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1、 生物化学习题解析生物化学习题解析 徐朗莱徐朗莱一一 名词解释名词解释1 、 蛋白质变性(蛋白质变性(denaturation) -是否回答是否回答“蛋白质结构及性质发生了蛋白质结构及性质发生了改变改变”就行了?就行了?2、 Tm (熔点,熔解温度熔点,熔解温度) -是否回答是否回答“DNA的的50%发生变性发生变性的温的温度度”就行了?就行了? 蛋白质受到某些理化因素的影响蛋白质受到某些理化因素的影响,其,其一一级结构不变级结构不变,但其空间结构发生改变,随之,但其空间结构发生改变,随之蛋白质的蛋白质的理化性质理化性质和和生物学功能生物学功能发生改变或发生改变或丧失的现象叫丧失的现象叫变性作

2、用变性作用。 1、蛋白质变性(denaturation) DNA DNA 热变性中热变性中其其双双螺旋链螺旋链50%被解开被解开及及紫外(紫外(260nm260nm处)光处)光吸收值达到最大值吸收值达到最大值(完全变性)一半(完全变性)一半时时的的温度温度。2、 Tm (DNADNA熔解温度,熔点熔解温度,熔点)3 请把下列一对英文名词先翻译成中文,然请把下列一对英文名词先翻译成中文,然后再解释该二个名词,并着重说明它们之后再解释该二个名词,并着重说明它们之间的区别。间的区别。 (1)“DNA polymerase”and“DNA primase” (2) “Feedback Inhibiti

3、on” and “reversible Inhibition” (1)“DNA polymerase” -依赖于依赖于DNA的的DNA聚合酶聚合酶 “DNA primase” -依赖于依赖于DNA的的RNA聚合酶聚合酶 (2) “Feedback Inhibition” -反馈抑制反馈抑制 “reversible Inhibition” -可逆抑制可逆抑制2 选择题选择题1 、 涉及有关著名科学家及重要的历史事件涉及有关著名科学家及重要的历史事件如:如:2008,2010,2012年全国硕士研究生统一年全国硕士研究生统一考试生物化学试题中考试生物化学试题中 选择题选择题:22. 阐明阐明TCA

4、循环的循环的科学家是科学家是 A. J.D.Watson B. H.A.Krebs C. L.C. Pauling D. J.B.Sumner22. 1961年年, F.Jacob和和J.Monod提出了提出了 A. 中心法则中心法则 B. 中间产物学说中间产物学说 C. 操纵子学说操纵子学说 D. 诱导诱导契契合学说合学说22. T.Cech和和S.Altman荣获荣获1989年诺贝尔化年诺贝尔化学奖是因为发现学奖是因为发现 A. Enzyme B. Ribozyme C. Abzyme D. Deoxyzyme2009年全国硕士研究生统一考试年全国硕士研究生统一考试生物化学试题生物化学试题

5、22 世界上首次人工合成具有生物活性酵世界上首次人工合成具有生物活性酵母母tRNAAla 的国家是:的国家是: A 美国美国 B 中国中国 C 英国英国 D 法国法国二二 选择题选择题2、 体现一定的知识扩展体现一定的知识扩展2008年全国硕士研究生统一考试年全国硕士研究生统一考试生物化学试题生物化学试题26. 由磷脂类化合物降解产生的信号转导由磷脂类化合物降解产生的信号转导 分子是分子是 A. cAMP B. cGMP C. IMP D. IP3 3, 5-环腺苷酸环腺苷酸 IMP:次黄嘌呤核苷酸:次黄嘌呤核苷酸 肌苷酸肌苷酸 (鲜味剂鲜味剂) HNNNNOR- 5-PPRPP(PRA)(

6、IMP )R-5-PATP AMPPRPP合成酶Gln Glu酰胺转移酶5-磷酸核糖胺9 步反应次黄嘌呤核苷酸IP3: 肌醇肌醇1,4,5-三磷酸三磷酸 - Inositol 1,4,5-trisphosphate磷脂酰胆碱磷脂酸磷脂酰乙醇胺磷脂酰肌醇磷脂酰丝氨酸磷脂酰甘油2009年全国硕士研究生统一考试年全国硕士研究生统一考试生物化学试题生物化学试题 34、劳氏肉瘤病毒逆转录的产物是:、劳氏肉瘤病毒逆转录的产物是: A. DNA B. cDNA C. ccDNA D. Ts-DNA 还有还有cccDNA, Z-DNA, H-DNA等等 ? 2009年全国硕士研究生统一考试年全国硕士研究生统一

7、考试生物化学试题生物化学试题 34、劳氏肉瘤病毒逆转录的产物是:、劳氏肉瘤病毒逆转录的产物是: A. DNA B. cDNA -complementary DNA C. ccDNA D. Ts-DNA-triple strand DNA 还有还有cccDNA, Z-DNA, H-DNA等等 (covalently closed circular DNA)2010年全国硕士研究生统一考试年全国硕士研究生统一考试生物化学试题生物化学试题23. 生物体内氨基酸有生物体内氨基酸有D-型和型和L-型两种,其型两种,其 中中D-型氨基酸通常存在于型氨基酸通常存在于 A. 胰岛素中胰岛素中 B. 抗菌肽中抗

8、菌肽中 C. 细胞色素细胞色素C中中 D. 血红蛋白中血红蛋白中3 考查内容不一定是生物化学学习重点考查内容不一定是生物化学学习重点 如:如:2012年年全国硕士研究生统一考试生物化学试题全国硕士研究生统一考试生物化学试题 五五 选择题选择题35 合成合成dTMP的直接前体是:的直接前体是: A CMP B dCMP C UMP D dUMP2-氧氧-4-氨基嘧啶氨基嘧啶2,4-二氧嘧啶二氧嘧啶5-甲基甲基-2,4-二氧嘧啶二氧嘧啶胞嘧啶胞嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶尿嘧啶尿嘧啶346251346251346251dTMP或或TMP的生成的生成是在一磷酸水平上进行的是在一磷酸水平上进行的dUMPdUD

9、PdCMPdTMPH2OPiH2ONH3NADPHNADP+thymidylate synthaseHNNOOR 5 PdCH3reductaseHNNOOR 5 Pd+ H+FH2问答题:问答题: 真核细胞中生物合成的新生多肽,如果真核细胞中生物合成的新生多肽,如果需要转运(移)到细胞的其他各个部位,需要转运(移)到细胞的其他各个部位,那么其转运(移)的类型有几种?分别是那么其转运(移)的类型有几种?分别是哪几种?哪几种? 答案答案: 2 种分别为:共翻译转运(移)共翻译转运(移) -co-translational translocation (信号肽介导跨膜转运信号肽介导跨膜转运) 翻译

10、后转运(移)翻译后转运(移) -post-translational translocationGTPGTPGDP信号肽信号肽信号肽信号肽识别颗粒识别颗粒信号肽识别颗粒信号肽识别颗粒受体停泊蛋白受体停泊蛋白信号肽酶信号肽酶分子伴侣分子伴侣分子伴侣分子伴侣(molecular chaperone) “proteins that function to prevent or reverse such improper folding and associations,particularly in multi-domain and multi-subunit proteins ”分子伴侣是一类帮助

11、其他多肽在体内进行正帮助其他多肽在体内进行正确的非共价的组装确的非共价的组装,但它不是组装完成后但它不是组装完成后发挥其正常生物功能时的组成部分发挥其正常生物功能时的组成部分。 :an older person who accompanies one or more young unmarried women in public or in mixed company at a social gathering to ensure proper behavior 1993年年,Ellis做了更为确切的定义:做了更为确切的定义: 能够帮助新生肽在体内正确地能够帮助新生肽在体内正确地折叠和组装,但

12、最终自身不结合到折叠和组装,但最终自身不结合到被组装的蛋白质中的蛋白质。被组装的蛋白质中的蛋白质。 因此它又形象地被称为因此它又形象地被称为 “分子伴娘分子伴娘”molecular chaperone (分子伴侣分子伴侣) - molecular helpmate “分子伴娘分子伴娘” -molecular bridesmaidVisualized as 问答题:问答题: 油酸(或亚油酸)油酸(或亚油酸)进行进行-氧化氧化还需要还需要什么酶?为什么?什么酶?为什么? 不饱和脂肪酸的氧不饱和脂肪酸的氧化化区别区别: 经历了三轮经历了三轮 -氧化作用后,氧化作用后,产物在产物在,位有一顺式双键位有

13、一顺式双键,因此接下来的反应不,因此接下来的反应不是脱氢,而是双键的异是脱氢,而是双键的异构化,生成反式的构化,生成反式的,双键双键,然后,然后 -氧氧化作用继续正常进行。化作用继续正常进行。 因此油酸的氧化与相因此油酸的氧化与相同碳的饱和脂肪酸(硬同碳的饱和脂肪酸(硬脂酸)相比,脂酸)相比,只是以一只是以一次双键异构化反应取代次双键异构化反应取代了一次脱氢反应,所以了一次脱氢反应,所以少产生一分子少产生一分子FADHFADH2 2。不是植物类生物化学的主要学习内容不是植物类生物化学的主要学习内容如:如: 2012年年全国硕士研究生统一考试生物化学试题全国硕士研究生统一考试生物化学试题五五 选

14、择题选择题26 胆固醇胆固醇生物合成的限速酶是生物合成的限速酶是 A HMG-CoA合成酶合成酶 B HMG-CoA 裂解酶裂解酶 C HMG-CoA 还原酶还原酶 D 硫激酶硫激酶27 下列下列脂类化合物脂类化合物中含有胆碱基的是中含有胆碱基的是 A 磷脂酸磷脂酸 B 卵磷脂卵磷脂 C 丝氨酸磷脂丝氨酸磷脂 D 脑磷脂脑磷脂 不是植物类生物化学的主要学习内容不是植物类生物化学的主要学习内容如:如: 2012年年全国硕士研究生统一考试生物化学试题全国硕士研究生统一考试生物化学试题五五 选择题选择题26 胆固醇胆固醇生物合成的限速酶是生物合成的限速酶是 A HMG-CoA合成酶合成酶 B HMG

15、-CoA 裂解酶裂解酶 C HMG-CoA 还原酶还原酶 D 硫激酶硫激酶27 下列下列脂类化合物脂类化合物中含有胆碱基的是中含有胆碱基的是 A 磷脂酸磷脂酸 B 卵磷脂卵磷脂 C 丝氨酸磷脂丝氨酸磷脂 D 脑磷脂脑磷脂 28、下列氨基酸中,属于、下列氨基酸中,属于尿素合成尿素合成中间产物的中间产物的是:是: A 甘氨酸甘氨酸 B 色氨酸色氨酸 C 赖氨酸赖氨酸 D 瓜氨酸瓜氨酸 所以,需要兼顾复习一点动物或植物生物化所以,需要兼顾复习一点动物或植物生物化学方面的内容!学方面的内容!(CH2)3CCOO-NHC NHNH2HNH2(CH2)3CCOO-NHC NNH2HNH2CHCH2COO-

16、COO-(CH2)3CCOO-NHCNH2HNH2O(CH2)3CCOO-NH2HNH2OH2CNH2NH2OCOO-CHCHCOO-COO-HCNH2CH2COO-CNH2OOP精氨琥珀酸精氨琥珀酸 合成酶合成酶精氨琥珀酸精氨琥珀酸 裂解酶裂解酶胞液胞液鸟氨酸氨甲酰鸟氨酸氨甲酰 转移酶转移酶精氨酸酶精氨酸酶(2ADP+Pi)NH3+CO2+2ATPGluATPAspAMP+PPiP线粒体线粒体鸟氨酸鸟氨酸精氨酸精氨酸瓜氨酸瓜氨酸Gln尿素循环尿素循环4 选择题的答案可能不是一个选择题的答案可能不是一个 !1 下面关于一个五肽(下面关于一个五肽(Glu-Phe-Lys-Val-Asp)的叙述中

17、,正确的叙述是)的叙述中,正确的叙述是 ( ) A:它含有一种非极性氨基酸:它含有一种非极性氨基酸 B:它含有三种必需氨基酸:它含有三种必需氨基酸 C:它含有一种酸性氨基酸:它含有一种酸性氨基酸 D:它在:它在pH 8的溶液中电泳能向正极移动的溶液中电泳能向正极移动1 下面关于一个五肽(下面关于一个五肽(Glu-Phe-Lys-Val-Asp)的叙述中,正确的叙述是)的叙述中,正确的叙述是 (B, D ) A:它含有一种非极性氨基酸:它含有一种非极性氨基酸 B:它含有三种必需氨基酸:它含有三种必需氨基酸 C:它含有一种酸性氨基酸:它含有一种酸性氨基酸 D:它在:它在pH 8的溶液中电泳能向正极

18、移动的溶液中电泳能向正极移动 2 在蛋白质生物合成的下列步骤完成中,在蛋白质生物合成的下列步骤完成中,需要需要GTP参与的是参与的是 ( ) A:氨基酸的活化:氨基酸的活化 B:70S起始复合物的形成起始复合物的形成 C:氨酰:氨酰-tRNA进入核糖体的进入核糖体的A位点上位点上 D:氨酰:氨酰-tRNA与与mRNA上起始密码子的识上起始密码子的识别结合别结合 2 在蛋白质生物合成的下列步骤完成中,在蛋白质生物合成的下列步骤完成中,需要需要GTP参与的是参与的是 (B, C) A:氨基酸的活化:氨基酸的活化 B:70S起始复合物的形成起始复合物的形成 C:氨酰:氨酰-tRNA进入核糖体的进入核

19、糖体的A位点上位点上 D:氨酰:氨酰-tRNA与与mRNA上起始密码子的识上起始密码子的识别结合别结合 不一定只有一种答案的选择不一定只有一种答案的选择 谷氨酸合酶属于第几大类酶?谷氨酸合酶属于第几大类酶?是否为第四大类酶?是否为第四大类酶?在氨同化成氨基酸的途径中在氨同化成氨基酸的途径中 一种由一种由Gln合成酶合成酶和和Glu合酶合酶协同催化途径协同催化途径 Gln合成酶(合成酶(glutamine synthetase) Glu合酶(合酶(glutamate synthase) 后者又写成:后者又写成:GOGAT( glutamine-oxoglutarate amino transfe

20、rase) ATP ADP+Pi Glu + NH3 Gln Gln 合成酶合成酶(GS) - (NADPH+H+) (NADP+) 2 Fdred 2 Fdox Gln +-Ketog 2 Glu +) Glu 合酶合酶(GOGAT)-Ketog+NH3+ATP+2 Fdred Glu+ADP+Pi+2Fdox+NADP+ 问:问: Glu 合酶合酶(GOGAT)属于第几大类酶属于第几大类酶 ? 答案不是唯一的一个答案不是唯一的一个 !请问:请问:柠檬酸合酶属于第几大类酶?柠檬酸合酶属于第几大类酶? 在在TCA循环中,催化乙酰循环中,催化乙酰CoA与草酰乙酸与草酰乙酸缩合形成柠檬酸的酶缩合形

21、成柠檬酸的酶不叫不叫柠檬酸合成酶,柠檬酸合成酶,应应该称为该称为柠檬酸合酶柠檬酸合酶。属于第二大类酶,应该为酰基转移酶类!属于第二大类酶,应该为酰基转移酶类!三三 问问 答答 题题(一)(一) 简答题简答题: (-需要归纳总结需要归纳总结) 37. 简述简述ATP在生物体内的主要作用。在生物体内的主要作用。37. 答案要点:答案要点:(1) 是生物系统的是生物系统的能量交换中心能量交换中心(2) 参与参与代谢调节代谢调节(蛋白的磷酸化反应)(蛋白的磷酸化反应)(3) 是是合成合成RNA等物质等物质的原料的原料 (4) 是细胞内是细胞内磷酸基团转移的中间载体磷酸基团转移的中间载体 (一)(一)

22、简答题简答题: (-需要归纳总结需要归纳总结)39. 以丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶为例,说以丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶为例,说明酶竞争性抑制作用的特点。明酶竞争性抑制作用的特点。39. (1) 竞争性抑制剂丙二酸的结构与底物琥珀竞争性抑制剂丙二酸的结构与底物琥珀酸结构相似。酸结构相似。 (2) 丙二酸与底物琥珀酸竞争结合琥珀酸脱丙二酸与底物琥珀酸竞争结合琥珀酸脱氢酶的活性中心。氢酶的活性中心。 (3) 丙二酸的抑制作用可以通过增加底物琥丙二酸的抑制作用可以通过增加底物琥珀酸的浓度解除。珀酸的浓度解除。 (4) 加入丙二酸后琥珀酸脱氢酶加入丙二酸后琥珀酸脱氢酶Km值增大,值增大,而而Vmax不变。不变。

23、(一)简答题(一)简答题:39、简述三羧酸循环的简述三羧酸循环的特点。特点。 (需要归纳总结需要归纳总结)每经历一次每经历一次TCATCA循环循环 有有2 2个碳原子(物)通过乙酰个碳原子(物)通过乙酰CoACoA进入循环,进入循环,以后有以后有2 2个碳原子通过脱羧反应离开循环。个碳原子通过脱羧反应离开循环。 有有4 4对氢原子通过脱氢反应离开循环,其中对氢原子通过脱氢反应离开循环,其中3 3对由对由NADHNADH携带,携带,1 1对由对由FADHFADH2 2携带。携带。 产生产生1 1分子高能磷酸化合物分子高能磷酸化合物GTPGTP,通过它可生通过它可生成成1 1分子分子ATPATP。

24、 消耗消耗2 2分子水,分别用于合成柠檬酸(水解分子水,分别用于合成柠檬酸(水解柠檬酰柠檬酰CoACoA)和延胡索酸的加水。和延胡索酸的加水。 TCA循环的总反应循环的总反应答案要点:答案要点:(1)三羧酸循环是在线粒体中进行的;循)三羧酸循环是在线粒体中进行的;循环反应从乙酰环反应从乙酰CoA与草酰乙酸缩合形成柠与草酰乙酸缩合形成柠檬酸开始。檬酸开始。(2)三羧酸循环为单向循环,草酰乙酸可)三羧酸循环为单向循环,草酰乙酸可以看成为是乙酰以看成为是乙酰CoA的载体,在循环中不的载体,在循环中不发生变化。发生变化。(3)循环一周消耗)循环一周消耗 2分子分子H2O ,释放,释放2分子分子CO2,

25、并且使,并且使3分子分子NAD+和和1分子分子FAD还原为还原为3分子分子NADH+H+和和1分子分子FADH2。 (4) 循环中有一步底物水平磷酸化反应,循环中有一步底物水平磷酸化反应,过程中催化过程中催化3步不可逆反应的酶是调控步不可逆反应的酶是调控酶。酶。2012年 简答题39 简述真核生物简述真核生物mRNA前体的加工方式前体的加工方式2012年简答题39 主要加工方式有:主要加工方式有:(1)剪切内含子,连接外显子;)剪切内含子,连接外显子;(2)5末端加入末端加入“帽子结构帽子结构”;(3)3末端加入末端加入“多聚腺苷酸结构多聚腺苷酸结构”;(4)对某些基团进行甲基化修饰)对某些基

26、团进行甲基化修饰 若给出其他合理答案,亦可酌情给分。若给出其他合理答案,亦可酌情给分。2010年全国硕士研究生入学统一考试年全国硕士研究生入学统一考试 农学门类联考(生物化学)试题农学门类联考(生物化学)试题简答题(简答题(需要联系前后相关内容的需要联系前后相关内容的):): 40. 分别写出在己酰分别写出在己酰CoA 的的-氧化与三羧酸氧化与三羧酸循环中,以循环中,以 FAD 和和 NAD+ 为辅酶的脱氢酶为辅酶的脱氢酶 名称名称6 简答题(简答题(需要一定分析后推理判断需要一定分析后推理判断):):38、在体外蛋白质合成体系中,一条有在体外蛋白质合成体系中,一条有CAU重复序列的多聚核甘酸

27、链,经翻译后发现重复序列的多聚核甘酸链,经翻译后发现其产物有三种,即多聚组氨酸,多聚异亮其产物有三种,即多聚组氨酸,多聚异亮氨酸和多聚丝氨酸。如果组氨酸的密码子氨酸和多聚丝氨酸。如果组氨酸的密码子是是CAU,异亮氨酸的密码子是,异亮氨酸的密码子是AUC,那么,那么丝氨酸的密码子是什么?为什么?丝氨酸的密码子是什么?为什么? CAUCAUCAUCAUCAUCAUCAUCAU (1) 丝氨酸的密码子是丝氨酸的密码子是UCA (2) CAU 重复序列的多聚核苷酸链重复序列的多聚核苷酸链的阅读起点可以有的阅读起点可以有3个,从而阅读密个,从而阅读密码子可能有码子可能有3种,即种,即CAU、AUC和和U

28、CA。(一)(一) 简答题简答题: (需要一定的知识拓展需要一定的知识拓展)38. 简述蛋白质的一级结构及其与生物进化的简述蛋白质的一级结构及其与生物进化的 关系。关系。38 (1) 蛋白质一级结构是指蛋白质蛋白质一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序及多肽链中氨基酸残基的排列顺序及二硫键的位置二硫键的位置。(2) 不同物种同源蛋白质一级结构存在不同物种同源蛋白质一级结构存在差异,亲缘关系越远,其一级结构中氨差异,亲缘关系越远,其一级结构中氨基酸序列的差异越大基酸序列的差异越大;亲缘关系越近,其亲缘关系越近,其一级结构中氨基酸序列的差异越小。一级结构中氨基酸序列的差异越小。(3) 与功

29、能密切相关的氨基酸残基是不与功能密切相关的氨基酸残基是不变的,与生物进化相关的氨基酸残基是变的,与生物进化相关的氨基酸残基是可变的。可变的。 需要对比分析需要对比分析题:题: 请说明请说明RNA剪接剪接与与RNA编辑编辑的异同。的异同。 剪接剪接:指转录后精确切除内含子序列,使外显子连:指转录后精确切除内含子序列,使外显子连接成为成熟的接成为成熟的mRNA过程。过程。 编辑编辑:指转录后:指转录后RNA编码区发生的碱基加入、缺失编码区发生的碱基加入、缺失和转换等情况。和转换等情况。相同点:相同点: 均是转录后的加工,基因调控的方式。均是转录后的加工,基因调控的方式。不同点不同点: 前者是切除前

30、者是切除RNA中内含子一段序列;中内含子一段序列; 后者是发生在后者是发生在RNA的编码区,编辑后或者的编码区,编辑后或者 对正常生物造成伤害,甚至死亡,但也增加对正常生物造成伤害,甚至死亡,但也增加 基因产物多样性,造成生物的进化。基因产物多样性,造成生物的进化。(二)综合论述(二)综合论述题:题: (一或几章中内容的综合一或几章中内容的综合) 42. 试从遗传密码、试从遗传密码、tRNA结构和氨酰结构和氨酰tRNA合成酶功能三个方面,阐述在蛋白质生物合成酶功能三个方面,阐述在蛋白质生物合成中,合成中,mRNA的遗传密码是如何准确翻的遗传密码是如何准确翻译成多肽链中氨基酸排列顺序的。译成多肽

31、链中氨基酸排列顺序的。(1) mRNA上三个相邻的核苷酸组成密码子上三个相邻的核苷酸组成密码子编码一种氨基酸。遗传密码具有简并性。编码一种氨基酸。遗传密码具有简并性。(2) tRNA反密码子环上具有的反密码子,反密码子环上具有的反密码子,可以按照碱基配对原则反向识别可以按照碱基配对原则反向识别mRNA上的密码子。但这种识别具有上的密码子。但这种识别具有“摆动摆动性性”。tRNA的结构影响其结合氨基酸的的结构影响其结合氨基酸的特异性。特异性。(3) 氨酰氨酰tRNA合成酶具有专一性识别氨基合成酶具有专一性识别氨基酸和能携带该氨基酸酸和能携带该氨基酸tRNA的功能。氨酰的功能。氨酰tRNA合成酶还

32、具有二次校对功能。合成酶还具有二次校对功能。(二)(二) 综合论述综合论述题:题: 41、论述生物氧化的特点。论述生物氧化的特点。 生物氧化的定义生物氧化的定义 有机物(糖、脂、蛋白质等)在生物细胞有机物(糖、脂、蛋白质等)在生物细胞里氧化分解为里氧化分解为COCO2 2和和HH2 2OO,并释放出能量的过,并释放出能量的过程叫生物氧化程叫生物氧化。与非生物氧化相比的共同点:与非生物氧化相比的共同点:1 化学反应本质相同,都是失电子反应;化学反应本质相同,都是失电子反应;2 同种同种物质不论以何种方式氧化,所释放的能物质不论以何种方式氧化,所释放的能量相同。量相同。 与非生物氧化相比的与非生物

33、氧化相比的不同点不同点: 生物氧化是酶促反应,反应条件温和(如常温、生物氧化是酶促反应,反应条件温和(如常温、中性中性pHpH) ;而体外氧化(燃烧)通常是剧烈的反而体外氧化(燃烧)通常是剧烈的反应,要求在高温、高压等条件下进行。应,要求在高温、高压等条件下进行。 生物氧化分阶段逐步缓慢地氧化,能量也逐步释生物氧化分阶段逐步缓慢地氧化,能量也逐步释放放;而体外燃烧能量是爆发式释放出来的而体外燃烧能量是爆发式释放出来的。生物氧化生物氧化释放的能量有相当多的转换成释放的能量有相当多的转换成ATPATP中活中活跃的化学能,跃的化学能,用于各种生命活动用于各种生命活动。生物氧化反应的表现形式生物氧化反

34、应的表现形式:1 加氧加氧 被氧化物质分子中加入氧被氧化物质分子中加入氧 生物体内,生物体内, 以上有些反应实质是通过加水后再脱氢以上有些反应实质是通过加水后再脱氢实现的。实现的。2 脱氢脱氢 RCHO + O2 RCOOH HRCHO +H2 O R-C-OH RCOOH OH NAD+ NADH+H+ RCH2OH RCHO3 失电子失电子 - e Fe2+ Fe3+生物氧化中生物氧化中 COCO2 2 和和 H H2 2O O 的生成的生成1 1、COCO2 2的生成的生成 直接脱羧:直接脱羧: 如丙酮酸脱羧酶催化如丙酮酸脱羧酶催化丙酮酸脱羧丙酮酸脱羧 变成乙醛的反应变成乙醛的反应 氧化

35、脱羧:氧化脱羧: 如丙酮酸脱氢酶复合物如丙酮酸脱氢酶复合物催化丙酮催化丙酮 酸脱氢脱羧变成乙酰酸脱氢脱羧变成乙酰CoA的反应的反应直接脱羧:直接脱羧:CH3CCOOHOCH3CHO + CO2丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱羧酶(-脱羧)脱羧)( -脱羧)脱羧) PEP羧激酶羧激酶氧化脱羧:氧化脱羧: 在氧化过程(脱氢)过程中伴随着脱羧在氧化过程(脱氢)过程中伴随着脱羧 H2O的生成的生成在糖酵解在糖酵解第九步第九步PEP的生成过程中:的生成过程中:(Phosphoenol pyruvic acid)Mg2+ 水水三羧酸循环中三羧酸循环中-柠檬酸异构化成异柠檬酸柠檬酸异构化成异柠檬酸三羧酸循环中:琥珀酰三

36、羧酸循环中:琥珀酰CoACoA生成琥珀酸生成琥珀酸GDP + Pi GTP2 H2O的生成的生成 在生物体内,主要是通过以在生物体内,主要是通过以脱氢酶脱氢酶、电子传递、电子传递体及氧化酶组成生物氧化体系来生成水的。体及氧化酶组成生物氧化体系来生成水的。MH2M递氢体递氢体递氢体H2 NAD+、NADP+、FMN、FAD、COQ还原型氧化型Cyt递电子体递电子体 b, c1, c, aa32H+2e O2O2-H2O脱氢酶脱氢酶氧化酶氧化酶答案:答案:(1)生物氧化包括线粒体氧化体系和非线粒)生物氧化包括线粒体氧化体系和非线粒 体氧化体系。真核细胞生物氧化主要是体氧化体系。真核细胞生物氧化主要

37、是 线粒体氧化体系,原核细胞生物氧化主线粒体氧化体系,原核细胞生物氧化主 要是在细胞膜上进行。要是在细胞膜上进行。(2)生物氧化是在活细胞的温和条件下进行)生物氧化是在活细胞的温和条件下进行(3)是一系列酶、辅酶和中间传递体参与的)是一系列酶、辅酶和中间传递体参与的 多步骤反应。多步骤反应。(4)能量逐步释放,)能量逐步释放,ATP是能量转换的是能量转换的 载体。载体。(5)真核细胞在有氧条件下条件下,)真核细胞在有氧条件下条件下, CO2 由由TCA循环中酶催化脱羧产生,循环中酶催化脱羧产生, H2O 主要是主要是由代谢物脱下的氢经呼吸由代谢物脱下的氢经呼吸链链传给传给氧形成的。氧形成的。(

38、二)综合论述(二)综合论述题:题: 42、论述酶活性别构调节特点及生物、论述酶活性别构调节特点及生物学的意义。学的意义。别构调节的特点:别构调节的特点:1 别构酶结构特点:别构酶结构特点: 一般为寡聚酶。一般为寡聚酶。 酶蛋白上有二类功能部位,即活性中心酶蛋白上有二类功能部位,即活性中心和别构中心。和别构中心。 别构中心与效应物通过可逆非共价结合,别构中心与效应物通过可逆非共价结合,导致酶活性中心的构象发生变化。导致酶活性中心的构象发生变化。别构调节的特点:别构调节的特点:2 别构酶的动力学特点:不符合典型米别构酶的动力学特点:不符合典型米氏酶的双曲线,正协同效应的别构酶呈氏酶的双曲线,正协同

39、效应的别构酶呈现现“S”型曲线。型曲线。3 别构剂(效应物)分为正效应物和负别构剂(效应物)分为正效应物和负效应物,其中,前者起激活效应,后者效应物,其中,前者起激活效应,后者起抑制效应;同促效应物为底物,异促起抑制效应;同促效应物为底物,异促效应物为非底物化合物。效应物为非底物化合物。生物学意义:生物学意义: 底物浓度发生较小变化时,别构酶底物浓度发生较小变化时,别构酶可以灵敏、有效地调节酶促反应速度,可以灵敏、有效地调节酶促反应速度,保证重要代谢途径正常运行。保证重要代谢途径正常运行。正协同效应别构酶与米氏酶动力学比较正协同效应别构酶与米氏酶动力学比较 2009年考研生物化学试题年考研生物

40、化学试题 37请用中文或者符号写出糖原(或淀粉)、请用中文或者符号写出糖原(或淀粉)、脂肪酸和蛋白质多肽链生物合成中的单体脂肪酸和蛋白质多肽链生物合成中的单体活化活化反应式。反应式。 -(几章内容的综合)(几章内容的综合)37 UDPG焦磷酸化酶焦磷酸化酶(1)G1P + UTP + H2O UDPG+ PPi ADPG焦磷酸化酶焦磷酸化酶 或或 G1P + ATP + H2O ADPG+ PPi 37 (2)乙酰)乙酰CoA+HCO3- +H+ATP 丙二酸丙二酸单酰单酰CoA+ADP+Pi 乙酰乙酰CoA羧化酶羧化酶 37 (3) 氨基酸氨基酸 + tRNA + ATP 氨氨酰酰-tRNA

41、 + AMP + PPi 氨酰氨酰-tRNA合成酶合成酶 三三 一定难度题一定难度题1 一个八肽的氨基酸序列为:一个八肽的氨基酸序列为: Gln-Trp-His-Ser-Ile-Arg-Pro-Gly, 请回答:请回答: 在在pH7时该肽所带净电荷性质和数量及等电点时该肽所带净电荷性质和数量及等电点(pI)大小。)大小。 已知:已知: -COOH R(His)-咪唑咪唑 - NH3+ R(Arg)-NH3+ pK 2.34 6.0 9.67 12.48 1 一个八肽的氨基酸序列为:一个八肽的氨基酸序列为: Gln-Trp-His-Ser-Ile- Arg-Pro-Gly, 请回答:请回答: 在

42、在pH7时该肽所带净电荷性质和数量及等时该肽所带净电荷性质和数量及等电点(电点(pI)大小。)大小。 已知:已知: -COOH R-咪唑咪唑 - NH3+ R(Arg)-NH3+ pK 2.34 6.0 9.67 12.48 pH7时时 Gly His Glu Arg -1 0 +1 +1等电点的计算等电点的计算例例 Gly 的的pI 计算计算H+H +NH2 CH2 COOGly NH3 CH2 COO Gly NH3 CH2 COOHGly H+H +K1K2K1 、K2分别代表分别代表COOH和和NH3的表观解的表观解离常数。可以从离常数。可以从滴定曲线中求得。滴定曲线中求得。等电点的计

43、算等电点的计算例例 Lys 的的pI 计算计算溶液溶液 pH 值增大值增大COOHCHNH3(CH2) 4NH3Lys + COOCHNH2(CH2) 4NH2Lys COOCHNH3(CH2) 4NH3Lys+ H+H +Lys COOCHNH2(CH2) 4NH3H+H +H+H +K1K2K3答案:答案: 所带的净电荷为:所带的净电荷为:+1 等电点(等电点(pI) = 11 .1 9.67+12.48 pI = = 11 .075 = 11.1 2但请注意但请注意: 蛋白质蛋白质分子中分子中氨基酸残基氨基酸残基侧链基团侧链基团的解离情况往往的解离情况往往与游离与游离氨基酸中氨基酸中的解

44、离的解离情况还是不一样情况还是不一样 ! 请看请看一个例子:一个例子: 甘氨酸与丙酸羧基的甘氨酸与丙酸羧基的pK 值相差很大值相差很大,前者羧基的解离强度约是后者的前者羧基的解离强度约是后者的300倍倍 !( pK =2.35) (pK =4.87) 原因:原因: Gly中的氨基对附近羧基中质子存中的氨基对附近羧基中质子存 在的斥力而形起的。在的斥力而形起的。 CCCO-OOO-HHCCO-OHHNH3+2 2008年硕士统考农学联考年硕士统考农学联考(生物化学生物化学)分析论述题分析论述题41.磷酸磷酸二羟丙酮二羟丙酮是是如何联系糖代谢与脂肪代谢如何联系糖代谢与脂肪代谢途径途径的的? (动动

45、、植物体内)糖与脂的转化问题?、植物体内)糖与脂的转化问题?-(1) 磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮是糖代谢的中间产物,是糖代谢的中间产物,-磷酸甘油是脂肪代谢的中间产物磷酸甘油是脂肪代谢的中间产物; 因此,因此,磷酸二羟丙酮与磷酸二羟丙酮与-磷酸甘油磷酸甘油之间之间的转化是联系糖代谢与脂代谢的关键反应。的转化是联系糖代谢与脂代谢的关键反应。 (2) 磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮有氧氧化产生的有氧氧化产生的乙酰乙酰CoA可作为可作为脂肪酸从头合成的原料脂肪酸从头合成的原料,同时磷酸二,同时磷酸二羟丙酮可羟丙酮可转化形成转化形成-磷酸甘油磷酸甘油,脂肪酸和,脂肪酸和-磷酸甘油是磷酸甘油是合成脂肪的原料合成

46、脂肪的原料。(3) 磷酸二羟丙酮磷酸二羟丙酮经糖异生途径转化为经糖异生途径转化为 6-磷磷酸葡萄糖,再酸葡萄糖,再经磷酸戊糖途径经磷酸戊糖途径产生产生NADPH+H+,该物质是该物质是从头合成脂肪酸的还从头合成脂肪酸的还原剂原剂。(4) 脂肪脂肪分解产生的分解产生的甘油甘油可转化为磷酸二可转化为磷酸二羟丙酮羟丙酮。可进入。可进入糖异生途径产生葡萄糖糖异生途径产生葡萄糖,也,也可以进入三羧酸循环可以进入三羧酸循环彻底氧化分解彻底氧化分解。4 计计 算算 题题 (非蛋白质或核酸长度的计算(非蛋白质或核酸长度的计算 和需要能量或产生能量方面的计算题)和需要能量或产生能量方面的计算题) 2009年全国

47、硕士研究生入学统一考试年全国硕士研究生入学统一考试 农学门类联考(生物化学)试题农学门类联考(生物化学)试题 七、实验题:七、实验题: 40 分离纯化某蛋白酶的主要步骤和结果如下表:分离纯化某蛋白酶的主要步骤和结果如下表: 分离步骤分离步骤 分离液体积分离液体积 总蛋白含量总蛋白含量 总活力总活力 (ml) (mg) (IU)1 离心离心 1,400 10,000 100,0002 硫酸铵沉淀硫酸铵沉淀 280 3,000 96,0003 离子交换离子交换 90 400 80,0004 亲和层析亲和层析 6 3 45,000 请计算请计算 2 、3 和和4 步的回收率和纯化倍数。步的回收率和纯

48、化倍数。 2012年农学农学研究生联考生物化学试题年农学农学研究生联考生物化学试题8 分析论述题:分析论述题: 41、已知某米氏酶只能催化底物已知某米氏酶只能催化底物S1或或S2转变转变为产物,且为产物,且S1的的Km = 2.0 x 10-4 mol/L; S2的的Km = 3.0 x 10-2 mol/L 。(1)试分析哪一种底物是该酶的最适底物?)试分析哪一种底物是该酶的最适底物? (2)若两种底物浓度都是)若两种底物浓度都是0.2 x 10-3 mol/L,请计算两个酶促反应的速度与最大反应速度请计算两个酶促反应的速度与最大反应速度之比。之比。答案答案:(1)根据酶的米氏常数越小,酶与

49、底物的亲)根据酶的米氏常数越小,酶与底物的亲和力越大的规律,可知和力越大的规律,可知S1是该酶的最适底物。是该酶的最适底物。(2)根据米氏方程)根据米氏方程V= (Vmax S)/(Km+S)进进行计算,行计算, 以以S1为底物的酶促反应,其为底物的酶促反应,其V/Vmax =1/2; 以以S2为底物的酶促反应,其为底物的酶促反应,其V/Vmax =1/151南京农业大学南京农业大学20132013年硕士研究生入学考试初试试题(年硕士研究生入学考试初试试题(A A卷)卷)四四 计算题计算题 现有一不含蛋白质的核酸(DNA和RNA)混合样品180g,其A260/A280值为1.9,并已知:50g

50、纯DNA的A260=1,而40g纯RNA的A260=1。请根据纯RNA和纯DNA的A260/A280值计算:(1)多少g纯DNA的A280=1?多少g纯RNA的A280=1?(2)该180g核酸样品中DNA和RNA的g数分别是多少? (注意:需要写出计算过程注意:需要写出计算过程)解:设解:设 DNA为为 xg,则,则 RNA为为180-xg 再设再设 1 A280的 DNA为为 ag,1 A280的RNA为为 bg 已知:已知: DNA的A260/A280值为1.8 则(则(x/50)/ (x/a)= a / 50 = 1.8 a = 1.8 x 50 = 90 (g) 又已知又已知:DNA

51、的A260/A280值为2.0 同理,同理, b = 40 x2 = 80 (g) 解:解: 由由A260/A280值为值为1.9 得:得: x/50+(180-x/40) / x/90+(180-x)/80 = 1.9 解得:解得: DNA: x = 95.3 (g) RNA: 180 - 95.3 = 84.7 ( g)(四)(四) 实验题实验题 2008年硕士统考农学联考年硕士统考农学联考(生物化学生物化学)题题 40. 从动植物细胞匀浆中提取基因组从动植物细胞匀浆中提取基因组DNA时,常用时,常用EDTA、氯仿、氯仿-异戊醇混合液和异戊醇混合液和95%乙醇试剂。请根据蛋白质和核酸的理乙

52、醇试剂。请根据蛋白质和核酸的理化性质回答:化性质回答:(1) 该实验中这些试剂各起什么作用该实验中这些试剂各起什么作用?(2) 举出一种可以鉴定所提取基因组的举出一种可以鉴定所提取基因组的DNA中是否残留有中是否残留有RNA的方法。的方法。(1)试剂的作用试剂的作用 EDTA可螯合金属离子,抑制可螯合金属离子,抑制DNA酶的活性。酶的活性。 氯仿氯仿-异戊醇混合液使蛋白质变性异戊醇混合液使蛋白质变性沉淀,并能去除脂类物质。沉淀,并能去除脂类物质。 95%乙醇可使乙醇可使DNA沉淀。沉淀。(2)鉴别方法鉴别方法 采用地衣酚试剂检测采用地衣酚试剂检测RNA分子中的核分子中的核糖。如果反应液呈绿色,说明残留有糖。如果反应液呈绿色,说明残留有RNA。 采用紫外吸收法检测采用紫外吸收法检测A260/A280的比的比值。如果比值大于值。如果比值大于1.8,说明残留有,说明残留有RNA。 采用琼脂糖凝胶电泳法检测是否有小采用琼脂糖凝胶电泳法检测是否有小分子量的分子量的RNA条带存在。条带存在。2009年硕士统考农学联考年硕士统考农学联考(生物化学生物化学)题题 40、酶纯化实验中,通常先用(酶纯化实验中,通常先用(NH4)2SO4作作为分级沉淀剂,再用为分级沉淀剂,再用Sephadex G-25凝胶柱层凝胶柱层析法从沉淀酶液中除

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