纸张中五氯苯酚测定.

1、纸张中纸张中 五氯苯酚的测定五氯苯酚的测定 液相色谱液相色谱串联质谱法串联质谱法1一、一、液液 质质 联联 用用 介介 绍绍2液相色谱液相色谱-质谱联用仪的定义及用途质谱联用仪的定义及用途利用液相色谱对混合物的高效分离能力和质谱对纯化合物的利用液相色谱对混合物的高效分离能力和质谱对纯化合物的准确鉴定能力而开发的分析仪器，简称准确鉴定能力而开发的分析仪器，简称LC-MSLC-MS。适用对象适用对象高极性、热不稳定性、高分子量、低挥发度有高极性、热不稳定性、高分子量、低挥发度有机物（占机物（占90%90%以上）以上）35气质联用仪气质联用仪(GC-MS)液质联化合用液质联化合用(LC-MS)：四极

2、杆用于传输离子或选择母离子和子离子四极杆用于传输离子或选择母离子和子离子,.,.离子通离子通过聚焦和传输进入下一组四极杆过聚焦和传输进入下一组四极杆3. 质量分析器质量分析器四极杆四极杆用液相或注射泵将样品注用液相或注射泵将样品注 入质谱入质谱. .1. 1. 样品注入样品注入样品在离子源内电离样品在离子源内电离, ,带电离带电离子在接口内进行去溶剂子在接口内进行去溶剂, ,聚集聚集, ,冷却进入质量分析器冷却进入质量分析器2. 2. 离子化离子化检测器记录离子的信号检测器记录离子的信号. . 然后将然后将信号传输到电脑绘制成色谱图信号传输到电脑绘制成色谱图. . 4. 4. 离子检测和数据分

3、析离子检测和数据分析Q0Q1Q3DFCEMORSKEXIT Q2 (LINAC)5.5.真空系统真空系统系系 统统 组组 成成LC-MS接口 大气压电喷雾电离原理原理：原理：包括电喷雾、离子形成、离子输送三个过程。包括电喷雾、离子形成、离子输送三个过程。电喷雾电喷雾：流速为流速为0.5-1000ul/min的的LC流出物经过一内径为流出物经过一内径为0.1mm施加施加3-8kV电压的金属毛细管，毛细管尖端很窄，电场可电压的金属毛细管，毛细管尖端很窄，电场可高达高达106V/m，使流出物成扇状喷雾，成为细小液珠和溶剂蒸汽，使流出物成扇状喷雾，成为细小液珠和溶剂蒸汽的混合体。由于高电场作用，溶液中

4、带电荷的溶质会向液体表面的混合体。由于高电场作用，溶液中带电荷的溶质会向液体表面移动，使液珠表面电荷过剩，其电荷正负由所加毛细管电压正负移动，使液珠表面电荷过剩，其电荷正负由所加毛细管电压正负而定。而定。离子形成：表面有大量电荷的细小液珠向下游移动时，溶表面有大量电荷的细小液珠向下游移动时，溶剂迅速蒸发，液珠表面积缩小，电荷密度增高。当电荷与液珠表剂迅速蒸发，液珠表面积缩小，电荷密度增高。当电荷与液珠表面积之比达到一个临界值（面积之比达到一个临界值（Rayleigh Limit）时，液珠会分裂成）时，液珠会分裂成更小的液珠。更小的液珠再重复蒸发、电荷过剩、进一步分裂。更小的液珠。更小的液珠再重

5、复蒸发、电荷过剩、进一步分裂。分析物可能以单电荷或多电荷离子进入气相。分析物可能以单电荷或多电荷离子进入气相。LC-MS接口 大气压电喷雾电离原理离子输送：在大气压条件下形成的离子，在电位差和压力在大气压条件下形成的离子，在电位差和压力差的作用下，离子流通过一个加热的金属毛细管进入第一个降压差的作用下，离子流通过一个加热的金属毛细管进入第一个降压区，在毛细管出口处形成超音速喷射流，再经过下游处于低电位区，在毛细管出口处形成超音速喷射流，再经过下游处于低电位的锥形分离器小孔进入第二降压区，经聚焦后进入质谱真空区，的锥形分离器小孔进入第二降压区，经聚焦后进入质谱真空区，进入质量分析器、检测器。进入

6、质量分析器、检测器。LC-MS接口 大气压电喷雾电离原理LC-ES-MSLC-ES-MS操作要点操作要点 LC液体流速：液体流速：0.5-1000uL/min或更高，视不同厂家接口特点而定或更高，视不同厂家接口特点而定。 溶剂范围很宽：溶剂范围很宽：100%有机溶剂到有机溶剂到100%水相。水相。 接口操作参数：接口操作参数：电喷雾电压、喷射液体流速、助气和气帘的流速、接口温电喷雾电压、喷射液体流速、助气和气帘的流速、接口温度等。度等。灵敏度灵敏度: 差异很大，对多肽、蛋白质类检出量可达差异很大，对多肽、蛋白质类检出量可达10-18 mol水平；对小分子水平；对小分子量的极性化合物，在量的极性

7、化合物，在ng-pg/uL水平。水平。LC-MS接口 大气压化学电离接口大气压化学电离接口大气压化学电离接口：Atmospheric Pressure Chemical Ionization，简称，简称APCI。原理原理：是将化学电离延伸到大气压下进行。与大气压电喷雾电离是将化学电离延伸到大气压下进行。与大气压电喷雾电离方式（方式（API-ES）相似，包括）相似，包括LC液体喷射、离子形成、离子输送三液体喷射、离子形成、离子输送三个过程。个过程。ESI与APCI离子源的选择ESI： 1. 适合范围广，分析离子型、极性化合物、难挥发或热不稳定性化合物；适合范围广，分析离子型、极性化合物、难挥发或

8、热不稳定性化合物；2.易形成多电荷离子，可以分析高分子量化合物；易形成多电荷离子，可以分析高分子量化合物；3. 灵敏度高；灵敏度高；4. 离子化受溶剂和流速的影响；离子化受溶剂和流速的影响；APCI： 有一定挥发性的中等极性或低极性的小分子化合物，对溶剂选择、有一定挥发性的中等极性或低极性的小分子化合物，对溶剂选择、流速和添加物的依赖性较小流速和添加物的依赖性较小烟用纸张中烟用纸张中 五氯苯酚的测定五氯苯酚的测定 液相色谱液相色谱串联串联质谱法质谱法用纸张中可释放特定芳香胺的偶氮染料的测定 765335923532Q1 Q2 Q3Precursor selectedin Q1 Precurso

9、r Fragmented in Q2Product Ion Focused in Q3 923/765532/335MS/MS MRM1314v 常用的流动相：常用的流动相：151617目的目的：防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷嘴，防止污染仪器，降低防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷嘴，防止污染仪器，降低分析背景，排除对分析结果的干扰。分析背景，排除对分析结果的干扰。要求获得最佳的分析结果，从要求获得最佳的分析结果，从ESI电离的过程分析：电离的过程分析：ESI电荷是在液电荷是在液滴的表面，样品与杂质在液滴表面存在竞争，不挥发物（如磷酸盐滴的表面，样品与杂质在液滴表面存在竞争，不挥发物（如磷酸盐等）

10、防碍带电液滴表面挥发，大量杂质防碍带电样品离子进入气相等）防碍带电液滴表面挥发，大量杂质防碍带电样品离子进入气相状态，增加电荷中和的状态，增加电荷中和的可能可能1819烟用纸张中烟用纸张中 五氯苯酚的测定五氯苯酚的测定 液相色谱液相色谱串联串联质谱法质谱法用纸张中可2021m/z 50-150, 溶剂离子，溶剂离子，(H2O)nH+ ，n= 3-112 m/z 102, H+乙腈乙腈 +乙酸乙酸, C4H7NO2H+,102.0549m/z149, 管路中邻苯二甲酸酯的酸酐管路中邻苯二甲酸酯的酸酐, C8H4O3H+,149.0233m/z 288, 2mm 离心管的产生的特征离子离心管的产生

11、的特征离子m/z 279, 管路中邻苯二甲酸二丁酯管路中邻苯二甲酸二丁酯 C16H22O4H+, 279.1591m/z391, 管路中邻苯二甲酸二辛酯管路中邻苯二甲酸二辛酯, C24H38O4H+, 391.2843m/z413, 邻苯二甲酸二辛酯邻苯二甲酸二辛酯+钠钠, C24H38O4Na+, 413.2668m/z 538, 乙酸乙酸+氧氧 +铁（喷雾管）铁（喷雾管）, Fe3O(O2CCH3)6, 537.879322p 五氯苯酚主要用作五氯苯酚主要用作纺织品、皮革、纸张和木材的防腐剂和防霉纺织品、皮革、纸张和木材的防腐剂和防霉剂剂。p具有生物累积性，对人体具有致畸具有生物累积性，对

12、人体具有致畸、致癌和致癌和致突变致突变性，通过皮肤性，通过皮肤进入人体，可导致肺、肝、肾脏的损伤。进入人体，可导致肺、肝、肾脏的损伤。p美国环境保护署和欧盟已规定其为优先监测的有机污染物之一。美国环境保护署和欧盟已规定其为优先监测的有机污染物之一。 五氯苯酚的性质五氯苯酚的性质23法规法规限制要求限制要求欧洲委员会欧洲委员会与食品接触的纸和纸板材与食品接触的纸和纸板材料料/物品物品0.15mg/kg欧盟欧盟2003021EC指令指令出口木材：出口木材：5mg/kgGB/T 18885生态纺织品技术要求生态纺织品技术要求婴儿类：婴儿类：0.05mg/k其他类：其他类：0.5mg/kg相关法律法规

13、相关法律法规24标准标准研究对象研究对象提取提取检测检测检测限检测限(mg/kg)GB/T18414.1-2006纺织品纺织品碳酸钾超声提取，乙酰化，加正己烷萃取碳酸钾超声提取，乙酰化，加正己烷萃取GC-MS0.05SN/T2276-2009纸和纸板纸和纸板、纸浆、纸浆碳酸钾超声提取，乙酰化，加正己烷萃取碳酸钾超声提取，乙酰化，加正己烷萃取GC-MS0.02SN/T2278-2009软木软木碳酸钾超声提取，直接碳酸钾超声提取，直接乙酰化乙酰化，加正己烷萃取，加正己烷萃取GC-MS0.1GB/T18414.2-2006纺织品纺织品丙酮提取，浓缩近干，用碳酸钾复溶，乙酰化，丙酮提取，浓缩近干，用碳

14、酸钾复溶，乙酰化，加正己烷萃取加正己烷萃取GC-ECD0.02橡胶及橡橡胶及橡胶制品胶制品甲醇超声提取，离心，过滤进样甲醇超声提取，离心，过滤进样HPLC-DAD0.05木材及其木材及其制品制品乙醇超声提取，旋转蒸干，甲醇复溶，过滤进样乙醇超声提取，旋转蒸干，甲醇复溶，过滤进样HPLC-DAD0.1食品包装食品包装纸中纸中丙酮提取，旋转蒸干，甲醇复溶，固相萃取，甲丙酮提取，旋转蒸干，甲醇复溶，固相萃取，甲醇醇-二氯甲烷洗脱，氮吹，甲醇复溶二氯甲烷洗脱，氮吹，甲醇复溶HPLC-MS/MS0.001纺织品纺织品甲醇甲醇-水溶液超声提取，离心过滤进样水溶液超声提取，离心过滤进样HPLC-MS/MS0

15、.0052526 水，水，GB/T 6682，一级。，一级。甲醇。甲醇。甲酸。甲酸。五氯苯酚，纯度五氯苯酚，纯度99%。内标：内标：2,4,5-涕涕 (CAS：93-76-5)，纯度，纯度99%。试剂试剂内标储备溶液：内标储备溶液：浓度为浓度为100 mg/mL。在。在04条件下密封避光贮存，条件下密封避光贮存，有效期有效期6个月。个月。内标工作溶液：内标工作溶液：浓度为浓度为1.0 mg/mL。一级标准储备溶液：一级标准储备溶液：浓度为浓度为100 mg/mL。在。在04条件下密封避光贮条件下密封避光贮存，有效期存，有效期6个月。个月。二级标准储备溶液：二级标准储备溶液：1.0 mg/mL。

16、在。在04条件下密封避光贮存，有效条件下密封避光贮存，有效期期3个月。个月。标准工作溶液：标准工作溶液：根据样品实际含量配制合适浓度的系列标准工作溶液，根据样品实际含量配制合适浓度的系列标准工作溶液，推荐如下配制方法：分别准确移取推荐如下配制方法：分别准确移取50 mL、100 mL、200 mL、300 mL、500 mL、1000 mL二级标准储备溶液于二级标准储备溶液于50 mL容量瓶中，加入容量瓶中，加入50 mL内标内标工作溶液用甲醇定容，即得系列标准工作溶液，现配现用。系列标准工工作溶液用甲醇定容，即得系列标准工作溶液，现配现用。系列标准工作溶液中五氯苯酚的含量分别为作溶液中五氯苯

17、酚的含量分别为0.05 g、0.1 g、0.2 g、0.3 g、0.5 g、1 g。标准溶液制备标准溶液制备2728液相色谱液相色谱-串联质谱联用仪（串联质谱联用仪（LC-MS/MS），配备电喷雾离子源（），配备电喷雾离子源（ESI）。）。 分析天平，感量为分析天平，感量为0.1 mg。 超声波清洗器，工作频率为超声波清洗器，工作频率为40 kHz。 离心机，使用转速离心机，使用转速 5000 r/min。各种规格移液管、移液枪、容量瓶、具塞三角瓶和离心管。各种规格移液管、移液枪、容量瓶、具塞三角瓶和离心管。仪仪 器器液相色谱条件液相色谱条件色谱柱，色谱柱，Atiantis dC18 150 mm（长度）（长度） 2.1 mm（内径），（内径），3 mm（粒径）（粒径）。 流动相，甲醇（流动相，甲醇（A）: 0.1 %甲酸水溶液（甲酸水溶液（B）=95:5（体积分数）。（体积分数）。流速，流速，200 mL/min。柱温，柱温，30。进样量，进样量，5 m mL。质谱条件质谱条件扫描方式，负离子扫描。扫描方式，负离子扫描。离子源离子源,电喷雾电离源（电喷雾电离源（ESI）。）。检测方式，多反应监测（检测方式，多反应监测（MRM）。）。雾化气压力，雾化气压力，60 psi。气帘气压力，气帘气压力，18 psi。辅助加热气压力，辅助加热气压