课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数_第1页
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数_第2页
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数_第3页
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数_第4页
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数_第5页
已阅读5页,还剩16页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、 课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、基础知识一、基础知识1、植物是怎样吸收尿素的、植物是怎样吸收尿素的(1)尿素的分子式:)尿素的分子式:CO(NH2)2(2 2)植物吸收矿质元素的主要形式:离子。)植物吸收矿质元素的主要形式:离子。(3)尿素怎样才能转变为离子CO(NHCO(NH2 2) )2 2 + H + H2 2O COO CO2 2 + 2NH + 2NH3 3细菌脲酶细菌脲酶(4 4)产生脲酶的细菌即为能分解尿素的细菌)产生脲酶的细菌即为能分解尿素的细菌2 2、 TaqDNA聚合酶与Taq细菌的分离(1) TaqDNA聚合酶:在体外高温条件下催化DNA的复制。(2) Taq

2、细菌分离环境:热泉。3、 Taq细菌分离启示:要分离人民人们所需要的目的菌要从相应的自然中分离。如:分离能分离尿素的微生物要从土壤中使用尿素的土壤;分离耐盐微生物要从滩涂和盐碱地分离;分离低温淀粉酶的微生物要从低温面粉加工厂的土壤和排水沟中。4、分离所需的微生物所需的培养基:选择培养基 固体培养基。 培养基的氮源是尿素KH2PO4 1.4g 提供无机盐Na2HPO4 2.1g 提供无机盐MgSO47H2O 0.2g 提供无机盐葡萄糖 10.0g 提供碳源与能量尿素 1.0g 提供氮源琼脂 15.0g 凝固剂将上述物质溶解后,用 提供水分蒸馏水定容到1000mL。1 1、利用尿素作为唯一氮源的培

3、养基分离、利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物只是一种细菌吗出的微生物只是一种细菌吗? ?思考:思考: 不是,有多种,只要能产生脲酶的微生物均能分离,因此,菌落的形态有多种。2 2、请你提供一种方法,判断分解尿素的、请你提供一种方法,判断分解尿素的细菌确实能将尿素分解成氨。细菌确实能将尿素分解成氨。思考:思考: 方法:在以尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,接种培养该细菌,若指示剂变红,说明该种菌分解了尿素。3 3、要验证以尿素为唯一氮源的培养基对、要验证以尿素为唯一氮源的培养基对土壤中的细菌确实具有选择作用,你该如土壤中的细菌确实具有选择作用,你该如何设计实验。何设计实验。思考:

4、思考: 思路:制备牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组,尿素为唯一氮源的培养基为实验组,接种等量的从同一土壤中采集的细菌,培养、计数并比较两组培养基上的菌落数。(三)、比浊法:是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,所以,可用光电比色计测定菌液。(四)膜过滤法:是当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上 ( 或一定面积中 ) 的细菌数 (一)分离方法:尿素唯一氮源选择分离法。(一)分离方法:尿素唯一氮源选择分离法。(二)统计方法:稀释涂布平板法。(二)统计方法:稀

5、释涂布平板法。(三)操作方法(三)操作方法 1 1、制备培养基(按以下成分配制)、制备培养基(按以下成分配制) KH2PO4 1.4g ; Na2HPO4 2.1g ; MgSO47H2O 0.2g ;葡萄糖;葡萄糖 10.0g ; 尿素尿素 1.0g ; 琼脂琼脂 15.0g 将上述物质将上述物质 溶解后,用蒸馏水定容到溶解后,用蒸馏水定容到1000mL。三、体验分离、计数土壤中分解尿素三、体验分离、计数土壤中分解尿素的细菌的实验操作的细菌的实验操作2、土壤取样、土壤取样从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土土3-8cm左右,再取样,将样品装入事先左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。准备好的信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。用前都要灭菌。3 3、样土的稀释、样土的稀释细菌用细菌用4 4、5 5、6 6涂布涂布放线菌用放线菌用3 3、4 4、5 5涂布涂布真菌用真菌用2 2、3 3、4 4涂布涂布讨论:两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果。 1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230。 2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板,统计的菌落数分别为21、212、256

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论