医院物体表面及医务人员手采样,刘奔华6.8

1、医院物体外表及医务人员手采样一 、医院物体外表及医务人员手采样的意义 1. 引起医源性感染的因素很多, 物体外表及医务人员手可以充当医源性感染的媒介, 手的微生物污染是造成医院感染的最直接的传播途径,由于医务人员的手传播细菌而造成的医院感染约占30%。医护人员做好手的清洁消毒是控制医院感染重要措施一。u 2. 一些物体外表清洁后的效果监测需要通过环境物表采样培养数据来反映。u3. 促进医务人员手卫生的依从性。u4. 进行流行病学调查。二 、 物体外表采样u 医院物体外表采样的对象：一切与医疗活动相关的物体外表均可以作为采样的对象：治疗台，治疗车，器械车、器械台、麻醉机、新生儿暖箱、诊疗仪器，床

2、头柜、床尾桌、监护仪按钮、诊疗仪器操作把手、血压计袖带 、听诊器、床栏、床栏按钮、遥控器、门把手、电脑键盘、鼠标， 机、病历夹等。u 采样时间u常规：消毒处理后进行采样u爆发流行：未处理外表，随机采样u采样面积： 常规： 100cm 2 , 全部外表；100 cm 2 ，取100 cm 2u爆发流行： 不限，尽可能多采u 采样方法：u1棉拭子法 ：u 准备材料u5 cm5cm标准灭菌规格板： 材质为牛皮纸或不锈钢，中间为一 5cm5cm正方形空格，面积是25 cm 2 。u采样液：无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水10 mL如果有残留消毒剂，应加相应的中和剂；无菌棉签；酒精灯等。u磷酸盐缓冲液PB

3、S，0.03mol/L,pH7.2u配方u 蒸馏水加至 1000ml，待完全溶解后，调upH 至 7.2-7.4 ， 于 121 压 力 蒸 气 灭 菌u20min备用。u 采样步骤u平面物体：用5cm5cm的标准灭菌规格板,放在被检物体外表,用浸有无菌磷酸盐缓冲液0.03mol/L或生理盐水采样液的棉拭子1支, 在规格板内横竖往返各涂抹5次并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积,剪去或用酒精灯烧断手接触局部, 将棉拭子放入装l0mL采样液的试管中送检。u 对小型物体及不规那么物体外表，如水龙头、门把手等，直接用棉拭子涂抹物体，用cfu/件表示u 标本接种：u a 涂抹法：充分震荡采样管

4、后，用无菌吸管吸取0.5mL待检样品接种于营养琼脂平皿，置361培养箱培养48小时，计数并鉴定细菌。ub 倾注法：充分震荡采样管后，先取采样液1.0mL加到无菌空平皿，再将冷却至4045的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL，361培养箱培养48h,计数菌落数并鉴定细菌u 本卷须知：u a 采样管充分震荡u b 涂抹法：充分涂抹开u c 倾注法：控制好琼脂温度，摇匀。u 结果的报告及计算u细菌计数按cfu/cm 2 报告u小型物件物体外表的结果计算，用cfu/件表示u如果361培养箱培养48小时，无细菌生长，可报告为： 0cfu/cm 2u 例1 ：棉拭子法对患者床头柜采样采样面积100

5、 cm 2 ，用上述涂抹法接种,采样液10mL，接种量0.5mL，361培养箱培养48小时后培养基上生长的细菌菌落数为25个。u 例2：棉拭子法对患者床头柜采样面积100 cm 2 ，用上述倾注法接种采样液10mL，接种量1mL，361培养箱培养48小时后培养基上生长的细菌菌落u数为10个。u (2) 压印法 ：用细菌定量采样皿对物体外表直接压印采样并培养计数。u 准备材料：面积25cm 2 的营养琼脂平皿既是采样皿，又是培养皿 u 琼脂平皿的制备及结果判定后平皿的处理u 制备：u熔化营养琼脂培养基 平皿消毒灭菌：翻开平皿盖，置于超净台的紫外线下照射60分钟，底的内面和盖 的 内 面 均 要

6、照 射 或 环 氧 乙 烷 灭菌，在无菌采样皿中倒入营养琼脂培养基，加盖冷却凝固,置4 冰箱备用。u注意：加营养琼脂培养基的量，要根据采样皿边沿具体厚度，培养基高度略高于平皿边缘u在琼脂没冷却前不要移动平皿，以免培养基溢出。u标本处理后平皿的处理：挑取琼脂，煮沸消毒，平板浸泡在消毒液中，然后冲洗晾干备用，制备培养皿时再紫外线照射。u 采样操作：u面积25cm 2 的琼脂平皿压印物体外表1020秒, 置361培养箱培养48h,计数菌落数并鉴定细菌。u 结果计算u例：某治疗台面采样，361培养箱培养48h后, 4个平皿上的菌落数分别为14、25、25、36CFUu物体外表消毒合格标准判定：I、II

7、类区域：物体外表的细菌菌落5cfu/cm 2uI、II类区域包括：洁净手术部，其他洁净场所，非洁净手术部，非洁净骨髓移植病房，产房，导管室、新生儿室，器官移植病房，烧伤病房，重症监护室，血液病病区等。u III、IV类区域：物体外表的细菌菌落数10 cfu/cm 2u III、IV类区域：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供给中心、血液透析中心、急诊科、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等。三 医务人员手采样及检测方法u 1. 几个概念u手卫生: 洗手、卫生手消毒和外科手消毒的总称。u 洗手: 医务人员用肥皂或者皂液和流动水洗手，去除手部皮

8、肤污垢、碎屑和局部致病菌的过程。u卫生手消毒：医务人员使用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。u 外科手消毒：外科手术前医务人员用肥皂皂液和流动水洗手，再用手消毒剂去除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。使用的手消毒剂具有持续抗菌活性。u常居菌 ：能从大局部人体皮肤上别离出来的微生物，是皮肤上持久的寄居菌，不易被机械的摩擦去除,一般情况下不致病。u暂居菌 ：寄居在皮肤表层，常规洗手容易被去除的微生物。直接接触患者或被污染的物体外表时可获得，可随时通过手传播，与医院感染密切相关。u手采样时间u常规：洗手后从事诊疗前在接触病人、从事医疗活动前进行采样。u爆发流行：未洗手时采样, 当发生

9、医院感染爆发流行时，疑心与医务人员的手污染相关时，应及时采样。u3. 采样面积及方法u1棉拭子法u 采样方法： 被检人五指并拢，用浸有无菌磷酸盐缓0.03mol/L或生理盐水采样液的棉拭子1支,在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次一只手涂擦面积约30cm 2 ，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放入装有10mL采样液的试管内送检。假设手上有消毒剂残留时，采样液应含相应的中和剂。u 标本接种：ua涂抹法：充分震荡采样管后，用无菌吸管吸取0.5mL待检样品接种于营养琼脂平板，置361培养箱培养48小时，计数并鉴定细菌。ub倾注法：充分震荡采样管后，取采样液1.0mL接种平皿，将冷确至

10、4045的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL，361培养箱培养48h,计数菌落数并鉴定细菌。u 结果计算：u2 只手的采样面积按30 2=60cm 2 计算u例1 ：采用上述棉拭子涂抹法对某医务人员的双手采样，用上述涂抹法接种采样液10mL，接种量0.5mL，361培养箱培养48小时后培养基上生长的细菌菌落数为6个u 例2 ：采用上述棉拭子涂抹法对某医务人员的双手采样，用上述倾注接种采样液10mL，接种量1mL，361培养箱培养48小时后培养基上生长的细菌菌落数为18个。u 2压印法 面积25cm 2 的琼脂平皿压印1020秒要采双手，每只手分别用一个平皿。u结果计算：u 4. 医务人

11、员手卫生合格的判断标准：u 卫生手 清毒 ：监 测的细 菌菌落总数应10cfu/ 2u外科手消毒：监测的细菌菌落总数应5cfu/ 2u u采样及检测原那么: 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过2h,假设样品保存于4冰箱, 存放时间不得超过4h。u例：采用上述压印法对某医务人员的双手采样左右手各一个，361培养箱培养48小时后，两个平皿上生长的细菌菌落数分别为24、26个。u 四、 棉拭子法与压印法的比较u压印法的优点:u1. 试验材料少、本钱低。u2. 采样过程简便,人为影响因素少,可标准化。u 3. 便于大量开展监测工作。u压印法的缺点:u细菌较多时, 平皿细菌菌落相互

12、融合u棉拭子法的优点:u 1 可用于不规那么外表门把手，水龙头u2 方便外科手的采样加中和剂u棉拭子法的缺点:u1 准备工作复杂u2 受人为影响因素多u3 实验室操作过程复杂u4 试验材料多u5 接种过程: 无菌操作u 五 、 监测要求u 每季度对手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科等部门工作的医务人员手进行消毒效果的监测；u当疑心医院感染爆发与医务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相应致病性微生物的检测u六、 出现的问题及本卷须知：u1. 培养基、采样液等：无菌试验,试验时要设阴性对照和阳性对照。u 采样用的棉签、规格板等尽量在使用前一周内灭菌，不被污染。u