天然药物化学chapt1 三

1、课课前前复复习习1.1.利用较少溶剂提取有效成分，提利用较少溶剂提取有效成分，提取较为完全的方法是（取较为完全的方法是（ ）A A 连续回流法连续回流法B B 加热回流法加热回流法C C 透析法透析法D D 浸渍法浸渍法A2.2.依次采用不同极性溶剂来提取药依次采用不同极性溶剂来提取药效成分应采取的极性顺序是（效成分应采取的极性顺序是（ ）A H2O CH3OH EtOAC CH2CI2 PEA H2O CH3OH EtOAC CH2CI2 PEB PE CH2CI2 EtOAC CH3OH H2OB PE CH2CI2 EtOAC CH3OH H2OC PE H2O CH3OH EtOAC

2、CH2CI2C PE H2O CH3OH EtOAC CH2CI2D PE CH3OH EtOAC CH2CI2 H2OD PE CH3OH EtOAC CH2CI2 H2OB3.3.下列溶剂中溶解化学成分范围较下列溶剂中溶解化学成分范围较广的溶剂是（广的溶剂是（ ）A A 水水B B 乙醇乙醇C C 乙醚乙醚D D 苯苯B4.4.植物的醇提取浓缩液中加入大量植物的醇提取浓缩液中加入大量水，可沉淀（水，可沉淀（ ）A A 树胶树胶B B 蛋白质蛋白质C C 树脂树脂D D 氨基酸氨基酸C5.5.拟提取挥发性成分宜选用（拟提取挥发性成分宜选用（ ）A A 回流法回流法B B 渗漉法渗漉法C C

3、水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法D D 煎煮法煎煮法C6.6.超临界流体萃取法适用于提取超临界流体萃取法适用于提取（ ）A A 极性大的成分极性大的成分B B 极性小的成分极性小的成分C C 离子型化合物离子型化合物D D 能气化的成分能气化的成分B7.7.索氏提取回流法与常用回流提取索氏提取回流法与常用回流提取法相比，其优越性是（法相比，其优越性是（ ）A A 节省时间且效率高节省时间且效率高B B 节省试剂且效率高节省试剂且效率高C C 受热时间短受热时间短D D 提取装置简单提取装置简单B8.8.下列化合物主要生物合成途径是下列化合物主要生物合成途径是（ ）A MVAA MVA途径途径B B 桂

4、皮酸途径桂皮酸途径C AA-MAC AA-MA途径途径D D 氨基酸途径氨基酸途径COHOHOCH3CH3H3CO第三节第三节提取分离方法提取分离方法（Extract and isolateExtract and isolate）二、分离方法二、分离方法（二）根据物质在两相溶剂中（二）根据物质在两相溶剂中分配比不同进行分离分配比不同进行分离 将两相溶剂中的一相涂覆在硅胶等将两相溶剂中的一相涂覆在硅胶等多孔载体上，作为多孔载体上，作为固定相固定相，填充在色谱，填充在色谱管中，然后加入与固定相不相混溶的另管中，然后加入与固定相不相混溶的另一相溶剂（一相溶剂（流动相流动相）冲洗色谱柱。这样，）冲洗色

5、谱柱。这样，物质同样可在两相溶剂中相对作逆流移物质同样可在两相溶剂中相对作逆流移动，在移动过程中不断进行动态分配而动，在移动过程中不断进行动态分配而得以分离。这种方法称之为液得以分离。这种方法称之为液- -液分配液分配柱色谱法。柱色谱法。（1）正相色谱与反相色谱：）正相色谱与反相色谱： 载载 体：硅胶、纤维素、硅藻土体：硅胶、纤维素、硅藻土 固定相：水、缓冲液固定相：水、缓冲液 流动相：氯仿、乙酸乙酯、丁醇流动相：氯仿、乙酸乙酯、丁醇分离生物碱、苷、糖类大极性分子分离生物碱、苷、糖类大极性分子正相色谱正相色谱(normal phase chromatography）：固定相：石蜡油固定相：石蜡

6、油流动相：水、甲醇、乙睛流动相：水、甲醇、乙睛载载 体：体：甾体、高级脂肪酸小分子等甾体、高级脂肪酸小分子等反相色谱反相色谱（reverse phase partition chromatography）：RP-2、 RP-8 、 RP-18RP-18RP-8 PR-2 SiOH+X SiRSiOSiR+HX(X = 卤 原 子 , 烷 氧 基 )硅胶亲水性表面化学修饰RP-2亲油性表面RP-8RP-18(2) (2) 加压液相色谱加压液相色谱P约约2.02105 Pa 快速色谱快速色谱 P5.05105 Pa LPLC 20.2105-5.05105 Pa MPLC P20.2105Pa H

7、PLC柱子名称柱子名称键合固定相组成键合固定相组成适用分离方式适用分离方式Zorbax ODS十八烷基组，十八烷基组，-C18H37反相反相Zorbax C8辛基组，辛基组，-C8H17反相反相Zorbax NH2氨基组，氨基组，-NH2正相、反相、阴离子正相、反相、阴离子Zorbax CN氰基丙基组，氰基丙基组，-C3H7CN反相、正相反相、正相Zorbax TMS三甲基硅组，三甲基硅组，-Si(CH3)3反相反相Zorbax SAX季铵组，季铵组，-N+R3阴离子交换阴离子交换Zorbax SIL氧化硅，氧化硅，-SiOH吸附吸附Zorbax SCX-300磺酸基组，磺酸基组，-SO3H阳

8、离子交换阳离子交换 HPLC用用Zorbax系列填充柱系列填充柱 图图 1-20 高压液相色谱装置的模式图高压液相色谱装置的模式图A溶剂贮槽溶剂贮槽 B. 高压液送泵高压液送泵 C. 防止脉冲装置防止脉冲装置 D. 色谱柱色谱柱 E. 进样阀进样阀 F. 检出装置检出装置 G. 记录装置记录装置 H.计算机计算机表表 1-2 常用常用Lobar柱的型号及可能分离规模柱的型号及可能分离规模规规格格填充剂填充剂长度长度(mm)内径内径(mm)外径外径(mm)上柱可能试样量上柱可能试样量ALiChroprep Si602401013 0.2 g / 0.3 1.0 mlALiChroprep Rp-

9、82401013 0.2 gBLiChroprep Si603102528 1.0 g / 1.0 5.0 mlBLiChroprep DIOL3102528 1.0 g / 1.0 5.0 mlBLiChroprep Rp-83102528 1.0 gCLiChroprep Si604403742 3.0 g / 2.0 10.0 mlCLiChroprep Rp-84403742 3.0 g / 2.0 10.0 ml图图1-21 不同流速下流动相的流态不同流速下流动相的流态2 2）优点与不足）优点与不足优点：优点： 生物样品在线直接分析、速度生物样品在线直接分析、速度快、灵敏度高、效率高

10、、选择性好快、灵敏度高、效率高、选择性好不足：不足： 污染污染3 3）应用）应用类型类型固定相固定相适用化合物类适用化合物类型型商品柱类型商品柱类型反相柱反相柱 烷基键合硅胶烷基键合硅胶如如C18,C8,C2,苯基键合硅胶苯基键合硅胶不同极性的不同极性的中性或非极性中性或非极性Cohesive Turbo C18,C8Cohesive Cyclone, Cohesive Cyclone-POasis HLB正相柱正相柱 调整硅胶极性调整硅胶极性极性化合物极性化合物Cohesive PolarPlus离子交离子交换柱换柱硅胶或氨丙级硅胶或氨丙级或羧酸结合体或羧酸结合体强酸或胺强酸或胺例如季胺或磺

11、例如季胺或磺酸酸Cohesive SAX, 混合柱混合柱 离子交换和反离子交换和反相吸附相吸附极性和弱酸性极性和弱酸性或基本化合物或基本化合物Cohesive涡流色谱柱的主要分类及性质涡流色谱柱的主要分类及性质图图1-22 离子对色谱分离示意图离子对色谱分离示意图1）离子对试剂的选择原则）离子对试剂的选择原则表表1-4 反相离子对色谱中离子对试剂的选择反相离子对色谱中离子对试剂的选择离子对选择离子对选择主要应用对象主要应用对象季铵类（如四甲铵、四丁季铵类（如四甲铵、四丁铵、十六烷基三甲铵等）铵、十六烷基三甲铵等）强酸、弱酸、磺酸染料、强酸、弱酸、磺酸染料、羧酸、氢化考地松及其盐羧酸、氢化考地松

12、及其盐叔胺（如三辛胺）叔胺（如三辛胺）磺酸盐、羧酸等磺酸盐、羧酸等烷基磺酸盐烷基磺酸盐（如甲烷、戊烷、己烷、（如甲烷、戊烷、己烷、庚烷、樟脑磺酸盐）庚烷、樟脑磺酸盐）强碱、弱碱、强碱、弱碱、benzalkonium盐、儿茶酚盐、儿茶酚胺、肽、生物碱等胺、肽、生物碱等高氯酸高氯酸可与广泛范围的碱性物质可与广泛范围的碱性物质生成稳定的离子对生成稳定的离子对（如有机胺、氨基酸、肽（如有机胺、氨基酸、肽等）等）烷基磺酸盐（如辛烷、癸烷基磺酸盐（如辛烷、癸烷、十二烷基磺酸盐）烷、十二烷基磺酸盐）与烷基磺酸盐相似，选择与烷基磺酸盐相似，选择性有不同性有不同2）分配系数及色谱行为）分配系数及色谱行为3）应用

13、）应用 分配系数与液分配系数与液- -液色谱中的液色谱中的K K碳链长度增加，碳链长度增加，K K（或（或k k）相应增大）相应增大生物碱、有机酸、磺胺类药物、生物碱、有机酸、磺胺类药物、某些抗生素与维生素等某些抗生素与维生素等体内药物分析体内药物分析 物理吸附：物理吸附： 半化学吸附：半化学吸附： 化学吸附：化学吸附：物理吸附物理吸附(physical adsorption)(physical adsorption)特点：特点： 溶质、溶剂与吸附剂表面分子的分子溶质、溶剂与吸附剂表面分子的分子间作用力间作用力 无选择性、吸附与解吸过程可逆无选择性、吸附与解吸过程可逆 硅胶、氧化铝、活性炭为常

14、用吸附剂硅胶、氧化铝、活性炭为常用吸附剂化学吸附化学吸附( chemical adsorption)( chemical adsorption)特点：特点： 酸性物质被碱性吸附剂吸附或碱性物酸性物质被碱性吸附剂吸附或碱性物质被酸性吸附剂吸附质被酸性吸附剂吸附 选择性、吸附牢固，不可逆选择性、吸附牢固，不可逆半化学吸附半化学吸附( semi-chemical ( semi-chemical adsorption)adsorption)特点：特点： 介于物理与化学吸附之间介于物理与化学吸附之间 聚酰胺与黄酮、醌类之间氢键吸附聚酰胺与黄酮、醌类之间氢键吸附吸附剂、溶质、溶剂三要素吸附剂、溶质、溶剂三

15、要素1. 1. 物理吸附基本规律：物理吸附基本规律：相似者易于吸附相似者易于吸附硅胶、氧化铝为极性吸附剂硅胶、氧化铝为极性吸附剂特点：特点： 对极性物质具有较强的亲和力，对极性物质具有较强的亲和力，极性强的溶质将被优先吸附。极性强的溶质将被优先吸附。 溶剂极性越弱，则吸附剂对溶质溶剂极性越弱，则吸附剂对溶质表现出较强吸附力。溶剂极性增强表现出较强吸附力。溶剂极性增强，吸附剂对溶质的吸附力随之减弱，吸附剂对溶质的吸附力随之减弱硅胶、氧化铝为极性吸附剂硅胶、氧化铝为极性吸附剂特点：特点： 溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，但一旦加入极性较强的溶剂时，但一旦加入极性较强的溶剂时

16、，又可被后者置换洗脱下来。又可被后者置换洗脱下来。活性炭为非极性吸附剂活性炭为非极性吸附剂 特点：特点： 非极性物质具有较强的亲和能力非极性物质具有较强的亲和能力 在水中对溶质表现出强的吸附力在水中对溶质表现出强的吸附力 溶剂极性降低，则活性炭溶质的溶剂极性降低，则活性炭溶质的能力也随之降低。能力也随之降低。活性炭为非极性吸附剂活性炭为非极性吸附剂 特点：特点： 从活性炭上洗脱被吸附物质时洗从活性炭上洗脱被吸附物质时洗脱溶剂的洗脱能力将随溶剂极性的脱溶剂的洗脱能力将随溶剂极性的降低而增强降低而增强RCOOHArOHROHRNH2H2ORCHORCORRCOORRORRXRH大小极性+NH3CH

17、RCOO-氨基酸CHOCOHCHHOCOHCOHCH2OHHHH葡萄糖CH3(CH2)16COOH硬脂酸RCONRRRNHR RNRR,2极性及其强弱判断极性及其强弱判断（1）官能团）官能团 表表 1-6 黄花夹竹桃果实中的强心苷成分黄花夹竹桃果实中的强心苷成分名称名称RRR黄夹苷黄夹苷ACHO(D-Glc)2H黄夹苷黄夹苷BCH3(D-Glc)2H黄夹次苷黄夹次苷ACHOHH黄夹次苷黄夹次苷BCH3HH黄夹次苷黄夹次苷CCH2OHHH黄夹次苷黄夹次苷DCOOHHH单乙酰黄夹次单乙酰黄夹次苷苷BCH3HCOCH3OCH3ROOCH3OOROHOOR苷苷A 苷苷B次苷次苷D次苷次苷C 次苷次苷A

18、 次苷次苷B 单乙酰次苷单乙酰次苷B（2）官能团）官能团种类、数量等种类、数量等相关相关常用溶剂的介电常数及其极性排列常用溶剂的介电常数及其极性排列溶剂溶剂水溶度水溶度(g / 100 g)极性极性己己 烷烷1.880.007弱弱苯苯2.290.06乙醚（无水）乙醚（无水）4.471.3三三 氯氯 甲甲 烷烷5.200.1乙乙 酸酸 乙乙 酯酯6.113.0乙乙 醇醇26.0甲甲 醇醇31.2水水81.0强强（3）溶剂）溶剂3.3.简单吸附法进行物质的浓缩与精制简单吸附法进行物质的浓缩与精制1 1）对杂质的吸附）对杂质的吸附 脱色、脱臭等脱色、脱臭等2 2）对生物碱的分离）对生物碱的分离 活性炭提取一叶萩碱活性炭提取一叶萩碱* * *4 4、吸附柱色谱法用于物质的分离、吸附柱色谱法用于物质的分离（硅胶、氧化铝）（硅胶、氧化铝）* * *5.5.聚酰胺吸附色谱聚酰胺吸附色谱