临床检验仪器总复习

1、第一章 概论1、临床检验仪器大体分为：分离分析检验仪器（离心机、色谱仪、电泳仪等）、光谱分析检验仪器（紫外-可见分光光度计、荧光光谱仪等）、目视检验仪器（普通生物显微镜、荧光显微镜等）、细胞及分子生物学检验仪器（培养箱、生物安全柜、流式细胞仪等）、临床检验常规仪器（血细胞分析仪、血流变、血凝仪、尿沉渣，生化分析仪等）2、临床检验仪器的性能指标：灵敏度、误差、噪声、最小检测量、精确度、可靠性、重复性、分辨率、测量范围和示值范围、线性范围、响应时间、频率响应范围第二章 离心机1、离心现象：物体在离心力场中表现的沉降运动现象。2、离心技术主要用于各种生物用品的分离、纯化和制备。3、离心是利用旋转运动

2、的离心力以及物质的沉降系数或悬浮密度的差异进行分离、浓缩、和提纯生物样品的一种方法。4、离心机工作原理：利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，迫使液体中的微粒克服扩散，加快沉降速度，把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。5、离心机的分类：（1）按转速分：低速离心机4000r/min、高速离心机20000r/min、超速离心机5000080000r/min;(2)按用途分：制备型、分析型、制备分析两用型；（3）按结构分：台式、多管微量式、细胞涂片式、血液洗涤式、高速冷冻式、大容量低速冷冻式、台式低速自动平衡离心机。6、基本结构：（1）低速离心机：电动机、离心转盘、调速器、定时器、离

3、心管套与底座等；（2）高速离心机：转动装置、速度控制系统、真空系统。温控系统、安全保护装置；（3）超速离心机：椭圆形转子、真空系统、光学系统、速控系统、温控系统、驱动等第三章 显微镜1、光学显微镜的工作原理：（1）光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微笑物体放大成像，供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。（2）光学显微镜由两组会聚透镜组成光学折射成像系统，把焦距较短、靠近观察物，成实像的透镜组成为物镜，把焦距较长、靠近眼睛、成虚像的透镜组成为目镜。2、基本结构：包括光学系统和机械系统两大部分。光学系统包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜等，机械系统包括调焦系统、载物台和物镜转换器等运动加持部

4、件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件。3、电子显微镜原理：根据电子光学原理，用电子束和电子头颈代替光束和光学透镜，使物质的微细结构在非常高的放大倍数下成像。4、电子显微镜基本结构：主要由电子光学系统、真空系统、供电系统、机械系统和观察显示系统等组成。5、电子显微镜分类：透射电子显微镜、扫描电子显微镜、扫描隧道显微镜。第四章 紫外-可见分光光度计1、分光光度计是指能够从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器。紫外-可见光分光光度计所用光波段为200800nm。2、工作原理：不同物质会吸收不同波长光，且有属于物质的吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱，因此可根据物质的吸收光谱

5、来分析物质的结构、含量和纯度。3朗伯-比尔定律：当一束单色光照射吸收溶液时，其吸光度与液层厚度及溶液浓度的乘积成正比。（1）A为吸光度、T为透光度也叫透射率、入射光强度为I0、透射光强度为I、b为液层厚度、c为溶液浓度、比例常数k为吸光系数。（2）适用条件：入射光为单色光；溶液浓度不能过大。4、基本结构：光源单色器吸收池检测器信号显示系统5：分类：单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计。第五章 临床血液血常规检验仪器一、血细胞分析仪BCA（又叫血细胞自动计数仪、血液自动分析仪）1、血细胞分析仪是对一定体积全血内血细胞数量和异质性进行自动分析的常规检验仪器。功能：血细胞计数、白细胞

6、分类、血红蛋白测定、相关参数计算。2、分类：（1）按自动化程度：半自动和全自动血细胞分析仪（2）按检测原理：电阻抗型、激光型、电容型、光电型、联合检测型、干式离心分层型、无创型；（3）按白细胞分类水平：二分群、三分群、五分类、五分类+网织红细胞BCA3、检测原理：（1）血细胞仪的细胞计数原理以电阻抗型和联合检测型为主（2）血细胞仪测定血红蛋白原理：光电比色原理4、基本结构：由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机控制系统以不同形式组合构成。二、血液凝固分析仪 1、分类：按自动化程度分为半自动血凝仪、全自动血凝仪和全自动血凝检测流水线。2、检测原理：凝固法。底物显色法、免疫

7、学法、干化学法。3、基本结构：（1）半自动血凝：主要由样本和试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成。(2)全自动血凝：包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机控制系统及附件等。第六章 血流变检验仪器1定义：血流变分析仪是对全血 血浆 或血细胞流变特性进行分析的检验仪器。主要有 血液黏度计，红细胞形变测定仪，血小板聚集仪，红细胞电泳仪，血沉仪。2分类：血液黏度计可分为毛细管黏度计 和 旋转式黏度计；前者按结构分为奥氏和乌氏黏度计；后者分为筒筒式，锥板式，锥锥式以及棱球式黏度计。锥板式最为常见。原理：毛细管黏度计原理： 一定体积的液体在一定压力驱动下通

8、过一定管径时，所需时间与黏度成正比。 结构：毛细管 储液池 控温装置 计时装置旋转式黏度计原理：牛顿黏滞定律结构：样本传感器 转速控制以及调节系统 力矩测量系统 恒温系统。自动血沉仪血沉是指红细胞在一定条件下沉降的速度。工作原理：1光学阻挡原理2红外线障碍法3激光光源扫描微量全血第七章 尿液检验仪器尿液分析是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一，通过对尿液的物理学检查和化学检查，可观察尿液物理性状和化学成分的变化。 尿液分析仪分类：1 按工作方式：干式和湿式 2 按测量项目：8,9,10,11,12,13项尿液分析仪 ，主要检测项目有：尿蛋白，尿葡萄糖，尿ph,尿酮体，尿胆红质，尿胆原，尿潜血，

9、亚硝酸盐，尿白细胞，尿比重，维生素c，尿颜色和浊度。 3按自动化分为：半自动化和全自动化测量原理：（一）试剂带多联试剂带是将多个项目实验块集成在一的试剂带上，使用时，进入一次尿液可检测多项参数。试剂块比测量项目多一个空白快，空白快是为了消除尿液自身颜色以及试剂块状态分布不均等产生的误差。试剂带结构图从下到上依次是底层，吸水层，试剂层，盐酸层，尼龙膜。1ph的测定：常用甲基红和溴麝香草芬兰指示剂2 尿蛋白测定：利用ph 指示剂蛋白质误差的原理3 尿糖测定：一种是葡萄糖氧化酶法 另一种是铜还原法4尿酮体测定：采用亚硝基铁氰化钠反应；（二）尿液分析仪检测原理一般采用双波长法测定试剂快颜色变化，一种是

10、测定波长 一种是参比波长反射率是：R=Tm*Cs/TS*Cm尿液检验仪器结构与功能1机械系统 齿轮传输 机械臂传输 胶带传输2光学检测系统 光源 单色镜 光电转换3电路系统尿有形成分分析仪分类：1 通过鸟有形成分直接镜检在进行影像分析 2 流式细胞术工作原理：1 稀释染色标本通过鞘液池 2氩激光照射 3光电转换仪器结构：1光学检验系统：氩激光 激光反射系统，流动池，前项收集器和前项光检测仪2液流系统：由样品管 鞘液管 喷嘴组成的流动室是也流系统核心3电路系统4自动加样装置：主要有自动进样传输装置，样本混匀器 定量吸样装置和样品传输装置第十章微生物检测仪器分类：一是自动血培养检测和分析系统，功能

11、是检测血液中是否存在微生物，并用计算机自动扫描检测二是自动微生物鉴定与药敏分析系统，功能是将分离的微生物进行鉴定，并做抗菌药物敏感试验。第八章 自动生化分析仪定义：自动生化分析仪是将生物化学分析过程中的取样，加试剂，去干扰，混合，保温反应，自动检测，结果计算，数据处理，打印报告以及试验后清洗等步骤自动化的仪器。分类：1全自动和半自动 2 单通道和多通道 3 连续流动式 离心式 分立式 干化学式原理：1连续流动式：通过比例泵将样品和试剂吸到连续的管道系统中，混合并偷袭去干扰，在一定条件下保温，显色，比色，信号放大并运算处理。2分立式：是按手工操作方式编程，并以有序的机械操作代替手工操作，用加样探

12、针加样于反应杯中，用试剂针定时定量加入试剂，充分混匀后应当条件下反应并进行比色测定。3离心式：将样品与试剂放入特质圆形反应器中，装在离心机中，在离心作用下充分混匀反应。4 干化学式：将待测液直接加入已固化于特殊结构的试剂载体上，一样本中水将载体上的实际溶解，在与样品中待测成分发生反应，是集光学，化学，酶工程学，化学计量学以及计算机技术于一体的新型生化仪器。自动生化分析仪结构：（一）样品处理系统1样品装载和传输装置 2闭盖穿刺，开盖闭盖装置 3试剂仓 4样品和试剂取样单元5搅拌系统（二）检测系统1光源 2分光装置 3比色杯 4恒温装置 5清洗装置 6信号转换与传输装置（三）计算机系统1 cpu和

13、主机 2 显示器自动生化分析仪常用分析方法有哪些：终点分析法：通过测定反映开始至反映达到平衡时的产物或底物浓度的总变化量来求待测物浓度或活性的方法；连续监测法：通过连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物的吸光度，根据吸光度随时间的变化求出待测物浓度或活性的方法；比浊测定法：通过检测物质对光的散射或透射强度来测定物质的方法。简述分立式自动生化分析仪的基本结构：分立式自动生化分析仪主要由样品处理系统，监测系统及计算机系统构成。第九章 电化学分析仪器定义：电化学分析仪器是利用电化学分析技术而设计的临床分析仪器。电化学分析法是建立在溶液电化学性质基础上的分析方法。主要有电解质分析仪 血气分析仪电解质

14、测定方法有：化学法 火焰光度法 原子吸收法 离子选择性吸收法（最重要）电解质分析仪器主要检测钾，钠，氯离子，部分检测锂，钙，镁离子。工作原理：ise即离子选择电极分析法。电解质分析仪器采用一个毛细管测试管路，让待测样品与测量电极（离子选择电极）接触。 反应，与参比电极产生相关电位差E,经放大处理后，通过标准曲线与待测离子电位差值对照，即可求的各离子的浓度值，并显示或打印出来。 公式：Eise=k±(2.303rt) / (nf) lnax= Eise=k±(2.303rt) / (nf) lncxfx N为电荷量 ±是指阳 阴离子选择电极 cx指被测离子浓度Fx是

15、被测离子活度系数。K为常数。对于ph的测定，测量电极为玻璃电极，ph敏感程度取决于电极的玻璃膜。电化学分析仪器基本结构：离子选择性电极，参比电极，分析箱，测量电路，控制电路，驱动电机和显示器。血气分析仪1定义：血气分析仪利用电极对人体血液中的酸碱度，二氧化碳氧分压，和氧分压进行测定的仪器。2工作原理：测量过程中，被测血液样本在管路系统的抽吸下，进入样品室内的测量毛细管中。关闭上开有几个小孔，孔内插有ph,Pco2,PO2,等测量电极和一只参比电极。样品中ph,Pco2,PO2同时被这些电极所感测。电极产生对应的参数电信号，最后经过放大，模数转换送到微处理器处理运算，在传至各显示装置。3其中用毛

16、细管ph玻璃电极和甘汞电极测量ph，用气敏电极测量氧分压和二氧化碳分压。4血气分析仪结构（一）电极 即电化学传感器（二）管路 ：气路，流路，电路。简述电阻抗（库尔特）血细胞检测原理：血细胞与等渗电解质溶液相比为相对的不良导体，其电阻值大于稀释溶液的阻值；当血细胞通过检测器的孔径感受区时，检测器内外电极之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大，产生电压脉冲信号；脉冲信号数等于通过的细胞数，脉冲信号幅度大小与细胞大小成正比。第十一章 临床免疫检验仪器1、 酶免疫分析技术的分类根据测定过程中是否需要分离结合的和游离的酶标记物分为均相和异相酶免疫检测，异相又分为固相和液相酶免疫检测（1）均相：以激素、药物等小

17、分子抗原或半抗原为主，测定过程中无需分离结合的和游离的酶标记物，实验在液相中进行，可直接用自动生化分析仪进行测定。（2）异相：是在抗原抗体反应达到平衡后，将游离的和与抗原或抗体结合的酶标记物加以分离，在通过底物显色加以测定。（3）区别：均相在测定时不需要分离标记物，异相则是需要分离后再进行测定。2、发光免疫分析仪优点：发光免疫分析体系中，标记的抗原越多，光强度增加越大，因而免除了抗原抗体复合物与游离抗原、抗体的分离步骤。（一）全自动化学发光免疫分析系统 1、测定原理：小分子抗原物质使用竞争法，大分子抗原物质使用夹心法。 2、结构：由主机和微机构成。3、酶标仪的工作原理： 原理是分光光度法，按照

18、比色原理分析抗原抗体含量（二）全自动电化学发光免疫分析仪1、测定原理：将待测标本与包被抗体的顺磁性微粒和发光标记的抗体加在反应杯中共同温育，形成复合物。复合物被吸入流动室，同时用TPA缓冲液冲洗。当磁性微粒流经点击表面时被安装在电极下的磁铁吸引住，而游离的发光剂标记抗体被冲洗走。同时在电极上加压，启动电化学发光反应，产生点化学发光，光强与待测抗原的浓度成正比。2、组成：样品盘、试剂盘、温育反应盘、电化学监测系统、计算机控制系统第十二章 POCT定义：即时检验，指在病人旁边进行的临床检测，通常不一定是临床检验师来进行。是在采样现场即刻进行分析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结

19、果的一类新方法第十三章 PCR核酸扩增仪1、PCR技术原理步骤：（1）DNA的变性（2）模版DNA与引物的退火（3）引物的延伸2、循环过程：模板DNA的变性：模板DNA经加热至94左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至4060左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；引物的延伸：DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶的作用下，于72左右，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互

20、补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需24分钟，23小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。3、控温方式：（1）水浴锅控温（不方便、控温不稳定，不常用）（2）压缩机控温（比水浴锅方便，故障率高，边缘效应严重）（3）半导体控温（可以高精度控温，仍有边缘效应）（4）离心式空气加热控温（能满足荧光定量PCR高标准）第十四章 全自动DNA测序仪1、工作原理：主要利用sanger双脱氧链末端终止法或maxmgilbert化学降法，原理虽然不同，都根据在某一个固定的点开始核苷酸的延伸，随即在一个碱基终止，产生AT

21、CG四组不同长度的一系列核苷酸链，在电泳中片段分离，检测从而获得序列（一）双脱氧链末端终止法测序原理：利用PCR，但反应体系中除了dNTP外，还有ddNTP。ddNTP可掺入到正在延伸的DNA链中，但不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA链在此终止。由于存在ddNTP与dNTP的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。2、融合的技术：PCR技术（不准确）第十五章 流式细胞仪1、原理：将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。流式细胞仪通常以激光作为发光源，照射细胞悬液发出荧光，这些荧光信号的

22、强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，就能分析待测细胞的各种数据。2、结构：流动室、液流驱动系统、激光光源及光束形成系统、光学系统、信号检测与分析系统、细胞分选系统生物安全柜分为 级.级生物安全柜 是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜。由于不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染，所以对进入安全柜的空气洁净度要求不高。空气通过窗前操作口向内吸入柜内，流过工作台表面后被过滤并经排气口排到大气。空气的流动为单项、非循环式。前窗操作口向内吸入的负压气流保护操作人员的安全，从安全柜内排除的气流经高效空气过滤器过滤后排出，

23、保护环境不受污染。级生物安全柜 是指用于保护操作人员、环境以及样品安全的通风安全柜，也是临床生物防护中应用最广泛的一类安全柜级生物安全柜按排放气流占系统总流量的比例及内部设计结构，将其划分为A1、A2、B1、B2四个类型。指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜；A1型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。A2型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。A2型安全柜的负压环绕污染区域的设计，阻

24、止了柜内物质的泄漏。二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜。连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。B1型70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区。B2型为100%全排型安全柜，无内部循环气流，可同时提供生物性和化学性的安全控制。级生物安全柜 是具有完全密闭、不透气结构的通风安全柜。工作空间内为经高效空气过滤净化的无涡流的单向流空气。安全柜正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作出口，在安全柜密闭连接的橡皮手套完成的

25、。安全柜内对实验室的负压应不低于120Pa。电热恒温培养箱适合于普通的细菌培养，并常用于有关细胞培养的器材和实际的预温。电热恒温培养箱有隔水式电热恒温培养箱和器套式电热恒温培养箱两种，两者基本结构相似，只是加热方式不同，前者的温度变化幅度比后者小，因而在使用上更具有优势。实验室自动化系统，是为了实现临床实验室内一个或几个监测子系统，如临床化学、血液学和免疫学等的结合，将同一厂家或不同厂家相互关联的自动化分析仪器以及分析前和分析后的实验室吃力装置，通过自动化输出轨道和信息网络进行连接，形成流水作业，构成全自动化流水电泳指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。电泳速率，单位时间内，带电粒子在毛细管中的定向移动距离。凝胶电泳 由区带电泳派生出的