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文档简介
1、1小鼠的超数排卵不同激素对不同小鼠超排的影响研究指导老师:刘云海10131乙 于昊2研究的理论依据w造成超排效果(获卵率和可用的胚胎数)不稳定的因素主要有两大类:一类是动物因素,包括个体和遗传的差异、生理和营养状态、开始超排的日期、季节及其它影响动物的环境因素;另一类是药物因素,包括激素的半衰期、激素制剂中的FSHLH比例、给药途径、剂量和频率等。 3研究的理论依据w动物的整个生殖活动都是受神经、激素控制的。生殖系统与神经系统、内分泌系统之间形成一条中枢神经、下丘脑、垂体、性腺轴。由于这条轴的作用,使动物的生命活动按照严格的规律有条不紊的进行。中枢神经系统把外界环境刺激传到下丘脑,使之分泌促性
2、腺释放激素,促性腺释放激素作用于垂体,促使垂体分泌促性腺激素,促性腺激素即作用于性腺,使性腺分泌性腺激素。垂体激素可以通过反馈作用调节下丘脑释放激素的分泌。同样,性腺激素也可以通过反馈作用调节下丘脑和垂体释放相应的激素。w生殖激素是指与动物性器官、性细胞、性行为等的发生和发育以及发情、排卵、妊娠、分娩和泌乳等生殖活动有直接关系的激素。4几种对母鼠繁殖有作用的激素A类别名称简称来源化学特征生理功能下丘脑部激素促性腺激素释放激素GnRH下丘脑十肽促进腺垂体释放促黄体素和促卵泡素催产素OXT下丘脑合成,神经垂体释放九肽促进子宫收缩、促进子宫收缩、排乳,并具溶排乳,并具溶解黄体作用解黄体作用5几种对母
3、鼠繁殖有作用的激素B促性腺激素促卵泡素GnRH腺垂体糖蛋白促使卵泡发育和成熟,促进精子发生促黄体素LH腺垂体糖蛋白刺激排卵,促进黄体生成,促进雄激素和孕激素的分泌促乳素PRL腺垂体糖蛋白促进泌乳,对某些动物刺激黄体功能和孕酮的分泌,增强母性行为孕马血清促性腺激素PMSG马属动物尿囊绒毛膜糖蛋白与促卵泡素类似,促进马属动物辅助黄体的形成人类绒毛膜促性腺激素hCG灵长类胎盘绒毛膜糖蛋白与促黄体素类似其它前列腺素 PG子宫及其他脂肪酸溶解黄体,促进子宫收缩6目前的研究进展w在目前,关于超数排卵已有一些研究。如杨文胜、倪和民等发现采用相同品种、月龄和体重的处女母兔进行超数排卵试验, 过低或过高剂量的P
4、MSG,显着降低母兔的超排效果,hCG剂量的提高,有助于提高排卵率,获得较多的胚胎。而徐平对不同品系及日龄小鼠的超排研究发现,用PMSG和hCG分别对不同日龄(28日龄、56日龄及112日龄)的ICR、B6C3F1及C57BL/6J三个品系超排处理后,28日龄小鼠的排卵数高于56日龄及112日龄的排卵数(P0.01)。而这与Yokoyama与朱士恩研究结果完全相同。在李秦等研究中,用PMSG、APMSG、hCG、LHRH等对大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、绵羊、猪、牛等的超排作用系统探索后发现,PMSG和hCG各510IU可使小鼠产生稳定的超排,取卵数达5010个。 7目前的研究进展w参考文献w杨文胜
5、 倪和民等 母兔超数排卵方法的研究 实验动物科学与管理 1996. 4 w徐平 不同日龄与品系小鼠超排卵、体外受精及受孕率的比较研究 中国实验动物学杂志 2001. 6 w李秦等 不同激素对哺乳动物超数排卵作用的研究 实验动物科学与管理 1997.38实验方法 主要实验内容:主要实验内容: 以小鼠为研究对象,其腹腔注射以小鼠为研究对象,其腹腔注射PMSGhCG、PMSGhCG或或PG F2比较几组注射后排比较几组注射后排卵的效果。卵的效果。 主要研究方法:主要研究方法: 实验所需要的材料: a、实验动物:清洁级小白鼠30只 b、实验药品:一定量的孕马血清促性腺激素(PMSG)人类绒毛膜促性腺激
6、素 (hCG) 前列腺素F2a(PG F2)需要产地明确。生理盐/水,75%乙醇、PBS(自配)。9实验方法w主要研究方法主要研究方法wc.实验器械 一次性塑料培养皿、显微镜、灭菌手术器械(眼科剪、眼科镊)、?ml无菌注射器、吸管等。wd.实验步骤w将小鼠分为A、B及对照组三组,A、B每组6只,对照组8只,A组腹腔注射PMSG + hCG ,B组腹腔注射PSMG + PG F2 ,对照组不作任何处理。这样的注射一般在每天下午四点左右进行。先注射PMSG(A、C组)、FSH(B组),在44小时候后注射hCG (B组组)和PG F2(C组)组),在注射后第二天上午约八点左右将前一天处理过得小鼠处死,打开小鼠腹腔,取出输卵管及卵巢,撕裂输卵管壶腹部,将胚胎冲出,在显微镜下检查胚胎、卵巢,计数、记录 。10实验方法11实验结果w观察解剖小鼠
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