病原生物与免疫学实验免疫学探索性实验

1、( (病原生物与免疫学实病原生物与免疫学实验验) )免疫学探索性实验免疫学探索性实验Learning to learn, learning by doingI hear and I forgetI read (see) and I rememberI do and I understand荀子儒效:不闻不若闻之，闻之不若见之，见之不若知之，知之不若行之。学至于行之而止矣。观察、学习、思考、行动观察、学习、思考、行动2013年十大科技突破年十大科技突破癌症免疫疗法癌症免疫疗法大众基因显微手术大众基因显微手术脑成像技术脑成像技术人体胚胎克隆人体胚胎克隆迷你器官迷你器官宇宙射线的来源宇宙射线的来源太

2、阳能新星太阳能新星为什么睡觉为什么睡觉微生物与健康微生物与健康疫苗设计疫苗设计人造探测器首次登陆彗星人造探测器首次登陆彗星被选为本年度最重要的科学突破。 从恐龙到鸟的转变从恐龙到鸟的转变年轻血液有年轻血液有“返老还童返老还童”功效功效：血液中一种叫GDF 11的蛋白机器人机器人“自主自主”合作合作仿人脑芯片仿人脑芯片可治糖尿病的细胞：可治糖尿病的细胞：实验室中培养出酷似细胞的细胞。印尼洞穴艺术印尼洞穴艺术操纵记忆操纵记忆：研究人员利用光遗传学技术操纵小鼠的特定记忆，如删除记忆或植入虚假记忆。立方体卫星：立方体卫星：这种长宽高均为10厘米的廉价微型卫星在2014年真正获得成功生命基因密码生命基因

3、密码“添丁添丁”：自然界的DNA（脱氧核糖核酸）只有种碱基：G、T、C和A，但科学家设计制造的一种大肠杆菌的DNA添两个成员：X和Y。 2014年十大科技突破年十大科技突破癌症免疫疗法癌症免疫疗法今年6月，研究人员报告，结合使用伊匹单抗（即抗CTLA-4）和抗PD-1令1/3的黑色素瘤患者出现“深层和快速的肿瘤消退”。2011年，美国食品和药品管理局批准了百时美施贵宝针对转移性黑素瘤的伊匹单抗治疗。2012年，霍普金斯大学的Suzanne Topalian、耶鲁大学的Mario Sznol和同事报告了在近300名患者中使用抗PD-1疗法的结果，其中31%黑色素瘤患者、29%肾癌患者和17%肺癌

4、患者的肿瘤萎缩了一半或更多。2013年，据百时美施贵宝报告称，在1800名使用伊匹单抗治疗的黑色素瘤患者中，22%的人在3年后仍存活。 什么是科学研究？科学研究的基本任务就是探索、认识未知。我国国家教育部定义是：科学研究是指为了增进知识包括关于人类文化和社会的知识以及利用这些知识去发明新的技术而进行的系统的创造性工作。美国资源委员会对科学研究的定义是：科学研究工作是科学领域中的检索和应用，包括对已有知识的整理、统计以及对数据的搜集、编辑和分析研究工作。The observation, identification, description, experimental investigation

5、, and theoretical explanation of phenomena. 科学研究程序及实施科学研究程序及实施（一）科研课题设计（一）科研课题设计（二（二) ) 科研课题实施科研课题实施 ( (三）实验记录和原始实验数据保存三）实验记录和原始实验数据保存（四）资料分析与论文撰写（四）资料分析与论文撰写科研课题设计科研课题设计 1.1.文献调研文献调研 * * 收集和学习国内外相关进展收集和学习国内外相关进展 * * 注意：创新点及条件、方法注意：创新点及条件、方法 2. 2. 确定研究目标确定研究目标 * * 根据拟解决的关键问题，选择和准备实验对象、仪器、材料等根据拟解决的关键

6、问题，选择和准备实验对象、仪器、材料等 * * 注意：创新性、现有条件、可行性、伦理学注意：创新性、现有条件、可行性、伦理学 3. 3. 制定科研计划制定科研计划 * * 实验方案（处理因素、观察指标、实验对象、实验条件等）；实验方案（处理因素、观察指标、实验对象、实验条件等）； 记录项目和格式；人员分工记录项目和格式；人员分工 * * 注意：合理、具体、明确、可操作、符合统计学原则注意：合理、具体、明确、可操作、符合统计学原则 4. 4. 预实验预实验 * * 校正仪器，摸索实验方法，优化实验条件校正仪器，摸索实验方法，优化实验条件 * * 注意：保持仪器良好状态，尽可能确定最佳实验条件注意

7、：保持仪器良好状态，尽可能确定最佳实验条件 5. 5. 正式实验正式实验 完善观察和记录格式，严格按规范进行完善观察和记录格式，严格按规范进行科研课题实施科研课题实施 1. 1. 课题实施原则课题实施原则 * * 设计实验方案及技术路线设计实验方案及技术路线 * * 确定可靠稳定的实验操作方法确定可靠稳定的实验操作方法 * * 精确准备实验材料精确准备实验材料 * * 实验分组实验分组( (设立对照设立对照) )，排除非实验因素干扰，排除非实验因素干扰 2. 2. 确定实验条件确定实验条件 * * 制订实验操作流程制订实验操作流程 * * 规范操作技巧规范操作技巧 * * 落实实验材料来源落实

8、实验材料来源 * * 控制主观误差控制主观误差 实验记录和原始实验数据保存实验记录和原始实验数据保存 1. 1. 实验记录的内容实验记录的内容 实验名称、实验目的、实验方案（框架式实验方实验名称、实验目的、实验方案（框架式实验方案及实验操作方案）、实验过程、实验结果及分析、实案及实验操作方案）、实验过程、实验结果及分析、实验记录的规范和保存验记录的规范和保存 2.2.实验小结实验小结 实验数据整理和分析、资料解释与科研结论实验数据整理和分析、资料解释与科研结论 资料分析与论文撰写资料分析与论文撰写 1. 1. 资料统计与整理资料统计与整理 2. 2. 实验结果判定实验结果判定 3. 3. 科研

9、结论科研结论 4. 4. 论文撰写论文撰写 5. 5. 论文投送论文投送科学问题的提出科学问题的提出研究对象的选择研究对象的选择研究内容的选择（针对性）研究内容的选择（针对性）技术路线的选择技术路线的选择技术方法的选择技术方法的选择技术方法的建立技术方法的建立实验结果的产生实验结果的产生1.实验结果的总结和分析实验结果的总结和分析 选题的基本过程选题的方法国家科研项目指南国家科研项目指南临床实践临床实践理论研究和学术争论理论研究和学术争论 文献启发文献启发 科学领域空白点科学领域空白点 原有课题延伸、深入原有课题延伸、深入 交叉学科的科学问题交叉学科的科学问题 发现和提出问题发现和提出问题 任

10、何科学研究都是从发现和提出问题开始的。任何科学研究都是从发现和提出问题开始的。“问题问题”是科研活动的起点是科研活动的起点。提出问题选择并确。提出问题选择并确立研究题目，就是科学研究的第一步，也是科研立研究题目，就是科学研究的第一步，也是科研成败的关键。只有题目选得好，才有可能出成果。成败的关键。只有题目选得好，才有可能出成果。正确的提出问题等于解决了问题的一半。正确的提出问题等于解决了问题的一半。因此，因此，科研选题必须具有明确的目的性，充分的科学性科研选题必须具有明确的目的性，充分的科学性和先进性以及现实的可行性。和先进性以及现实的可行性。 提出一个问题，往往提出一个问题，往往比解决一个问

11、题更重要，因比解决一个问题更重要，因为解决问题也许仅是一个数为解决问题也许仅是一个数学上或实验上的技能而已，学上或实验上的技能而已，而提出新的问题、新的可能而提出新的问题、新的可能性、从新的角度看旧的问题，性、从新的角度看旧的问题，则需要创造性的想象力，而则需要创造性的想象力，而且标志着科学的真正进步。且标志着科学的真正进步。只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发现。只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发现。在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑（巴斯德）。在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑（巴斯德）。法国生物学家、化学家、微生物学的奠基人巴斯德（法国生物学家、

12、化学家、微生物学的奠基人巴斯德（Louis Pasteur,1822-1895）在实验室里）在实验室里有心人有心人-初始意念初始意念( (局限的、粗浅的）局限的、粗浅的）-“火花火花”。 “火花火花”的出现是跳跃的、瞬间的，但思想上的积的出现是跳跃的、瞬间的，但思想上的积累和孕育过程是长期的。累和孕育过程是长期的。从偶然性机遇中发现必然性规律从偶然性机遇中发现必然性规律-机遇理性法。机遇理性法。偶然性是必然性的反映和表现，必然偶然性是必然性的反映和表现，必然性是偶然性的最终结果。性是偶然性的最终结果。 初始意念初始意念 要善于在观察中发现问题要善于在观察中发现问题（弗莱明，（弗莱明，19281

13、928年，年，penicillinpenicillin） 要在怀疑中提出问题（要在怀疑中提出问题（哥白尼，哥白尼，15291529年，日心说）年，日心说） 要在灵感中提出假想（阿基米德要在灵感中提出假想（阿基米德, ,公元前公元前240240年，浮年，浮力）力） 要在幻想中提出创意要在幻想中提出创意( (达达. .芬奇，芬奇，18861886年年, ,汽车）汽车） 要在实践工作中提出思路要在实践工作中提出思路（柯马克，（柯马克，19571957年，年，CTCT）1928年，英国科学家弗莱明和他年，英国科学家弗莱明和他当年发现青霉素的培养皿。当年发现青霉素的培养皿。1945年获诺贝尔奖年获诺贝尔

14、奖要善于在观察中发现问题要善于在观察中发现问题（弗莱明，（弗莱明，1928年，年，penicillin） 19531953年，沃森和克里克发现了年，沃森和克里克发现了DNADNA分子分子双螺旋结构。双螺旋结构。19621962年获诺贝尔奖年获诺贝尔奖 1900 1900年年奥地利生理学家兰德斯坦纳等发现了人类的奥地利生理学家兰德斯坦纳等发现了人类的 ABO ABO 血型系统血型系统 19281928年年英国微生物学家弗莱明发现青霉素英国微生物学家弗莱明发现青霉素 19361936年年前苏联首次成功进行肾移植前苏联首次成功进行肾移植 19531953年年美国生物学家沃森和英国物理学家克里克首次确

15、美国生物学家沃森和英国物理学家克里克首次确定人类定人类DNADNA双螺旋立体结构双螺旋立体结构 19531953年年塞尔得格应用自制的器械成功地进行了动脉血管塞尔得格应用自制的器械成功地进行了动脉血管造影；造影；19561956年年DedmanDedman等又成功地完成了选择性腹等又成功地完成了选择性腹 腔动脉和肠系膜上动脉造影腔动脉和肠系膜上动脉造影 1978 1978年年7 7月月2525日日，世界上第一名，世界上第一名“试管婴儿试管婴儿”路易路易布布朗在英国诞生朗在英国诞生 2020世纪世纪7070年代年代柯马克和纽博尔德洪兹菲尔德发明了电柯马克和纽博尔德洪兹菲尔德发明了电子计算机子计算

16、机X X线断层显像技术（线断层显像技术（CTCT），）， 8080年代又出现了磁共年代又出现了磁共振显像技术（振显像技术（MRIMRI） 19871987年年法国医生莫瑞特首先利用膀胱镜完成了世界上法国医生莫瑞特首先利用膀胱镜完成了世界上第一例内镜下胆囊手术第一例内镜下胆囊手术 19961996年年7 7月月英国爱丁堡卢斯林研究所培育出人类历史上英国爱丁堡卢斯林研究所培育出人类历史上第一个克隆绵羊第一个克隆绵羊“多利多利” 19991999年年1212月月1 1日日，英、美、日、加、法、中等国共同完，英、美、日、加、法、中等国共同完成人类基因组工作草图的绘制成人类基因组工作草图的绘制 第一个试

17、管婴儿第一个试管婴儿路丝路丝布朗布朗19781978年年7 7月月2525日于英国诞生日于英国诞生 19971997年英国罗斯林研究所年英国罗斯林研究所维尔穆特宣布第一只克隆维尔穆特宣布第一只克隆羊羊多莉诞生多莉诞生 只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发现。现。在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑（巴（巴斯德）。斯德）。 发现或提出问题的条件是：发现或提出问题的条件是： 1勤动手勤动手 2善观察善观察 3勤动脑勤动脑 4具有丰富的知识具有丰富的知识每项实验必须合理组织三项实验要素：每项实

18、验必须合理组织三项实验要素：1.试验对象试验对象2.处理因素处理因素3.试验效应试验效应 哪种动物的生理或病理特性与研究目标和要求哪种动物的生理或病理特性与研究目标和要求最为吻合最为吻合针对人类某种特性的研究，要根据哪种动物的针对人类某种特性的研究，要根据哪种动物的特征与人类这种特性最为吻合特征与人类这种特性最为吻合制作病理模型，哪种动物最容易成功制作病理模型，哪种动物最容易成功改变遗传性状的研究要根据动物生殖周期的长改变遗传性状的研究要根据动物生殖周期的长短短动物繁育和饲养的方便程度及价格因素动物繁育和饲养的方便程度及价格因素实验动物的选择单一因素单一水平单一因素单一水平（主要用于人）（主要

19、用于人）组组 别别 目目 的的处理组处理组 施加处理因素，观察处理引起施加处理因素，观察处理引起 的变化的变化对照组对照组 不加处理，其它条件一致，以不加处理，其它条件一致，以 排除条件因素引起的变化排除条件因素引起的变化两种因素单一水平两种因素单一水平 处理因素处理因素A A：诱导脑缺血；诱导脑缺血；处理因素处理因素B B：低温（低温（3232）处理。）处理。两种因素两种因素（模型、药物）（模型、药物）和药物的五种水平和药物的五种水平组组 别别 目目 的的 处理组处理组0、5、10、 观察不同药物剂量对脑缺血的影响观察不同药物剂量对脑缺血的影响20、50 mg/kg 对照组对照组0、5、10

20、、 观察药物对假手术动物的作用，排除药物观察药物对假手术动物的作用，排除药物20、50 mg/kg 本身对动物生理功能的影响本身对动物生理功能的影响只有少量的对照组的情况，各种对照应当都在实只有少量的对照组的情况，各种对照应当都在实验中采用；验中采用；如对照组数量多，可以精简其中一些组别，但如对照组数量多，可以精简其中一些组别，但是应当有充足的理由。是应当有充足的理由。如前期研究、预实验或文献中已经证明某些组如前期研究、预实验或文献中已经证明某些组别无特殊效应，可以考虑精简。别无特殊效应，可以考虑精简。对各种理论上应当设置的对照，必须加以考虑，对各种理论上应当设置的对照，必须加以考虑，不能无故

21、忽略！不能无故忽略！主要实验组别与相应的对照组，应当在同主要实验组别与相应的对照组，应当在同一时间和同一批次实验中交叉、平行进一时间和同一批次实验中交叉、平行进行。行。不同组别的实验，如将其中一个实验组不同组别的实验，如将其中一个实验组在同一时间和同一批次进行，其他组别在同一时间和同一批次进行，其他组别在另外的时间和批次进行，会产生较大在另外的时间和批次进行，会产生较大实验误差，应当严加避免。实验误差，应当严加避免。举例：举例：研究目的：研究目的：阐明阐明A分子在肺癌中的作用及有关机制分子在肺癌中的作用及有关机制处理因素：处理因素：不同肺癌模型不同肺癌模型（与哪种类型肺癌有关）（与哪种类型肺癌

22、有关） 不同病变时间不同病变时间（变化的时间过程）（变化的时间过程）试验对象：试验对象：不同动物不同动物（发生在哪类对象）（发生在哪类对象）试验效应：试验效应：不同检测手段不同检测手段（mRNA、蛋白等）、蛋白等） 不同分子检测不同分子检测（对（对A分子有无特异性）分子有无特异性） 不同功能检测不同功能检测（与哪类功能相关）（与哪类功能相关） 举例：举例：研究目的：研究目的：阐明阐明A药体外抗肿瘤的作用及有关机制药体外抗肿瘤的作用及有关机制处理因素处理因素1：不同肿瘤系不同肿瘤系（保护哪类肿瘤）（保护哪类肿瘤）处理因素处理因素2：不同药物不同药物（是否为该药特定作用）（是否为该药特定作用） 浓

23、度浓度（效应定量，浓度依赖特征）（效应定量，浓度依赖特征） 时间时间（时间依赖特征）（时间依赖特征）试验对象：试验对象： 肿瘤细胞肿瘤细胞试验效应：试验效应： 不同指标不同指标（对不同功能的影响）（对不同功能的影响）对照对照 控制试验条件控制试验条件随机随机 分组的客观化分组的客观化 减少抽样误差减少抽样误差重复重复 样本数及重复次数样本数及重复次数 提高可靠性提高可靠性盲法盲法 降低人为主观因素的干扰降低人为主观因素的干扰一、对照一、对照 1、基础条件的对照、基础条件的对照正常对照或阴性对照，正常对照或阴性对照，操作条件对照（如假手术）操作条件对照（如假手术） 2、经典处理的对照、经典处理的

24、对照阳性对照阳性对照二、随机二、随机 1、单纯随机法（随机数字表）、单纯随机法（随机数字表） 2、均衡随机（分层随机）、均衡随机（分层随机） 3、均衡顺序随机、均衡顺序随机 三、重复三、重复同一试验的重复次数（样本量）；同一时间地同一试验的重复次数（样本量）；同一时间地点的多次重复点的多次重复（1）如处理组与对照组的反应差别较大，可）如处理组与对照组的反应差别较大，可使所需的样本量减少；反之，若两者差别不大，使所需的样本量减少；反之，若两者差别不大，单靠增加样本量是不现实的，还应从专业角度单靠增加样本量是不现实的，还应从专业角度考虑这种微小的差别是否有现实意义。考虑这种微小的差别是否有现实意义

25、。（2）试验手段、仪器设备越精密，所需样本）试验手段、仪器设备越精密，所需样本量可减少。量可减少。在试验中设计中应尽量注意仪器在试验中设计中应尽量注意仪器的校正、操作的规范化、指标的统一等，以的校正、操作的规范化、指标的统一等，以提高试验质量。提高试验质量。3）从统计学角度看，要提高试验效率应注）从统计学角度看，要提高试验效率应注意以下几点：意以下几点：两组样本量相等，试验效率提高，可用较少两组样本量相等，试验效率提高，可用较少的样本量取得显著的结论；的样本量取得显著的结论；定量指标数据的试验效率高于定性指标数据，定量指标数据的试验效率高于定性指标数据，故尽量将采用定量指标以提高试验效率；故尽

26、量将采用定量指标以提高试验效率；自身对照试验或配对试验可减少个体差异，自身对照试验或配对试验可减少个体差异，提高试验效率，但应注意配对是否合理、前后提高试验效率，但应注意配对是否合理、前后两次测量值有无自然差异等。两次测量值有无自然差异等。四、盲法四、盲法单盲法单盲法 研究对象不知道自己所在的分组和所接受的研究对象不知道自己所在的分组和所接受的处理，但观察者和资料收集分析者知道处理，但观察者和资料收集分析者知道 ；双盲法双盲法 研究对象和观察者都不知道分组情况，也不研究对象和观察者都不知道分组情况，也不知道研究对象接受的处理措施；知道研究对象接受的处理措施；三盲法和多盲法三盲法和多盲法 研究对

27、象、观察者和资料整理分析研究对象、观察者和资料整理分析者均不知道研究对象分组和处理情况，只有研究者委者均不知道研究对象分组和处理情况，只有研究者委托的人员或药物的制造者知道，直到试验结束时才公托的人员或药物的制造者知道，直到试验结束时才公布分组和处理情况。布分组和处理情况。 1、环境条件的控制、环境条件的控制2、生理条件的控制、生理条件的控制3、试验条件的控制、试验条件的控制 4、操作人员因素的控制、操作人员因素的控制5、条件的前后一致、条件的前后一致6、控制试验误差、控制试验误差（三）研究条件控制（三）研究条件控制1、环境条件的控制、环境条件的控制需要保持环境有适宜的气温和湿度、安静、相似需

28、要保持环境有适宜的气温和湿度、安静、相似的季节和昼夜时刻、无其他不良刺激等。对动物的季节和昼夜时刻、无其他不良刺激等。对动物试验应当作更加严格的条件控制。试验应当作更加严格的条件控制。由于有些试验动物生理过程的昼夜节律与人不同，由于有些试验动物生理过程的昼夜节律与人不同，如啮齿类动物（大鼠、小鼠等）是夜行性动物，如啮齿类动物（大鼠、小鼠等）是夜行性动物，其活动期在夜晚，静息期在白天，因此，用这些其活动期在夜晚，静息期在白天，因此，用这些动物试验时，要选择适当和相同的昼夜时刻，并动物试验时，要选择适当和相同的昼夜时刻，并注意给动物保持光照和黑暗的时间。注意给动物保持光照和黑暗的时间。2、生理条件

29、的控制、生理条件的控制受试对象的种族、性别、年龄、营养状况、遗传特征、各受试对象的种族、性别、年龄、营养状况、遗传特征、各种生理功能状况等。种生理功能状况等。在动物试验中，诸如血糖、血在动物试验中，诸如血糖、血O2分压、血分压、血CO2分压、血及分压、血及其他体液的其他体液的pH、体温等生理因素。、体温等生理因素。试验动物还应注意有无有关病原体（病毒、细菌、寄生虫试验动物还应注意有无有关病原体（病毒、细菌、寄生虫等）感染。等）感染。对动物实施麻醉，应当注意麻醉深度以及麻醉造成的生理对动物实施麻醉，应当注意麻醉深度以及麻醉造成的生理功能改变，如体温降低、血压下降、心率加快等。功能改变，如体温降低

30、、血压下降、心率加快等。3、试验条件的控制、试验条件的控制 受试对象受试对象 仪器设备仪器设备 试剂材料试剂材料 试验实施条件试验实施条件 操作规程（操作规程（SOP）等）等（1）受试者或动物受试者或动物 应当按要求选择和随机应当按要求选择和随机分组，保证各组的基本条件基本一致，保持分组，保证各组的基本条件基本一致，保持可比性。可比性。（2）仪器设备仪器设备 仪器设备的精确性、稳定性、仪器设备的精确性、稳定性、可靠性都应符合试验要求，并且定期或试验可靠性都应符合试验要求，并且定期或试验前加以校正；还要规范操作方法，以保证定前加以校正；还要规范操作方法，以保证定量的准确。量的准确。（3）试剂材料

31、试剂材料 各种药物、试剂、细胞株、其他材料等，各种药物、试剂、细胞株、其他材料等，应当符合试验要求，都要贴标签注明名称、应当符合试验要求，都要贴标签注明名称、含量、来源、批号、日期、试验人员姓名等，含量、来源、批号、日期、试验人员姓名等，防止发生差错；必要时对其稳定性、含量、防止发生差错；必要时对其稳定性、含量、活性进行检测，保证试验的可靠性。活性进行检测，保证试验的可靠性。（4）试验条件试验条件 应当事先确定各组条件，并应当事先确定各组条件，并严格按同一标准执行。严格按同一标准执行。（5）操作规程操作规程 设计时应当制订切实可行，设计时应当制订切实可行，并 且 能 保 证 试 验 质 量 的

32、 标 准 操 作 规 程并 且 能 保 证 试 验 质 量 的 标 准 操 作 规 程（SOP），并在实施规程中严格掌握。），并在实施规程中严格掌握。4、操作人员因素的控制、操作人员因素的控制各种试验都是由研究人员来操作的，每个人员对各种试验都是由研究人员来操作的，每个人员对各种条件和标准的掌握有不同程度的差异，这就各种条件和标准的掌握有不同程度的差异，这就会影响结果的准确性和一致性，造成较大的误差，会影响结果的准确性和一致性，造成较大的误差，因此，要对人员操作因素加以控制。因此，要对人员操作因素加以控制。除了事先要统一执行标准的具体做法外，为了避除了事先要统一执行标准的具体做法外，为了避免主

33、观因素的干扰，采用盲法是一个有效的方法。免主观因素的干扰，采用盲法是一个有效的方法。临床研究可采用临床研究可采用双盲法双盲法，即受试者和研究者（包，即受试者和研究者（包括数据分析人员）都不知道试验分组情况，因此括数据分析人员）都不知道试验分组情况，因此受试者的反应和研究者的评判都较为客观。受试者的反应和研究者的评判都较为客观。基础研究中，对一些容易受主观因素影响的定性基础研究中，对一些容易受主观因素影响的定性或半定量指标，如动物行为学观察、病理切片观或半定量指标，如动物行为学观察、病理切片观察等，应当实行察等，应当实行单盲法单盲法，即负责观察的人员不知，即负责观察的人员不知道处理方法和试验分组

34、，而按照规定的标准进行道处理方法和试验分组，而按照规定的标准进行观察，这样可以在很大程度上避免主观因素造成观察，这样可以在很大程度上避免主观因素造成的偏差，使试验结果较为客观可信。的偏差，使试验结果较为客观可信。5、条件的前后一致、条件的前后一致研究的各种条件，如受试对象的基本特点、动物研究的各种条件，如受试对象的基本特点、动物及其品系、采用的仪器设备、各种试剂和材料、及其品系、采用的仪器设备、各种试剂和材料、试验环境（温度、湿度、光照、噪声等）、试验试验环境（温度、湿度、光照、噪声等）、试验方法、操作过程、采用的观察指标等，应当在设方法、操作过程、采用的观察指标等，应当在设计时确定，研究全过

35、程都要按照统一标准进行，计时确定，研究全过程都要按照统一标准进行，中途改变条件会使试验结果前后难以比较，导致中途改变条件会使试验结果前后难以比较，导致返工等问题。返工等问题。6、控制试验误差、控制试验误差 随机误差（不可避免）随机误差（不可避免） 系统误差（注意纠正）系统误差（注意纠正） 人为误差（应当克服）人为误差（应当克服）1、规范化、规范化 2、记录内容及要求、记录内容及要求1、规范化、规范化 事先规定格式和内容事先规定格式和内容 培养严谨的习惯培养严谨的习惯 加强管理加强管理2、记录内容及要求、记录内容及要求（1）在记录本或记录表中，记录试验日期、）在记录本或记录表中，记录试验日期、试

36、验场所当天的室温及湿度（必要时）、记试验场所当天的室温及湿度（必要时）、记录者签名、审核者签名（必要时）。录者签名、审核者签名（必要时）。（2）按照实验方案逐日对每一试验对象进）按照实验方案逐日对每一试验对象进行观察和记录，注意对象的编号与记录一致。行观察和记录，注意对象的编号与记录一致。（3）临床试验中发现受试者出现不良事件，）临床试验中发现受试者出现不良事件，应及时记录，并作妥善的处理；动物试验中，应及时记录，并作妥善的处理；动物试验中，发现濒死或者已死动物，要作记录和适当处发现濒死或者已死动物，要作记录和适当处理，必要时作病理学检查。理，必要时作病理学检查。（4）记录实验标本的收集和编号

37、。）记录实验标本的收集和编号。（5）在研究过程中出现异常现象的，应做）在研究过程中出现异常现象的，应做详细记录。详细记录。（6）所用记录的数据应当做到直接、及时、）所用记录的数据应当做到直接、及时、清晰和不易消除，并应当注明记录日期，由清晰和不易消除，并应当注明记录日期，由记录者签名，专题负责人复核后签名。记录者签名，专题负责人复核后签名。（7）记录的数据需要修改的，应当注明修）记录的数据需要修改的，应当注明修改的理由以及修改日期，并由修改者签名；改的理由以及修改日期，并由修改者签名；修改数据不得损毁原记录。修改数据不得损毁原记录。免疫学探索性实验课题设计免疫学探索性实验课题设计1. 1. 中

38、药香菇多糖能明显增强机体免疫功能，试设计课题中药香菇多糖能明显增强机体免疫功能，试设计课题阐述香菇多糖对免疫系统的作用机制。阐述香菇多糖对免疫系统的作用机制。2. 2. 临床患者感染临床患者感染H7N9H7N9病毒两周左右，如何确定其体内是病毒两周左右，如何确定其体内是否建立有效的免疫应答？否建立有效的免疫应答？3. 3. 临床患胰岛素依赖型糖尿病的病人，如何明确具体发临床患胰岛素依赖型糖尿病的病人，如何明确具体发病机制？病机制？ * 免疫器官免疫器官 中枢免疫器官中枢免疫器官 外周免疫器官外周免疫器官* 免疫细胞免疫细胞* 免疫分子免疫分子免疫系统（免疫系统（immune systemimm

39、une system）的组成）的组成免疫的核心内容免疫的核心内容“自我自我”（self）“非我非我”(nonself)免疫应答免疫应答immune response免疫耐受免疫耐受 immune tolerance)The principal mechanisms of innate and adaptive immunityInnate immune response Physiological barriers skin mucous membranes Phagocytosis polymorphonuclear leukocytes (PMN) monocytes/macrophage

40、s Natural killer (NK) cell Complement and acute phase proteins Links between innate and adaptive immunity 2005 Elsevier Types of adaptive immunity.The clonal selection hypothesisAdaptive immune responseIntroductionBCR (mIg)TCRThe two-signal requirement for lymphocyte activation.Signal 1 is provided

41、by antigen recognition.Signal 2 is provided by components of the microbes or substances produced during the innate immune response.Downloaded from: StudentConsult (on 31 May 2006 05:26 PM) 2005 Elsevier LMolecular interactions across the T cell APC junction T cellsMHC II molecularT cell-mediated imm

42、une responseImmunological Synapse A. TCRAg-MHCB. CD28B7C. LFA-1ICAM-1D. LFA-2LFA-3 Anergy (concept)A. Only 1st signal, no 2nd signalB. No 1st signal, only 2nd signalThe role of costimulation in T cell activationSignal transduction pathways in T cell activationPIP2Target genes:CKs and CKRsCAMsMHC LAT, SLP-76MAPKthe subsets of T cellsDifferentiation of Th cellsDifferentiation of Th cellsTh1Th2Activation of macrophages by T lymphocytesT cell-mediated immune responseType of adaptive immunity (4) Activation induced T cell death1) AICD (Activation induced cell