XESERIES检测原理

1、X Series五分类血液分析仪检测原理目录n基本性能n检测原理n参数的检测原理n报警原理n误差分析XE-SERIES 血液分析仪器基本性能机型机型XE-2100XT-1800iXS-800iSF-3000速度150t/h80t/h60t/h80t/h闭盖全血200ul150ul-270ul开盖全血130ul85ul20ul170ul预稀释40ul40ul20ul40ulCBC全血/预稀释全血/预稀释全血/预稀释全血/预稀释DIFF全血全血全血/预稀释全血IMI全血-NRBC全血-RET全血/预稀释(113t/h)-检测原理-标本检测流程nWBC/BASO:流式原理；nNRBC、4DIFF、R

2、ET： 流式细胞技术和核酸荧光染色技术；nIMI：使用射频/直流电技术和流式细胞技术；nRBC/PLT利用液流聚焦电阻抗技术；nHGB：SLS原理。 核酸荧光染色技术： SYSMEX公司采用聚次甲基和垩嗪作为核酸荧光染料，细胞经过特殊溶血素的处理，荧光染料可以快速进入胞浆和胞核对核酸染色，细胞内的荧光染料在633nm激光的激发下产生一定的荧光强度，这种荧光强度与细胞的核酸含量成正相关，荧光染色后，荧光强度大小依次排列顺序为：异型淋巴细胞 原始细胞/幼稚粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 粒细胞/晚幼红细胞 网织红细胞/网织血小板/聚集血小板 成熟红细胞/成熟血小板。 流式细胞技术 待测血样稀释成单个细

3、胞悬液，细胞经过快速特异性核酸荧光染色，在鞘液的约束下，排成单列由流动室的喷嘴喷出，通过测量区的细胞在垂直入射的激光束照射和激发下，产生前向散射光（FSC）、侧向散射光（SSC）、侧向荧光（SFL）。FSC主要反映细胞的大小，SSC主要反映细胞内颗粒物质的大小和多少，SFL主要反映细胞的核酸含量的多少。射频（RF）/直流（DC）电技术 nRF/DC 检测技术，通过直流电阻的变化测定血细胞的大小，并通过射频电阻测定血细胞内的密度。图四显示的是一个白细胞的RF/DC信号。在IMI通道中，RF/DC技术主要用来检测幼稚髓细胞， 越幼稚的细胞密度越小。 RF信号大小依次顺序是： 杆状核粒细胞 幼稚粒

4、细胞 原始髓细胞 造 血干祖细胞（包括HPC）。 液流聚焦电阻抗技术 n液流聚焦技术是流式细胞术中的一种技术，利用液体层流将使细胞排成单列通过检测孔，图五中，前鞘流保证细胞单个通过检测孔，避免细胞与细胞重叠通过检测孔；后鞘流避免液体返流，避免细胞随着返流液体再次通过检测孔。利用液流聚焦技术可以使细胞计数 结果更加准确，重复性更好。 在检测孔，细胞将得到阻抗 信号，由于细胞是一个不良 导体，细胞越大，阻抗信号 越大，阻抗信号反映细胞的 大小信息。SLS（十二烷基磺酸钠）法原理：1，红细胞溶解释放血红 蛋白；2，改变血红蛋白结构；3，氧化二价铁为三价铁；4，形成SLS-Hb化合物。SLS-Hb在5

5、35nm有最大吸收峰，根据朗伯比尔定律将535nm处SLS-Hb的吸光度换算成血红蛋白浓度。SLS法具有无毒的优点，而且与国际参考方法氰化高铁血红蛋白法具有很好的相关性。XE系列试剂英文名称中文名称作用CELLPACK稀释液RBC/PLT/HGB检测CELLSHEATH鞘流液前鞘流、后鞘流STROMATOLYSER-FB嗜碱通道溶血素溶解出嗜碱细胞以外的白细胞为裸核STROMATOLYSER-4DL白细胞分类溶血素溶解红细；在白细胞膜上打孔STROMATOLYSER-4DS白细胞分类染液核酸染色STROMATOLYSER-NR（溶血素）有核红细胞通道溶血素 溶解有核红细胞为裸核STROMATO

6、LYSER-NR（染液）有核红细胞通道染液核酸染色SULFOLYSER红细胞溶血素HGB检测STROMATOLYSER-IMIMI通道溶血素溶解成熟白细胞RET SEARCH（II）（稀释剂）网织红细胞通道稀释液 RET检测RET SEARCH（II）（染液）网织红细胞通道染液核酸染色白细胞检测原理nDIFF通道通道nWBC/BASO通道通道nIMI通道通道nNRBC通道通道DIFF通道4DLn 完全溶解红细胞血小板n 在白细胞膜上打孔4DSn 对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL） 反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内容物复杂程度试剂反应（）试剂反应（）试剂反应（）DIFF通道

7、的重要信息n异常细胞：幼稚粒细胞、原始细胞、异型异常细胞：幼稚粒细胞、原始细胞、异型淋巴细胞、有核红细胞、疟原虫淋巴细胞、有核红细胞、疟原虫n抗干扰能力强，抗干扰能力强，WBCWBC更加准确：难溶红细胞、更加准确：难溶红细胞、聚集血小板、脂质颗粒聚集血小板、脂质颗粒异型淋巴细胞，原始细胞和幼稚粒细胞n异型淋巴细胞：病毒、原虫等刺激下，胞体体增大、胞质增多、嗜碱性增强，细胞核母细胞化。散点图上荧光强度最强n幼稚粒细胞：RNA的合成随着细胞的程度而逐渐减少，即细胞越幼稚，RNA越多，散点图上荧光强度越高n原始细胞：一般情况下，五种白细胞不能正常分类，时OTHER区域一般为原始细胞幼稚粒细幼稚粒细胞

8、胞异常淋异常淋巴巴嗜酸嗜酸中中性性单单核核淋淋巴巴嗜嗜碱碱疟原虫散点图散点图特征：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢散点图特征：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢有核红细胞n晚幼红细胞核固缩，细胞简单，因此在淋巴细胞的正下方。难溶红细胞和脂质颗粒、血小板聚集n难溶红细胞表现为白细胞群下方有大量散点出现，并且部分显示为淡兰色（和白细胞相同的颜色）n脂质颗粒在散点图上表现为胡须状n当出现难溶红细胞和脂质颗粒的时候，WBC-BASO受到干扰，不准确。此时WBC-DIFF利用核酸荧光染色技术可以排除这些干扰，因此比较准确n聚集的血小板在两个通道内都显示在GOHST区域，不会影响WBCWBC/BASO通道STR

9、OMATOLYSER-FB 完全溶解红细胞血小板完全溶解红细胞血小板 除嗜碱细胞以外的白细胞溶解除嗜碱细胞以外的白细胞溶解为裸核为裸核 嗜碱细胞保持原状嗜碱细胞保持原状纵坐标：前向散射光（纵坐标：前向散射光（FSC） 反映细胞大小反映细胞大小横坐标：侧向散射光（横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内容物复杂程度反映细胞内容物复杂程度嗜碱嗜碱其他其他白细白细胞胞IMI(The immature myeloid information)通道STROMATOLYSER-IM 溶解红细胞血小板、成熟溶解红细胞血小板、成熟白细胞白细胞 粒系幼稚细胞保持原状粒系幼稚细胞保持原状纵坐标：射频（纵坐标：射频

10、（RF） 反映细胞密度反映细胞密度横坐标：直流电（横坐标：直流电（DC） 反映细胞大小反映细胞大小中幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞原始细胞杆核杆核红细胞检测原理nRBC/PLT通道通道nRET通道通道nNRBC通道通道RBC/PLT通道n双鞘流阻抗法双鞘流阻抗法n浮动界标浮动界标nRDW-SD 假设峰值高度为假设峰值高度为100%，在在20%频率水平上的分频率水平上的分布宽度即为布宽度即为RDW-SD。单位用单位用fL 表示。表示。nRDW-CV 点点L1和和L2在总分布区域在总分布区域中的出现频率为中的出现频率为68.26%，使用下列方程计算使用下列方程计

11、算 RDW-CV=（L2 - L1）/（L2 +L1）RET/PLT-O通道RET SEARCH（II）稀释）稀释剂剂 稀释标本稀释标本RET SEARCH（II）染液）染液 对核酸染色对核酸染色纵坐标：前向散射光纵坐标：前向散射光（FSC） 反映细胞大小反映细胞大小横坐标：侧向荧光（横坐标：侧向荧光（SFL） 反映核酸含量反映核酸含量LFR MFR HFR WBCLFR MFR HFR WBCRBCRBCPLTPLT疟原虫核酸含量略核酸含量略少于低荧光少于低荧光强度的网织强度的网织红细胞红细胞NRBC通道NR 溶血素溶血素 完全溶解红细胞血小板完全溶解红细胞血小板 白细胞保持原状白细胞保持原

12、状 有核红细胞溶解为裸核有核红细胞溶解为裸核NR 染液染液 对核酸染色对核酸染色纵坐标：前向散射光（纵坐标：前向散射光（FSC） 反映细胞大小反映细胞大小横坐标：侧向荧光（横坐标：侧向荧光（SFL） 反映核酸含量反映核酸含量NRBCNRBCWBCWBC修正WBCEo EoBa BaMoMoNeNeLyNRBCNRBCNRBCNRBC扣除扣除扣除扣除修正修正WBCWBC修正分类修正分类扣除扣除血小板检测原理nRBC/PLT通道通道nRET通道通道RBC/PLT通道双鞘流阻抗法双鞘流阻抗法浮动界标浮动界标PDW 假设峰值高度为假设峰值高度为100%，在在20%频率水平上的分布频率水平上的分布宽度即

13、为宽度即为PDW。单位用。单位用fL表示。表示。P-LCR 由由12 fL界标得到的巨型界标得到的巨型血小板的比值。计算时，血小板的比值。计算时，将固定界标与高界标之间将固定界标与高界标之间的粒子数，同低界标与高的粒子数，同低界标与高界标之间的粒子数相比而界标之间的粒子数相比而得到一个比值。得到一个比值。RET/PLT-O通道PLT-I, 低可信度低可信度PLT-O,低可信度低可信度PLT 计数无效计数无效PLT-I报告报告PLT-O报告报告NoNoYesYesPLT-I 向向PLT-O 转换规则转换规则PLT-I, 低可信度PLT-O,低可信度PLT 计数无效PLT-I报告PLT-O报告No

14、NoYesYesnPLT-I 由由 PLT直方图获得直方图获得PLT-O 由由RET 散点图获得散点图获得(2) PL(%) 9%(2) PL(%) 9%(3) PU(%) 39%(3) PU(%) 39%(4 )PU 20%(4 )PU 20%(1) RL(%) 10%(1) RL(%) 10%(5) (5) 出现出现 “Fragments?Fragments?”报警报警(6) (6) 出现出现 “RBC Agglutination?RBC Agglutination?”报警报警(7) PU% 13% and PLT 35fL45% and PLT-(7) PU% 13% and PLT 3

15、5fL45% and PLT-I#=80 x109/LI#=80 x109/L(8) PLT-I 50 x109/L(8) PLT-I 115%(9) PLT-I/PLT-O 115%如果如果WBC WBC 碎片在碎片在PLT-OPLT-O计数中出现计数中出现 , , PLT PLT 计数无效计数无效: : PLT PLT “-”报警原理复检规则复检规则SuspectabnormalIP信息的来源散点图散点图直方图直方图SFSFL LSSCSSCFSCFSCSSCSSCRFRFDCDCFSCFSCSFLSFLFSCFSCSFLSFLDIFFWBC/BAIMINRBCWBCWBC报警报警怀疑怀疑

16、/ /异常异常RETRBC_DCRBC/RET RBC/RET 报警报警怀疑怀疑/ /异常异常DIFFPLT_DCRBC_DCIMIRET(Plt-O)RET(Plt-O)PLT PLT 报警报警怀疑怀疑/ /异常异常nIP信息解释信息解释 n白细胞白细胞报警项目报警项目中文中文信息来源信息来源WBC Abn ScattergramWBC Abn ScattergramNRBC Abn ScattergramNRBC Abn ScattergramNeutropeniaNeutropeniaNeutrophiliaNeutrophiliaLymphopeniaLymphopeniaLympho

17、cytosisLymphocytosisMonocytosisMonocytosisEosinophiliaEosinophiliaBasophiliaBasophiliaLeukocytopeniaLeukocytopeniaLeukocytosisLeukocytosisNRBC presentNRBC present白细胞散点图异常白细胞散点图异常有核红细胞散点图异常有核红细胞散点图异常中性粒细胞减少中性粒细胞减少中性粒细胞增多中性粒细胞增多淋巴细胞减少淋巴细胞减少淋巴细胞增多淋巴细胞增多单核细胞增多单核细胞增多嗜酸细胞增多嗜酸细胞增多嗜碱细胞增多嗜碱细胞增多白细胞总数减少白细胞总数减少

18、白细胞总数增多白细胞总数增多出现有核红细胞出现有核红细胞DIFF/BASODIFF/BASO散点图散点图NRBCNRBC散点图散点图NEUT# 1.00 x 109/L (or % setting)NEUT# 11.00 x 109/L (or % setting)NEUT# 11.00 x 109/L (or % setting)LYMPH# 0.80 x 109/L (or % setting)LYMPH# 4.00 x 109/L (or % setting)LYMPH# 4.00 x 109/L (or % setting)MONO# 1.00 x 109/L (or % settin

19、g)MONO# 1.00 x 109/L (or % setting)EO# 0.70 x 109/L (or % setting)EO# 0.70 x 109/L (or % setting)BASO# 0.20 x109/L (or % setting)BASO# 0.20 x109/L (or % setting)WBC 2.50 x109/LWBC 18.00 x 109/LWBC 18.00 x 109/LNRBC% 2%NRBC% 2%Ne/EoLy/Ne 2Lym/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/Eo白细胞散点图异常白细胞散点图异常细胞族群之

20、间边界不清细胞族群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则边界颗粒达到一定数量触发规则Gst/NLMEGst/NLMEBas/NLMEBas/NLMENLME:NLME:不包括不包括BASOBASOn有核红细胞散点图异常NRBCNRBCWBCWBCGOST1GOST1Plt clumpsPlt clumps细胞族群之间边界不清细胞族群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则边界颗粒达到一定数量触发规则nIPIP信息解释信息解释 n白细胞白细胞报警项目报警项目中文中文信息来源信息来源Blasts?Immature Gran?Left Shift?Atypical Lympho?Abn Lymph

21、o/L-Blasts?NRBC?RBC Lyse resistance?原始细胞？原始细胞？幼稚粒细胞？幼稚粒细胞？核左移？核左移？异型淋巴细胞？异型淋巴细胞？异常淋巴异常淋巴/原始淋巴细胞？原始淋巴细胞？有核红细胞？有核红细胞？红细胞溶解不全？红细胞溶解不全？DIFF,IMI 散点图散点图DIFF,IMI 散点图散点图DIFF,IMI 散点图散点图DIFF,IMI 散点图散点图DIFF,IMI 散点图散点图DIFF 散点图散点图DIFF,WBC/BASO散点图散点图n原始细胞？原始细胞？n触发规则：触发规则：n在散点图上特定的区域，散点达到一定在散点图上特定的区域，散点达到一定数量。数量。原

22、始细胞原始细胞中幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞原始细胞杆核杆核n幼稚粒细胞？幼稚粒细胞？n触发规则：触发规则：n在散点图上特定的区域，散点达到一定数量。在散点图上特定的区域，散点达到一定数量。幼稚粒细胞幼稚粒细胞中幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞原始细胞杆核杆核n核左移？核左移？n触发规则：触发规则：n在散点图上特定的区域，散点达到一定数量在散点图上特定的区域，散点达到一定数量杆杆核核中幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞原始细胞杆核杆核n异型淋巴细胞？异型淋巴细胞？n触发规则：触发规则：n 在

23、在DIFFDIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数量散点图上特定的区域，散点达到一定数量 andandn 在在IMIIMI通道通道IGIG和和BLASTBLAST区域无散点区域无散点异型淋巴细异型淋巴细胞胞中幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞原始细胞杆核杆核n异常淋巴异常淋巴/ /原始淋巴细胞？原始淋巴细胞？n触发规则：触发规则：n 在在DIFFDIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数量散点图上特定的区域，散点达到一定数量 and and 在在IMIIMI通道通道IGIG和和BLASTBLAST区域无散点区域无散点异常淋异常淋巴巴中幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细

24、胞晚幼粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞原始细胞杆核杆核n有核红细胞？有核红细胞？n触发规则：触发规则：n 在在DIFFDIFF散点图散点图上特定的区域，上特定的区域，散点达到一定数散点达到一定数量量有核红细有核红细胞胞n红细胞溶解不全？红细胞溶解不全？n触发规则：触发规则：n 在在DIFFDIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数散点图上特定的区域，散点达到一定数量量 oror WBC-BASO /WBC-DIFF WBC-BASO /WBC-DIFF比例大于阈值比例大于阈值难溶红细难溶红细胞胞WBC-WBC-BASOBASOWBC-DIFFWBC-DIFFIP信息解释信息解释 红细胞红细胞

25、报警项目报警项目中文中文信息来源信息来源RBC Abn DistributionDimorphic PopulationRET Abn ScattergramReticulocytosisAnisocytosisMicrocytosisMacrocytosisHypochromiaAnemiaErythrocytosis红细胞分布异常红细胞分布异常双峰双峰网织红细胞散点图异常网织红细胞散点图异常网织红细胞增多网织红细胞增多红细胞大小不均红细胞大小不均小红细胞症小红细胞症巨红细胞症巨红细胞症血红蛋白减少血红蛋白减少贫血贫血红细胞增多红细胞增多红细胞直方图红细胞直方图红细胞直方图红细胞直方图RET

26、 散点图散点图RET% 0.05 or RET# 200 x 109/LRDW-SD 65fL or RDW-CV 0.20MCV 110fLMCHC 290g/LHGB 6.50 x 1012/L红细胞分布异常红细胞分布异常n触发规则：触发规则：n RL (%) 10 % or RU (%) 5 % or RDW-SD 无法无法计算计算 or 多峰多峰 or RU 50 x109/L双峰双峰n触发规则：触发规则：n 红细胞直方图不止出现一个峰红细胞直方图不止出现一个峰 RBC100200250 fl100 %5 %RLRU100200 250 fl100 %20 %RLRUS L网织红细胞散

27、点图异常网织红细胞散点图异常n触发规则：触发规则：n RET_UPPRET_UPP区域，散点区域，散点达到一定数量达到一定数量 ororn RET_THR-H RET_THR-H区域，散区域，散点达到一定数量点达到一定数量UPP交界区域交界区域有核红细胞有核红细胞nIP信息解释信息解释 n n红细胞红细胞报警项目报警项目中文中文信息来源信息来源RBC Agglutination?Turbidity/HGB Interference?Iron Deficiency?HGB Defect?Fragments?红细胞聚集红细胞聚集?脂血干扰血红蛋白脂血干扰血红蛋白?缺铁缺铁?血红蛋白减低血红蛋白减低

28、?红细胞碎片红细胞碎片?MCHC、MCH、RBC直方图直方图MCHC 365g/LMCHC,MCV,RDW-CVRDW-CV15% & MCV 40.0g/dL & MCH 40pg & RBC 40.0g/dL & MCH 40pg & RU% 4%缺铁缺铁? ?n触发规则：触发规则：n MCHC 31.0g/dL & MCHC 31.0g/dL & MCV 75fl & RDW-CV MCV 15,0% 15,0%*红细胞碎片红细胞碎片?n触发规则：触发规则：n 综合综合RDW-SD、PU、RU、MCHC、MCV orn RE

29、T散点图特定区域散点达到一定的数量散点图特定区域散点达到一定的数量PLT_DCPLT_DCRBC_DCRBC_DC红细胞碎片红细胞碎片100%100%100%100%PUPUPUPUnIP信息解释信息解释 n n血小板血小板 +报警项目报警项目中文中文信息来源信息来源PLT Abn ScattergramPLT Abn DistributionThrombocytopeniaThrombocytosisPLT Clumps?PLT Clumps (S)?血小板散点异常？血小板散点异常？血小板直方图异常血小板直方图异常?血小板减少血小板减少?血小板增加血小板增加?血小板聚集血小板聚集?血小板聚集

30、血小板聚集(S)？RET 散点图散点图血小板直方图以及参数血小板直方图以及参数PLT 600 x 109/LDIFF、IMI 散点图散点图血小板直方图及参数血小板直方图及参数血小板散点异常？血小板散点异常？n触发规则：触发规则：n在在RETRET散点图上特定的区域，散点达到一定数量散点图上特定的区域，散点达到一定数量白细胞碎片白细胞碎片血小板直方图异常血小板直方图异常?n触发规则：触发规则：n P-LCR 45% & MPV 13fl & PU 24fl orn PU 20% orn PL (%) 10 % or PU (%) 40 % or PDW-SD 无法计算无法计算 or PDW 20fl or RL(%) 9%PLPU100 %20 %10 fl20 fl30 fl40 fl12 fl血小板聚集血小板聚集?n触发规则：触发规则：n 在散点图上特定的区域，散点达到一定数量在散点图