2016年新立式压力蒸汽灭菌器效果验证报告

1、重庆西南制药二厂有限责任公司页数共11页文件编码：SVR-09009-00-2016文件名称YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器效果验证报告制定人制定日期审核人审核日期QA审阅人审阅日期批准人批准日期受控状态分发号生效日期分发部门质量部QA质量部QC技术部综合部供销部口设备工程部口动力车间口EHS部 财务部口生产部口一车间口二车间 三车间口制剂车间文件历史日期交更原因变更前文件版本号验证小组人员名单组长姓名职务/职称职责李辉质量部副部长负责验证方案和报告的审核工作；负责组织实施灭菌效果确认组员姓名职务/职称职责张丽QC负责验证方案和报告的起草；负责实施灭菌效果确认；负责进行检测；统计检测数

2、据陈静QC主管负责验证方案和报告的起草；负责实施灭菌效果确认；负责进行检测；统计检测数据谢青QA协调验证工作批准人批准日期目录项目名称页码日的5,验证类别,，5验证时间，,，5验证依据5,J/Il,接受标准5,验证的实施步骤，,，5偏差及异常处理，,，10再验证,，10验证报告、结果分析和结论,10验证结论批准、会签及日期,10验证证书,11批准人批准日期序号1234567891011摘要公司对YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器121c高压灭菌30分钟的灭菌效果进行了验证，确认YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。验证结果如下：当加入

3、未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养基经培养后显浑浊，而在115c灭菌20分钟后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养基经培养后清亮，无浑浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。121c压力蒸汽灭菌化学指示卡灭菌后颜色达到、深于标准颜色（黑色），说明本试验合格。当未灭菌的嗜热脂肪芽抱杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色，而在121c压力蒸汽灭菌20分钟后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽抱杆菌全部被灭活。枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌培养在121c灭菌30分钟后，经培养无菌生长，细菌挑战性试验合格。批准人批准日期1 目的：提供足够的数据和文件依据，确认YXQ-LS-70A型

4、立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。2 验证类别：验证3 验证时间：2016年04月4 验证依据：药品生产质量管理规范（2010年修订）药品生产验证指南（2003年修订）验证管理规定SMP-10002-035验证可接受标准验证项目验证可接受标准验证方法热分布测试（121c压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应）火菌后指示卡颜色应达到或深于标准颜色（黑色）目测法生物指示剂灭活实验火菌后指本菌应全部被火活培养法细菌挑战性试验火菌后指示菌泡全部死亡微生物限度检查6验证的实施步骤6.1试验条件6.1.1检测用仪表确认名称型号编R校验日期校验结论功效时间压力表结论：检查人/日期

5、复核人/日期6.1.2检测用菌种、指示剂（卡）等的确认名称规格来源枯草芽抱杆菌中国约品生物制品检定所大肠埃布国中国药品生物制品检定所沙门菌中国药品生物制品检定所铜绿假单抱菌中国约品生物制品检定所金黄色葡萄球菌中国药品生物制品检定所嗜热脂肪芽胞杆菌生物指示剂北与四环卫生药械厂后限公司枯草杆菌黑色变种芽胞菌片中国药品生物制品检定所121c压力蒸汽灭菌化学指示H二北与四环卫生药械厂后限公司结论：符合规定检验人/日期：复核人/日期：批准人批准日期6.1.3菌培养物制备：分别取枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌1白金耳于装有9ml胰酪大豆月东液培养基的试管中，于3035c培养

6、1824小时后,出现浑浊，说明各种菌均有生长，即得枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌的培养物，备用。6.2 取样方法：6.2.1 取样点：YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器内上、中、下三部位各取样点（见物品放置图）物品放置图6.2.2 取样频次：每个试验进行三次。6.3 热分布测试（121c压力蒸汽灭菌化学指示卡变色反应试验）：6.3.1 验证方法：将每组9张“121C压力蒸汽灭菌化学指示卡”按物品放置图位置放于YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121c灭菌15和30分钟各一次后，取出与化学指示卡自带标准颜色（黑色

7、）比较。6.3.1.1 空载热分布将每组9张“121C压力蒸汽灭菌化学指示卡”做好数字标记，置于敞口试管中，按物品放置图位置放于YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器内。注意灭菌器中只放置试管，不放置试剂，开启灭菌器，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121c灭菌15和30分钟各一次后，取出与化学指示卡自带标准颜色（黑色）比较。6.3.1.2 满载热分布在灭菌器内装满用牛皮纸包裹的洁净的与平时相同数量的培养皿和三角瓶，自下而上摆放。将每组9张“121C压力蒸汽灭菌化学指示卡”做好数字标记，置于敞口试管中，按物品放置图位置放于YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器内。开启灭菌器，按立式压力

8、蒸汽灭菌器标准操作程序，于121c灭菌15和30分钟各一次后，取出与化学指示卡自带标准颜色（黑色）比较。6.3.2结果判定：批准人批准日期121C压力蒸汽灭菌化学指示卡灭菌后颜色如达到或深于标准颜色（黑色），则本试验合格。6.3.3验证结果：6.3.3.1空载热分布验证结果:检测结果火菌时间及温度123456789121c15分钟深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于121c30分钟%L、次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于结论

9、：符合规定检查人/日期复核人/日期6.3.3.2满载热分布验证结果（培养皿数量90个，三角瓶数量20个）：检测结果火菌时间及温度123456789121c15分钟%L、次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于121c30分钟凑L次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于结论：符合规定检查人/日期复核人/日期6.4 生物指示剂灭活试验：6.4.1 枯草杆菌黑色变种芽胞菌片（115C灭菌20分钟）6.4.1.1 验证方法：在灭菌器内装满用

10、牛皮纸包裹的洁净的与平时相同数量的培养皿和三角瓶，自下而上摆放。取9张枯草杆菌黑色变种芽胞菌片按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内,批准人批准日期按YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于115c灭菌20分钟后，取出于3035c培养2448小时。同时取两片未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片作对照，分别于24小时和48小时观察，记录结果。6.4.1.2 结果判定：当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的胰酪大豆脐液体培养基经培养后显浑浊，而灭菌后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养基经培养后清亮，无浑浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。6.4.1.3验证结果（培养皿数量90个，三

11、角瓶数量20个）：取样点标准培养后现象结论镖L次第二次第三次1培养基清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊符合规定2清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊3清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊4清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊5清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊6清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊7清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊8清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊9清亮、无浑浊清亮、无浑浊清亮、无浑浊阳性对照1号培养基浑浊浑浊浑浊浑浊2号浑浊浑浊浑浊检验人/日期复核人/日期6.4.2嗜热脂肪芽抱杆菌生物指示剂（121C灭菌15分钟）6.4.2.1验证方法：在灭菌器内装满

12、用牛皮纸包裹的洁净的与平时相同数量的培养皿和三角瓶，自下而上摆放。取9瓶嗜热脂肪芽抱杆菌生物指示剂按物品放置图位置放于立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121c灭菌15分钟后，取出于54c培养48小时。同时取2支未灭菌的嗜热脂肪芽抱杆菌生物指示剂作对照。6.4.2.2 结果判定：当未灭菌的嗜热脂肪芽抱杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄色、而灭菌后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽抱杆菌全部被灭活。6.4.2.3 验证结果（培养皿数量90个，三角瓶数量20个）：批准人批准日期检测结果火菌时间及温度123456789阳性对照12121C15分钟%L、次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫

13、色紫色原;色黄色第二次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色原;色黄色第三次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色原;色黄色结论符合规定检查人/日期复核人/日期6.5细菌挑战性试验:6.5.1验证方法：将枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌的培养物各9支培养物按物品放置图位置放于YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器内，按立式压力蒸汽灭菌器标准操作程序，于121c灭菌30分钟后，取出，即得枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌的灭菌培养物。取各灭菌培养物1ml,置直径90mm的灭菌平皿中，将预先准备好的胰酪大豆月东琼脂培养基熔化，冷至约45c时，

14、倾注上述平皿各2115-20mL,混匀待凝。将各凝固平板倒置于3035c培养箱中培养，分别于24小时和48小时观察，记录结果，每管平行测定2份。同时用两个灭菌平皿各加注0.9%的无菌氯化钠溶液1ml作为阴性对照；并用大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌作阳性对照。6.4.2.4 结果判定：枯草芽胞杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌培养物灭菌后，经培养应无菌生长，则细菌挑战性试验合格。6.5.3验证结果:检测结果菌培养物123456789阳性对照12枯草芽抱杆菌%L、次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第

15、三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性大肠埃希国凑L次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性沙门菌%L、次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性批准人批准日期第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性铜绿假单抱菌凑L次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性金黄色葡萄球菌%L、次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性

16、阳性阳性第二次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性第三次阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阴性阳性阳性结论符合规定检查人/日期复核人/日期7异常及偏差处理无8 再验证8.1 再验证周期：每年8.2 内容：根据再验证方案制定9 验证报告、结果分析和结论：9.1 当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养基经培养后显浑浊，而在115c灭菌20分钟后的枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养基经培养后清亮，无浑浊，说明枯草杆菌黑色变种芽胞菌全部被灭活。9.2 121c压力蒸汽灭菌化学指示卡灭菌后颜色达到、深于标准颜色（黑色），说明本试验合格。9.3 当未灭菌的嗜热脂肪芽抱杆菌生物指剂经培养后由紫色变为黄

17、色，而在121c压力蒸汽灭菌20分钟后的仍为紫色时，说明嗜热脂肪芽抱杆菌全部被灭活。9.4 枯草芽抱杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单抱菌、金黄色葡萄球菌培养在121c灭菌30分钟后，经培养无菌生长，细菌挑战性试验合格。验证小组组员：日期：验证小组组长：日期：10 验证结论批准、会签及日期批准人批准日期验证证书编号：SVR-09009-00-2016验证项目YXQ-LS-70A型立式高压灭菌器效果验证验证要求及目的确认YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠验证文件编号SVR-09009-00-2016验证文件名称YXQ-LS-70A型立式高压灭菌器效果验证报告验证小组按照YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器效果验证方案（SVP-09002-01-2012）对立式压力蒸汽灭菌器121c高压灭菌30分钟的灭菌效果进行了验证，确认YXQ-LS-70A型立式压力蒸汽灭菌器的可靠性，确保微生物学检验及环境监测数据的真实可靠。验证结果如下：当加入未灭菌枯草杆菌黑色变种芽胞菌片的培养基经培养后显浑浊，而在11