灭菌与无菌制剂

1、 第三章第三章 灭菌制剂与无菌制剂灭菌制剂与无菌制剂 （注射剂、眼用制剂）（注射剂、眼用制剂）（p47） 第一节第一节 概述概述一、基本概念一、基本概念： 灭菌灭菌：采用采用物理物理或或化学方法化学方法，杀灭或除去所有杀灭或除去所有 致病和非致病微生物繁殖体和芽孢。致病和非致病微生物繁殖体和芽孢。 无菌无菌：不存在任何活的微生物的状态。：不存在任何活的微生物的状态。 防腐（防腐（抑抑菌菌）：抑制微生物生长与繁殖的手段。：抑制微生物生长与繁殖的手段。 消毒消毒：杀灭或除去所有：杀灭或除去所有微生物。微生物。第一节第一节 概述概述灭菌制剂：灭菌制剂： 采用某种采用某种物理物理或或化学方法化学方法，

2、或或所所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。无菌制剂：无菌制剂：采用采用无菌操作无菌操作技术，技术，制备的不含制备的不含任何活的任何活的微生物微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。繁殖体和芽孢的一类药物制剂。限制活限制活菌种类和数量菌种类和数量。第一节概述第一节概述二、灭菌与无菌技术二、灭菌与无菌技术 干热灭菌法干热灭菌法 物理灭菌法物理灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法 过滤灭菌法过滤灭菌法 灭菌法灭菌法 射线灭菌法射线灭菌法 化学灭菌法化学灭菌法 无菌操作法无菌操作法 蛋白质、核酸破坏蛋白质、核酸破坏第一节第一节 概述概述二、灭菌与无菌技术二、灭菌与无菌技

3、术 （一）物理灭菌法（一）物理灭菌法 利用微生物蛋白质、核酸遇热、射线不利用微生物蛋白质、核酸遇热、射线不稳定，采用热、射线、滤过等稳定，采用热、射线、滤过等物理手段物理手段达到达到灭菌目的。灭菌目的。 （一）物理灭菌法（一）物理灭菌法 1.1.干热灭菌法干热灭菌法 （热穿透力较差）（热穿透力较差） 火火 焰焰 物品与用具物品与用具 干热空气干热空气 耐高温玻耐高温玻 璃与金属制璃与金属制 品及药品品及药品 热空气灭菌柜-烤箱控制面板 灭菌柜门 搬运车 灭菌柜外壳 活动格车 第一节第一节 概述概述 2.2.湿热灭菌法湿热灭菌法 流通蒸汽灭菌流通蒸汽灭菌 消毒、不耐热制剂消毒、不耐热制剂 煮沸灭

4、菌煮沸灭菌 消毒消毒 低温间歇式灭菌低温间歇式灭菌( (巴氏巴氏) ) 对热敏感制剂对热敏感制剂 耐高温高压耐高温高压 影响热压灭菌的因素：影响热压灭菌的因素： 微生物的数量和种类微生物的数量和种类 芽胞芽胞 繁殖体繁殖体 衰老体衰老体 蒸气性质蒸气性质 饱和蒸气饱和蒸气( (湿、过湿、过) ) 除去空气除去空气 药品稳定性和灭菌时间药品稳定性和灭菌时间 其他其他 pHpH环境、介质营养成分环境、介质营养成分高压灭高压灭菌锅菌锅（一）物理灭菌法（一）物理灭菌法 3.3.射线灭菌法射线灭菌法 辐射灭菌辐射灭菌 不耐热不耐热 紫外线灭菌（紫外线和臭氧）：空气灭菌紫外线灭菌（紫外线和臭氧）：空气灭菌

5、 微波灭菌微波灭菌 不耐热不耐热 4.4.滤过除菌法滤过除菌法（机械除菌）（机械除菌） 0.22m0.22m或或0.3m0.3m的微孔滤膜滤器；的微孔滤膜滤器； G6G6号垂熔玻璃漏斗（芽胞号垂熔玻璃漏斗（芽胞0.5m0.5m）内装微孔滤膜 进液口出液口微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器钛滤器钛滤器垂熔玻璃滤器第一节第一节 概述概述（二）化学灭菌法（二）化学灭菌法 . .气体灭菌法：用化学消毒剂形成的气体杀气体灭菌法：用化学消毒剂形成的气体杀 灭微生物的方法。环氧乙烷、灭微生物的方法。环氧乙烷、 甲醛、臭氧等。甲醛、臭氧等。 2.2.药物灭菌法：适用于皮肤，设备的消毒。药物灭菌法：适用于皮肤，设备的消毒

6、。 75%75%乙醇、乙醇、0.1-0.2%0.1-0.2%新洁尔灭等。新洁尔灭等。（三）灭菌操作法（三）灭菌操作法定义定义 整个过程在无菌条件整个过程在无菌条件条件条件 在无菌操作室或无菌柜内在无菌操作室或无菌柜内 一切用具、材料以及环境一切用具、材料以及环境 灭菌法灭菌法 采用层流洁净工作台采用层流洁净工作台适用物质适用物质 不耐热的药物注不耐热的药物注射射剂、剂、 眼用溶液、眼用软膏眼用溶液、眼用软膏 或皮试液等。或皮试液等。层流洁净工作台第一节概述第一节概述（四）灭菌参数：（四）灭菌参数：D、Z、F、F0值（值（p53 了解）了解） 1. D值值： 在一定温度下，在一定温度下，微生物（

7、即残存微生物（即残存10） 所需的灭菌所需的灭菌。 研究表明微生物受高温杀灭时，在一定温度范围研究表明微生物受高温杀灭时，在一定温度范围 内其死亡速度属一级过程内其死亡速度属一级过程 D值随微生物的种类、环境和灭菌温度变化而异。值随微生物的种类、环境和灭菌温度变化而异。第一节概述第一节概述2. Z值值： 降低一个降低一个lgDlgD值所需升高的值所需升高的。即灭菌时间减少到原来即灭菌时间减少到原来1/101/10所需升高的所需升高的或在相同灭菌时间内，杀灭或在相同灭菌时间内，杀灭99%99%微生物所需提高微生物所需提高的的。第一节概述第一节概述3.3.F F值与值与F0F0值值： F F值值为

8、在一定温度（为在一定温度（T T）下给定）下给定Z Z值所产生的灭菌效力值所产生的灭菌效力与与T To o给定给定Z Z值所产生的灭菌效率相同时所相当的时间，值所产生的灭菌效率相同时所相当的时间，以以minmin为单位。为单位。F F值常用于值常用于干热灭菌干热灭菌。F F0 0值值为一定灭菌温度（为一定灭菌温度（T T）下）下Z Z值为值为10 10 所产生的灭所产生的灭菌效率与菌效率与121121、Z Z值为值为10 10 所产生的灭菌效率相同所产生的灭菌效率相同时所相当的时间（时所相当的时间（minmin）。也就是说）。也就是说F F0 0是将各种灭菌是将各种灭菌温度的灭菌效果转换为温度

9、的灭菌效果转换为121121灭菌的等效值。目前灭菌的等效值。目前F F0 0用于用于热压灭菌热压灭菌。一般要求一个灭菌程序（加热及冷却。一般要求一个灭菌程序（加热及冷却过程）的过程）的。 第一节第一节 概述概述三三. .空气净化技术空气净化技术 一般采用空气过滤法。多孔过滤介质，一般采用空气过滤法。多孔过滤介质，除除去空气中的尘埃、微生物去空气中的尘埃、微生物 1.1.空气净化标准：空气净化标准：级（粒级（粒/ /英尺英尺3 3） 100100 10000 10000 100000 100000 100000 100000第一节第一节 概述概述100100级级洁净度级别洁净度级别尘粒最大允许数

10、尘粒最大允许数/L/L微生物最大允许数微生物最大允许数 0.50.5 m m 5 5 m m浮游菌浮游菌/ / m m3 3沉降菌沉降菌/ / m m3 33 .53 .5 5 51 110 00010 000级级350 350 1001003 3100 000100 000级级3 500 3 500 5005001010100 000100 000级级3500035000 1 0001 0001515新新GMPGMP洁净度标准洁净度标准 5Pa,10Pa,18-26,40-60%5Pa,10Pa,18-26,40-60%第一节第一节 概述概述 2.2.浮尘浓度测定法和无菌检查法（浮尘浓度测定

11、法和无菌检查法（p57p57） （1 1）浮尘浓度测定法）浮尘浓度测定法 （2 2）无菌检查法）无菌检查法 应该在环境洁净度应该在环境洁净度10000 or 10000 or 局部局部100100级级 的层流区的层流区 或或隔离系统隔离系统进行进行 洁净室的设计（视频）洁净室的设计（视频）布置尽量紧凑布置尽量紧凑 单高层、全密闭、无窗、全部空调单高层、全密闭、无窗、全部空调外部外部设有厕所、洗澡室、更衣室、缓冲室、风淋室等设有厕所、洗澡室、更衣室、缓冲室、风淋室等洁净室的洁净度从洁净室的洁净度从低到高低到高 缓冲间洁净度高的在中缓冲间洁净度高的在中 心位置心位置明确人流、物流和空气流向明确人流

12、、物流和空气流向 人流、物流分开人流、物流分开与相邻空间与相邻空间 相对正压相对正压第一节第一节 概述概述3.3.净化室的设计（净化室的设计（p59p59） （1 1）净化系统设计）净化系统设计- - 初、中、高三级过滤，正压状态初、中、高三级过滤，正压状态 （2 2）洁净区的气流要求）洁净区的气流要求 层流层流 100100级级 乱流乱流 -10000-10000级级 （3 3）洁净区的基本布局）洁净区的基本布局 为满足制剂要求，生产厂区被分为为满足制剂要求，生产厂区被分为一般生产区、一般生产区、控制区、洁净区、无菌区。控制区、洁净区、无菌区。一般生产区无洁净度要求，一般生产区无洁净度要求，

13、控制区要求达到控制区要求达到1010万级，洁净区要求达到万级，洁净区要求达到1000010000级，无级，无菌区达到菌区达到100100级。为消除人为污染，降低成本，可在级。为消除人为污染，降低成本，可在1000010000级洁净室内放置级洁净室内放置100100级超净工作台。级超净工作台。超净工作台超净工作台空气洁净技术与洁净室的标准空气洁净技术与洁净室的标准 洁净室（区域）空气洁净度级别洁净室（区域）空气洁净度级别尘粒最大允许数/立方米 微生物最大允许数0.5m 5m 浮游菌/立方米 沉降菌/皿100级 3500 0 5 110,000级 350000 2000 100 3100,000级

14、 3500000 20000 500 10300,000级 10500000 60000 1000 15 洁净区的管理洁净区的管理n人员数量应严格控制。人员数量应严格控制。 n洁净室（区）与非洁净室（区）之间必须设置缓冲设施，洁净室（区）与非洁净室（区）之间必须设置缓冲设施，人、物流走向合理。人、物流走向合理。n100100级级 不得设置地漏，操作人员不应裸手操作，当不不得设置地漏，操作人员不应裸手操作，当不可避免时，手部应及时消毒。可避免时，手部应及时消毒。n10,00010,000级级 使用的传输设备不得穿越较低级别区域。使用的传输设备不得穿越较低级别区域。n100,000100,000级

15、以上级以上 工作服应在洁净室（区）内洗涤、干工作服应在洁净室（区）内洗涤、干燥、整理，必要时应按要求灭菌。燥、整理，必要时应按要求灭菌。第一节第一节 概述概述 4.4.冷冻干燥技术（冷冻干燥技术（p62p62） 在低温与真空下使冰直接升华，以水蒸气形式除在低温与真空下使冰直接升华，以水蒸气形式除去水的干燥技术。去水的干燥技术。 4.1 4.1 干燥原理干燥原理/ /曲线曲线 4.2 4.2 干燥设备干燥设备 由制冷、真空、加热、控制系统四个主要部分由制冷、真空、加热、控制系统四个主要部分组成。组成。冷冻干燥机冻干箱冻干箱搁板控制面板 箱体 (内有冷凝器、冷冻机、热交换器、真空泵和阀门、电器控制

16、元件等) 第二节第二节 注射剂注射剂（injectionsinjections）一一. .概述概述 1.1.定义：定义：注射剂注射剂( (injectionsinjections) )系指药物制成系指药物制成的供注入体内的的供注入体内的灭菌灭菌溶液溶液、乳状液乳状液、混悬液混悬液，以及供临用前配成溶液或混悬液的以及供临用前配成溶液或混悬液的无菌粉末无菌粉末或浓溶液或浓溶液。 粉针剂粉针剂 安瓿注射剂安瓿注射剂 第二节第二节 注射剂注射剂（injectionsinjections）2.2.分类分类 按分散系统分按分散系统分 溶液型溶液型( (油、水油、水) ) 混悬型混悬型 乳剂型乳剂型 无菌粉

17、末无菌粉末 ( ( 注意油溶液与混悬型只能做肌肉注射注意油溶液与混悬型只能做肌肉注射 ) ) 按体积分按体积分 注射液注射液 输液输液 新型注射给药系统（脂质体、微囊、微球等生物技术药物）新型注射给药系统（脂质体、微囊、微球等生物技术药物）第二节第二节 注射剂注射剂（injectionsinjections） 3.3. 给药途径给药途径 皮内皮内id id i intrantrad dermalermal 皮试诊断皮试诊断 0.2ml0.2ml 皮下皮下sc sc s sububc cutaneous utaneous 1-2ml 1-2ml 吸收慢吸收慢, ,疫苗疫苗 肌内肌内imim i

18、intrantram muscularuscular 5ml5ml，各类注射剂，各类注射剂 静脉静脉iv iv i intrantrav venous enous 应用广泛应用广泛 脊椎腔脊椎腔iviv 易发生渗透压紊乱易发生渗透压紊乱 10ml5050 m m的微粒的微粒 ) )应应澄明度澄明度检检查的规定外，药典还规定了查的规定外，药典还规定了100 ml100 ml以上注射液应做以上注射液应做不溶不溶性微粒检查性微粒检查。 每每1 ml1 ml输液中含输液中含10 10 m m 以上的微粒不得超过以上的微粒不得超过2020粒，粒，含含25 25 m m 的微粒不得超过的微粒不得超过2 2

19、粒。粒。 检查方法检查方法 显微计数法微及粒度分析仪显微计数法微及粒度分析仪 其它项目与注射剂相似（其它项目与注射剂相似（如热原、无菌检查、含量、如热原、无菌检查、含量、PHPH、渗透压等）、渗透压等）四、输液存在的问题及解决办法四、输液存在的问题及解决办法 1.1.澄明度与微粒澄明度与微粒 -原料与附加剂原料与附加剂 杂质的存在产生乳光、小白点、杂质的存在产生乳光、小白点、 浑浊浑浊 -输液容器与附件输液容器与附件 -生产工艺及操作生产工艺及操作 -使用过程使用过程 2.2.染菌染菌 生产过程污染严重、灭菌不彻底、瓶塞松动不严生产过程污染严重、灭菌不彻底、瓶塞松动不严 3.3.热原反应热原反

20、应 使用过程的污染占使用过程的污染占84%84%一、概述一、概述 注射用无菌粉末，又称注射用无菌粉末，又称粉针粉针，通常是冻干粉针，临，通常是冻干粉针，临用前用灭菌注射用水溶解后注射，较常用的注射剂型。用前用灭菌注射用水溶解后注射，较常用的注射剂型。 用于在水中不稳定的药物，特别是对湿、热敏感的用于在水中不稳定的药物，特别是对湿、热敏感的抗生素抗生素及及生物技术药物生物技术药物。 冷冻干燥的优点：冷冻干燥的优点： 1 1、避免药物热分解、避免药物热分解 2 2、产品质地疏松、产品质地疏松 3 3、含水量低，减少药物水解、含水量低，减少药物水解 4 4、污染少、污染少 5 5、剂量准确、剂量准确

21、1.1.注射用无菌粉末的分类注射用无菌粉末的分类 注射用冷冻干燥制品注射用冷冻干燥制品- - 生物制品生物制品 注射用无菌分装产品注射用无菌分装产品- - 抗生素抗生素2.2.注射用无菌粉末的质量要求注射用无菌粉末的质量要求 粉末无异物粉末无异物 粉末细度或结晶度适宜粉末细度或结晶度适宜 无菌、无热原无菌、无热原一、一、概述概述 眼用制剂（眼用制剂（eye preparationseye preparations）系指直接）系指直接用于眼部发挥局部治疗作用或经眼部吸收进入体用于眼部发挥局部治疗作用或经眼部吸收进入体循环，发挥全身治疗作用的药物制剂。循环，发挥全身治疗作用的药物制剂。 滴眼剂、眼

22、膏剂。滴眼剂、眼膏剂。 药物在眼部的吸收分为药物在眼部的吸收分为吸收两个吸收两个途径。通过角膜至前房再进入虹膜；通过结膜对途径。通过角膜至前房再进入虹膜；通过结膜对巩膜可达眼球后部。巩膜可达眼球后部。水溶性太大的药物不易透过水溶性太大的药物不易透过角膜屏障，脂溶性大的药物比较容易透过角膜，角膜屏障，脂溶性大的药物比较容易透过角膜，但却不易从角膜向眼的深层组织透过。所以在水但却不易从角膜向眼的深层组织透过。所以在水和脂溶性介质中均有一定的溶解度的化合物，最和脂溶性介质中均有一定的溶解度的化合物，最利于在眼角膜的转运。利于在眼角膜的转运。 全身作用途径全身作用途径：药物在角膜药物在角膜结膜缘被局部结膜缘被局部毛细血管吸收进入体循环。角膜透过性差的药物毛细血管吸收进入体循环。角膜透过性差的药物有明显的非角膜吸收。有明显的非角膜吸收。眼粘膜吸收的优点眼粘膜吸收的优点： a a）眼部给药比注射给药方便、简单、经济。）眼部给药比注射给药方便、简单、经济。 b b）可避免肝脏的首过效应。）可避免肝脏的首过效应。 c c）与其他组织或器官相比，对于免疫反应不敏感。）与其他组织或器官相比，对于免疫反应不敏感。 适用于蛋白质类、肽类药物，而这些药物往往适用于蛋白质类、肽类药物，而这些药物往往 口