥-灰化-原子化各阶段的温度、时间、升温情况等程序的合理编制。它们对测定的灵敏度、检出限及分析精度等都有很大的影响。许多仪器一般能提示或自动调节成常用的参数，使用时可按实验情况予以修改。有充足、压力恒定的水源，仪器燃烧器上方应有符合厂方要求的排气罩，应能提供足够而恒定的排气量，排气

24、速度应能调节，排气罩以耐腐蚀、不生锈的金属板制造为宜。 使用原子吸收分光光度计时对实验室安全应给予特别注意，如排气通风是否良好，突然停电、停水及气流不足或不稳定时的安全措施，高压燃气和助燃气使用安全问题等。目前仪器本身大多具有自动安全功能，发现故障后一般自动停止工作。但实验室环境的安全仍需使用者随时注意。（1） 水：应用去离子水或用石英蒸馏器蒸馏的超纯水。钠、钾、镁、硅、铁等元素最易污染实验室水。贮藏水的容器一般用聚乙烯塑料等材料制成。玻璃瓶久贮会将瓶中微量污染元素溶解在水中。（2） 试剂:制备样品用的酸类、溶剂及有机萃取剂等亦为主要玷污来源之一，应采用高纯试剂。（3） 实验室容量器皿烧杯、容量瓶、移液管等尽可能使用耐腐蚀塑料器皿，而不用玻璃器皿。因为玻璃器皿易吸附或吸收其他金属离子，在使用过程中缓缓释出。自动进样器 应尽量不用能直接接触样品的金属附件及金属针头。样品前处理用的通风橱可能有积 尘、锈蚀物或粉尘、气流等影响。大气中尘埃的污染特别对石墨炉的高灵敏度检测有 很大的影响。样品处理过程及处理完后分析时应尽可能防止外界尘埃落入，产生干扰。浓度低于10g/ml的工作溶液应注意稀释溶剂及试剂对其污染的影响, 浓度低于1g/ml的标准溶液应在使用当天配制使用，不宜贮存。物常用酸进行溶解，复杂基体的样品常需用熔融，有机萃取，加入改进剂等方法消除基体干