抑制amyloid小分子分析

1、Ferulic acid(阿魏酸)作用：阿魏酸可以抑制纤维的形成，也可以使成熟的纤维不稳定分析：1.阿魏酸的A部分是姜黄素的代谢产物 2.阿魏酸紧致的结构可以和游离的A结合，抑制A的 纤维化，阻止纤维的形成。 3.阿魏酸可以特定的结合在成熟的纤维上，使-sheet的结构不稳定1ACurcumin1.Ono K, Hirohata M, Yamada M. Ferulic acid destabilizes preformed -amyloid fibrils in vitroJ. Biochemical and biophysical research communications, 2005

2、, 336(2): 444-449.实验部分荧光分析：结果：FA可以抑制纤维的生成结果：1.50um的FA共同培养1h，有很多短的，细的纤维生成2.培养6h后，纤维明显减少，生成了无规则聚集MD研究Antonella Sgarbossa 2实验小组做了100ns的研究研究结果分析:1.FA分子可以覆盖在成熟纤维结构的表面，之后将羧基和羟基部分插在寡肽的链间，靠近Asp23-Lys28区域（ Asp23-Lys28之间形成盐桥可以强有力的稳定原纤维的结构），2. FA可以和Asp23-Lys28相互作用，它的羧基部分靠近Lys的正电部分，这种相互作用代替了Asp的作用，扰乱了原有的稳定结构，使得

3、链打开，纤维裂解。2.Sgarbossa A, Monti S, Lenci F, et al. The effects of ferulic acid on -amyloid fibrillar structures investigated through experimental and computational techniquesJ. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects, 2013, 1830(4): 2924-2937.FA的衍生物31-feruloyl diglycerol1-feruloyl glycero

4、l对这两个化合物和FA进行了荧光实验，染色实验，细胞毒性试验来比较3.Tsai F S, Wu L Y, Yang S E, et al. Ferulic Acid Reverses the Cognitive Dysfunction Caused by Amyloid Peptide 1-40 Through Anti-Oxidant Activity and Cholinergic Activation in RatsJ. The American journal of Chinese medicine, 2015, 43(02): 319-335.结果：FA的衍生物既可以抑制纤维的生成，

5、也可以对成熟的纤维产生减稳作用。多酚类和吲哚类4吲哚类和多酚类化合物可以抑制纤维的聚集，同时可以促进纤维的裂解成为无规则聚集4.Ghobeh M, Ahmadian S, Meratan A A, et al. Interaction of A (2535) fibrillation products with mitochondria: Effect of small molecule natural productsJ. Peptide Science, 2014, 102(6): 473-486.实验部分实验一：将两类化合物分别和A（25-35）单体培养3周监测二级结构的含量分析方法：圆

6、二色谱分析法实验二将两类化合物分别和A（25-35）纤维培养3周监测二级结构的含量分析方法：圆二色谱分析法AFM分析：电子显微镜下观察单体和两类化合物的培养3周后的形态图10um 25um 50umalone100um IAA-4周25um 50um 100umbiochanin A 和quercetin 培养3周纤维消失，形成小的无规则卷曲I3C无纤维生成IAA在培养了4周后无纤维为生成电子显微镜下观察纤维和两类化合物的培养3周后的形态图alone10um 25um 50um25um 50um 100um结果分析1.多酚类只结合在-sheet上，抑制纤维的伸长阶段2.吲哚类可能结合在单体上或

7、低聚物上，在纤维生成的早期阶段，发挥作用。3.吲哚类和多酚类和A 都可以形成氢键，和-相互作用4.吲哚类分子更小，易结合在活性口袋，吲哚核可以减弱A 斑块在小鼠脑内的聚集迷迭香酸5作用：可以抑制纤维的聚集，对已成熟的hen egg white lysozyme (HEWL)纤维产生减稳作用实验部分：将RA和HEWL/ HEWL纤维培养5.Shariatizi S, Meratan A A, Ghasemi A, et al. Inhibition of amyloid fibrillation and cytotoxicity of lysozyme fibrillation products by polyphenolsJ. International journal of biological macromolecules, 2015, 80: 95-106.分析：1.RA芳香性、疏水作用可以扰乱HEWL分子间作用从而抑制纤维的生成，减少毒性2.HEWL结构的发生重排，使疏水区域暴露，有利于RA的作用3.RA和HEWL作用，延长了HEWL纤维化的lag time,改变了表面的结构，是HEWL的聚集向着没有毒性，无序的方向进行4.RA与HE