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1、第五篇 细胞疗法与组织修复第11讲 组织工程第2节 组织工程应用18961920198720061.组织工程牙齿2.组织工程耳3.组织工程皮肤4.组织工程肾脏人的牙齿？一 组织工程牙齿细胞：牙齿上皮细胞、间叶细胞支架：胶原蛋白凝胶培养基：D-MEM（Sigma），10%FCSPDL:周围韧带vWF:血管假性血友病因子NF-H:神经丝蛋白补充文献1:2013年3月4日，英国伦敦国王学院（Kings CollegeLondon）的研究人员提取成人牙龈组织细胞，将其与取自老鼠的间质细胞结合，成功培育出一颗新牙。研究人员从成人患者的牙龈中提取上皮细胞，在实验室里大量培养，再将它们与老鼠的间质细胞混合。

2、这种间质细胞被培养出“诱导作用”“指示”上皮细胞开始发育成为牙齿。研究人员把这种细胞混合物移植到老鼠身上，结果长出拥有成活根部的人鼠混合牙。补充文献2:D：牙本质；DP：牙髓；C： 牙骨质二 组织工程耳先以3D摄影机围绕患者头部拍摄耳朵照片，然后把几何构造图输入电脑，用3D打印机输出，制成耳朵软模型。接着再把充满牛耳软骨细胞的特殊胶原蛋白胶注入软骨，形成软骨骨架。几周内软骨就会逐渐成长，取代覆盖其外的胶原蛋白，3个月后，柔软且具有功能的外耳就此长成。FC：纤维鞘Cartilage：软骨EF：弹性蛋白纤维三 组织工程皮肤中国每年烧伤、溃疡等皮肤疾病1500万人，需要皮肤移植的约350万，需4亿立

3、方厘米。人工表皮、复合人工皮A表皮B 表皮网状棘C 真皮乳头D真皮E 皮下组织F毛发组织工程皮肤技术路线构建步骤（1）种子细胞与培养液成纤维细胞：DMEM培养基、10%胎牛血清、青霉素、链霉素等。表皮角质形成细胞：DMEM+Ham F-12培养基、表皮生长因子等。（2）支架材料聚羟基乙酸（PGA）。（3）构建成纤维细胞-PGA复合物酶法消化收集真皮成纤维细胞，接种在PGA上，加入培养液培养。（4）接种表皮角质形成细胞在前面的复合物上，更换表皮角质形成细胞培养基培养5天左右。（5）双层皮肤成熟将复合物放在可渗透膜上，进行气-液界面培养，促进表皮角质形成细胞的进一步分化。再培养1周，形成含真皮和表皮两层结构的组织工程化皮肤。难题：1.血管化：血管生成是指内皮细胞构筑的毛细血管分支和伸展。血管生成有助于损伤组织的修复。2.毛囊、汗腺等再生。所以美容慎用。3.排异性。我国人造皮肤2007年第四军医大学开发成功，进入临床阶段。四 组织工程肾脏细胞：新生大鼠肾脏细胞人脐带静脉上皮细胞支架材料：去除了细胞的肾脏，包含皮层、脉管、髓质、尿管等。培养基：REGM、EGM2（Lonza）大鼠人、猪组织工程问题与挑战1.干细胞诱导分化技术2.种子细胞分离与培养3.接种支架材料的方法4.支架材料的设计与优化5.细胞因子的释放、与支架材料相结合的设计，种子细胞表达6.血管化7.复杂性：多细胞协同培养、

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