维生素C含量测定方法综述ppt课件

1、维生素维生素C的构造式的构造式 维生素C：六碳的多羟基内酯CCCHOHOCHOOCHHOCH2OH2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量v其能复原2,6-二氯酚靛酚染料。v维生素C具有复原性的烯二醇基，我们经过氧化复原滴定来测定维生素CCCOHOH 原理原理2，6-二氯靛酚是一种染料，其氧化型在酸性介质中为红色，碱性介质中为蓝色，与Vc反响后，生成无色的复原型酚亚胺，因此，在酸性条件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液显玫瑰红色，即为终点；无需另加指示剂。方法方法取本品适量约相当于Vc50mg，用适量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸试液20ml,再用水稀释置刻度，摇匀；精细量取稀释液适

2、量约相当于Vc2mg置50ml的锥形瓶中,加偏磷酸-醋酸试液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液显玫瑰红色,并继续5s不褪；空白实验：取偏磷酸-醋酸试液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。计算： (V-V0) F T WW 标示量 标示量%=反响摩尔比反响摩尔比100CCCHOHOCHOOCHHOCH2OHOClClNOHOHClClNOHCCOCHCOOOCHCH2OHHO 维生素C 2,6-二氯酚靛酚 维生素C 2,6-二氯酚靛酚复原型 氧化型，粉红色 氧化型 复原型 + + = v2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色，在酸性溶液中呈红色，被复原后红色消

3、逝。碘量法o原理：由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的复原性，能被碘氧化，用碘滴定VCoEC6H6O6/C6H8O6=0.18 ,EI2/I-=0.535 o终点：淀粉为指示剂，溶液出现稳定的蓝色即为终点o反响式：o o 碘量法碘的浓度由知浓度的Na2S2O3规范溶液标定反响式：计算式：Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%222234622IS OIS O碘量法 留意 ！ 测定时：加HAC使溶液呈弱酸性 缘由: (1) Vc复原性很强，在空气中很容易被氧化，在碱性介质中更甚 (2)I2在碱性介质中会发生歧化反响 加HAC可减少VC的副反响，防止实验误差电位滴定法原理

4、(详细来说:) 随着滴定剂的参与，由于发生化学反响，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由丈量任务电池电动势的变化就能确定终点。 电位滴定法u右图：电位滴定法根本仪器安装u计算式：(与碘量法一样)uWvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%u优点：u处理了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题2 2 分光光度测定维生素分光光度测定维生素C C 2.1 22.1 2，4 4一二硝基苯肼分光光度一二硝基苯肼分光光度法法 2.2 2.2 钼蓝比色法钼蓝比色法 2.3 2.3

5、其他方法其他方法2，4一二硝基苯肼分光光度法一二硝基苯肼分光光度法 l原理：l维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸l反响式： 2，4一二硝基苯肼分光光度法一二硝基苯肼分光光度法 pH5,脱氢抗坏血酸内环开裂，构成二酮古洛糖酸 二酮古洛糖酸HHHHHH分光光度法o样品溶液与VC规范溶液按上述方法同样处置o500nm处测吸光度o以下图：721型分光光度计 差示旋光法差示旋光法原理原理方法方法结果结果维生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有显著差别，而片剂辅料旋光度坚持不变差示旋光法消除辅料的影响，直接测出该制剂的含量讨论讨论与与 差示旋光法方法方法TEXT1规范溶液的配制准确称取

6、维生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸钠0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷却的蒸馏水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的维生素C规范溶液。TEXT原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与2比旋光度与溶液pH值的关系量取10.0mL维生素C规范液于50mL量瓶中,用水稀释至50mL。测定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批参与氢氧化钠固体(每次约50mg),每次溶解后,测定一次溶液的pH及其旋光度,得到维生素C溶液的pH及旋光度关系原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与差示旋光法差示旋光法选定选定pH为为2.2和和6.2 差示旋光法2差示旋光度与溶液浓度关系汲取2.0、4.0、8.0、16

7、.0、20.0mL的维生素C规范液各两份,分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容；一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容，静置3min后,用220mm测定管，以前者为空白，测定后者的差示旋光度(a)。文献结果：线性方程为a=0 205*C+ 005，r=09964原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与 差示旋光法差示旋光法3辅料干扰实验取混合辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、EDTA、糊精等按处方比例混匀)两份分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容,一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容,滤去不溶物,滤液在两种pH值测定差示旋光度。文献结果：辅料的差示旋光度为零，

8、阐明辅料对维生素C含量的测定不干扰。原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与 差示旋光法差示旋光法4稳定性实验同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。文献结果：差示旋光度根本不变原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与 差示旋光法差示旋光法5回收率实验精细称取维生素C精制品500.0mg两份，分别置于50mL容量瓶中，各参与20mg辅料，分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液，测定差示旋光度。文献结果：平均回收率为97.8，变异系数cv为1.03原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与 差示旋光法差示旋光法方法方法TEXT6样品测定取维生素C片剂10片，称重研碎后分别用

9、盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液(相当于含Vc 20mg/mL)，滤去不溶物，测定滤液的差示旋光度，根据回归方程计算其含量。TEXT原理原理讨论讨论方法方法结果结果与与方法方法TEXT1维生素易被氧化,空气及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液时运用新沸冷却水,同时加人EDTA作为稳定剂；2样品测定时，片剂部分物质不能完全溶解，必需过滤除去，然后测定滤液的差示旋光度。TEXT原理原理讨论讨论方法方法结果结果与与3 高效液相色谱法测定维生素Cn3.1 HYPERSILC83.1 HYPERSILC8色谱柱色谱柱法法n3.2 VenusilXBPC183.2 VenusilXBPC18柱

10、法柱法n3.3 3.3 其他方法其他方法 系统采用VenusilXBPC18柱(46x250 mm，5g)，用02的偏磷酸的水溶液作为流动相，流速1 mlmin，检测波长240 nm；维生素C浓度在01-10 mgmL范围内有良好的线性关系。该方法回收率9989，规范偏向091，操作简便、灵敏、可靠 薄层扫描法薄层扫描法操作方法与结果1试纸的制备 2,6-二氯靛酚钠 (DCP-Na)溶于无水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，滤纸在盛有DCP-Na乙醇溶液的展开缸中浸渍3min，边浸边摇展开缸，使滤纸均匀着色，充分被染料溶液所饱和。取出悬挂于暗处，晾干后，立刻放入枯燥器中避光保管，备用。

11、 薄层扫描法薄层扫描法2缓冲溶液的配制 称取柠檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，参与1M 氢氧化钠 420ml，并用蒸馏水稀释至刻度，此溶液的pH应为3.5。否那么，用酸或碱调整 pH值，保管于冰箱中。 薄层扫描法3扫描条件确定 在制备的染料试纸上定量点上维生素C对照品进展扫描 ，维 生素 C在 290nm 处有最大吸收，420nm处无吸收，应选择1=290nm， 2=420nm双波长反射式锯齿扫描。原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与4线性实验线性实验 4.1对照品溶液的配制对照品溶液的配制 精细称取维生素精细称取维生素C规范品规范品100mg，用缓冲溶液配，用缓冲溶液配成成lmg

12、/ml的规范溶液。精细称取维生素的规范溶液。精细称取维生素C规范溶液规范溶液1、2、3、4、5ml，分别置于分别置于10ml容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。4.2测定测定 用用5l定量毛细管，分别汲取上述溶液各定量毛细管，分别汲取上述溶液各5 l，点于试纸上，点于试纸上 。点样后晾干，并将试纸点样后晾干，并将试纸 固定在固定在20cm20cm玻璃板上，放入薄层扫描仪。玻璃板上，放入薄层扫描仪。测定测定A 的积分值的积分值 (峰面积峰面积)作为纵坐标作为纵坐标Y ，点样量为横，点样量为横 坐标坐标X，得不断线，得不断线方程方程 Y=15692X+130225，r= 09991 原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与方法方法TEXT5样品的含量测定 取维生素 C片10片，研细，精细称取平均片重一片的粉末，放入100ml容量瓶中，参与缓冲液至刻度，振摇，使维生 素 C溶解，放置、廓清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度。用 5 l定量毛细管点样品溶液与不同浓度的规范液于同一试纸上 ，然后扫描 测定峰面积，由任务曲线法计算维生素C片中的维生素C含量。TEXT原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与6回收