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文档简介
1、实验九实验九 病毒及其他微生物病毒及其他微生物 微生物学试验微生物学试验 实验目的要求实验目的要求 u1.1.掌握梅毒螺旋体掌握梅毒螺旋体RPRRPR试验原理试验原理u2.2.熟悉鸡胚接种方法熟悉鸡胚接种方法u3.3.熟悉胶体金标记抗体法检测熟悉胶体金标记抗体法检测HBsAgHBsAg原理原理u4.4.熟悉梅毒螺旋体、钩端螺旋体的形态熟悉梅毒螺旋体、钩端螺旋体的形态u5.5.了解常用的病毒培养方法了解常用的病毒培养方法u6.6.了解其它常见支原体、衣原体、螺旋了解其它常见支原体、衣原体、螺旋体、立克次体的形态体、立克次体的形态RPR试验试验RPRRPR试验:快速血浆反应素试验试验:快速血浆反应
2、素试验 原理:原理:梅毒患者血清中存在反应素,可梅毒患者血清中存在反应素,可与生物组织的脂质发生反应。则用正常牛心与生物组织的脂质发生反应。则用正常牛心肌的心脂质代替螺旋体作为抗原,测定病人肌的心脂质代替螺旋体作为抗原,测定病人血清中的反应素。把抗原类脂质吸附炭颗粒血清中的反应素。把抗原类脂质吸附炭颗粒上,与上,与1 1滴病人血清在滴病人血清在RPRRPR上混合,如出现间上混合,如出现间接凝集炭说明是阳性血清接凝集炭说明是阳性血清RPR试验结果试验结果1.1.阳性;阳性; 2.2.阴性阴性病毒培养方法病毒培养方法 病毒必须在活细胞内才能增殖,根病毒必须在活细胞内才能增殖,根据病毒的不同,可选用
3、动物接种、鸡据病毒的不同,可选用动物接种、鸡胚接种、组织培养等方法。胚接种、组织培养等方法。 组织培养法有器官培养、移植培组织培养法有器官培养、移植培养、细胞培养。细胞培养最常用于培养、细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒。养病毒。鸡胚接种鸡胚接种胶体金检测胶体金检测HBsAgHBsAg结果分析结果分析 钩端螺旋体钩端螺旋体u营养要求较高,营养要求较高,常用含常用含1010兔血兔血清的清的KorthofKorthof培养培养基。基。u适宜生长温度为适宜生长温度为28283030,最适,最适pH7.2pH7.27.47.4u生长缓慢生长缓慢梅毒螺旋体梅毒螺旋体(T.pallidum)u两端尖直u人
4、工培养尚未 成功沙眼衣原体沙眼衣原体严格细胞内严格细胞内寄生,有独寄生,有独特发育周期特发育周期,能通过细,能通过细菌滤器的原菌滤器的原核细胞型微核细胞型微生物。生物。班疹伤寒立克次体班疹伤寒立克次体 班疹伤寒立克次体班疹伤寒立克次体 支原体支原体 没有细胞壁,呈高度多形态性,能通过没有细胞壁,呈高度多形态性,能通过滤器,可用人工培养基培养增殖的一类最小滤器,可用人工培养基培养增殖的一类最小的原核细胞型微生物。的原核细胞型微生物。 问题与讨论问题与讨论1.病毒的培养方法有哪些?各有何优缺点?2.如何观察病毒在细胞内增殖的检测指标。3.乙肝金标法的检测原理、结果判定。4.RPR试验的原理、结果判断及意义如何?5.解
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