宫颈鳞癌转移淋巴结乙酰肝素酶的表达及临床意义--毕业答辩

1、宫颈鳞癌转移淋巴结乙酰肝素酶宫颈鳞癌转移淋巴结乙酰肝素酶的表达及临床意义的表达及临床意义 研研 究究 生生 指导老师指导老师2目录目录t 研究背景与目的研究背景与目的t 研究方法研究方法t 研究结果研究结果t 主要结论主要结论t 讨论讨论t 展望展望t 致谢致谢 研究背景与目的（研究背景与目的（1 1）u宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，其最主要的转移途径是淋巴转移，淋巴转移是目前明确的可导致临床治疗失败和死亡的主要原因。u有研究发现1宫颈癌无淋巴结转移的患者5年生存率为80%90%，当淋巴结有转移时生存率下降至45%，盆腔淋巴结转移是影响宫颈癌患者预后的重要因素。研究背景与目的（研究背景与目的

2、（2 2）u有报道指出2,3，宫颈癌伴有淋巴结转移者，约60%为多组淋巴结转移，其中有53%的病例出现了跳跃性转移。u如能在术前准确的预测淋巴结的转移情况，即可准确的了解肿瘤的范围，选择合适的治疗方案，避免不必要的根治性手术及术后相应并发症的发生，但目前对于淋巴结转移的诊断，尚缺乏有效的手段。研究背景与目的（研究背景与目的（3 3） 乙酰肝素酶（heparanase，HPA）是一种-D-葡萄糖醛酸内切酶，它能在数个位点降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖，破坏细胞外基质和基膜的完整性，同时释放VEGF、b-FGF、细胞因子、细胞粘附分子等生物活性因子，从而有利于肿瘤细胞穿越细胞外基质和血管壁，促进肿瘤的局

3、部侵袭和远处转移。 乙酰肝素酶作用机制模式图4研究背景与目的（研究背景与目的（4 4）u我们的前期研究及一些国外的研究均已证实HPA在宫颈癌原发灶中的表达显著增高，是宫颈癌的重要生物标志物。 u本研究通过免疫组织化学法检测宫颈鳞癌原发灶及转移淋巴结中HPA的表达情况，分析宫颈鳞癌淋巴结HPA的表达与临床预后因素间的关系，以期为宫颈鳞癌淋巴结的转移诊断提供一新的分子指标。研究方法（研究方法（1 1）u收集郑州大学第二附属医院病理科2007年1月2012年12月病理确诊且临床资料完整的宫颈鳞癌石蜡标本102例，其中淋巴结转移者53例（A组），淋巴结未转移者49例（B组）。A组取原发灶、转移淋巴结及

4、未转移淋巴结3个部位B组取原发灶和淋巴结2个部位，用于免疫组织化学染色研究方法（研究方法（2 2）u采用免疫组织化学S-P法检测HPA在宫颈鳞癌淋巴结转移者（A组）和淋巴结未转移者（B组）的表达情况。u分别行常规HE染色和HPA、CK19免疫组织化学标记，CK19为鳞状上皮标记。u结合图像分析技术检测各组中HPA表达的平均灰度值和阳性单位。研究方法（研究方法（3 3）图1 研究技术路线研究方法（研究方法（4 4）u所有数据采用SPSS17.0统计软件进行分析，图像分析数据采用s表示，各组间比较采用方差分析，HPA表达率采用卡方检验。u生存曲线采用Kaplan-Meier方法，生存率比较采用Lo

5、g-rank检验，多因素分析采用Cox回归分析法。u检验水平= 0.05。研究结果（研究结果（1 1）1.1.宫颈鳞癌原发灶和淋巴结中宫颈鳞癌原发灶和淋巴结中HPAHPA的阳性表达情况的阳性表达情况0%20%40%60%80%100%A组B组原发灶未转移淋巴结转移淋巴结图2 宫颈鳞癌原发灶和淋巴结中的HPA阳性表达率12研究结果（研究结果（3 3）3 3. .宫颈鳞癌原发灶和淋巴结中宫颈鳞癌原发灶和淋巴结中HPAHPA的表达情况的表达情况表1 宫颈鳞癌原发灶和淋巴结中HPA的表达水平比较分组例数平均灰度值FP 阳性单位FP A组组原发灶531028*30.5210.0005.03.96.351

6、0.021转移淋巴结531193#4.74.4未转移淋巴结5313651.30.7B组组原发灶49113321.3970.0004.73.14.827 0.037淋巴结4914341.10.8研究结果（研究结果（4 4）4.4.淋巴结淋巴结HPAHPA表达水平与临床病理学特征的关系表达水平与临床病理学特征的关系图 4 宫颈鳞癌淋巴结的转移与患者生存分析图 5 宫颈鳞癌淋巴结HPA表达水平与患者生存分析研究结果（研究结果（5 5）5 5. .宫颈鳞癌中宫颈鳞癌中HPAHPA的表达与生存时间的关系的表达与生存时间的关系 研究结果（研究结果（6 6）6 6. .宫颈鳞癌预后的宫颈鳞癌预后的CoxCo

7、x模型多因素分析模型多因素分析主要结论主要结论1.HPA在宫颈鳞癌原发灶和转移淋巴结中的表达均显著增高，可作为宫颈鳞癌淋巴结转移的生物学检测指标；2.宫颈鳞癌淋巴结转移者MOS明显低于淋巴结未转移者，淋巴结转移是宫颈癌的独立预后因素；3.淋巴结HPA阳性表达者MOS明显低于淋巴结HPA阴性表达者，提示淋巴结HPA阳性患者预后差。 1.HPA1.HPA在宫颈癌中的研究在宫颈癌中的研究讨论（讨论（1 1）u我们的前期研究及一些国外的研究均已证实HPA在宫颈癌原发灶中的表达显著增高，是宫颈癌的重要生物标志物。u本课题对宫颈鳞癌淋巴结HPA的表达情况进行了全面的研究，证实宫颈癌原发灶HPA的阳性表达率

8、明显增高，与我们前期研究结果相同。讨论（讨论（2 2）u本研究中，转移淋巴结表达率高达92.6%，提示HPA的异常表达在宫颈鳞癌淋巴结转移中发挥了重要作用，可能参与宫颈鳞癌腹膜后淋巴结转移的过程。uDafni等6在检测HPA表达对淋巴结转移效应的研究中发现，经生物素标记后，HPA高表达的淋巴瘤小鼠的腘窝淋巴结较HPA低表达的小鼠腘窝淋巴结的MRI显像强度明显增加，说明HPA表达对淋巴结的转移有影响。讨论（讨论（3 3） u淋巴结清扫的范围一直是宫颈癌患者手术争论的热点，术前若能通过宫颈癌特异性分子标志物，对宫颈癌患者淋巴结转移的情况进行评估，则可针对转移淋巴结行相应淋巴结清扫以减少手术创伤，对

9、术后是否辅以放疗也起到了关键性的指导作用。讨论（讨论（4 4）2.2.淋巴结中淋巴结中HPAHPA表达的研究现况表达的研究现况u国内外都在寻找转移淋巴结特异性和敏感性的生物分子指标。u基于我们的前期研究工作，本研究是国内外首次以HPA为靶分子的宫颈癌转移淋巴结的研究。u本研究对我们下一步进行的研究，宫颈癌PET成像诊断研究的靶分子的选择提供了依据，尤其是鳞癌转移淋巴结无创伤PET成像诊断的研究。展望展望t HPA的研究经历了一个漫长的时期，其作用机制也逐渐清晰。HPA不仅是宫颈癌的生物标志物，也有望成为宫颈鳞癌转移淋巴结诊断的生物标志物。在我们下一步要进行的宫颈癌PET成像诊断的研究中，HPA

10、作为宫颈癌示踪剂，是对其作用的进一步开发，同样拥有广阔的前景和更加深远的意义。1 Aoki Y, Sasaki M, Watanabe M, et al. High-risk group in node-positive patients with stageB,A, and B cervical carcinoma after radical hysterectomy and postoperative pelvic irradiation JGynecol oncol, 2000, 77(2):305-309.2 冯淑瑜, 张彦娜, 刘建刚, 等. 宫颈癌淋巴结转移的高危因素及预后分析J癌

11、症, 2005, 24(10):1261-1266.3 张秀珍, 付玉兰, 赵西侠, 等. 宫颈癌盆腔淋巴结转移情况分析J现代肿瘤医学, 2005, 13(2):232-234.4 Expression and analysis of heparanase、VEGF and-FGF in prostate cancerJ. Oncol Res, 2006, 61(3):219-234.5 Parish CR,Freeman C,Hulett MD,et al.Heparanase:a key enzyme involved in cell invasionJ.Biochim Biophys Acta,2001,1471:99-108.6 Dafni H, Cohen B, Ziv K, e