安捷伦1260高效液相色谱仪再确认方案

1、安捷伦12600高效液相色谱仪再确认方案文件编码发放编号颁发部门总工室起草人日期4尹月日审核人日期4尹月日审核人日期I月日批准人日期4尹月日执行日期今三月日历次修订的原因、目的：分发部门厂长室总工室综合办质量部储运组工程部前提车间外包车间GMP办集束中心生产部制剂车间检测中心5.内容5.1 安装确认5.1.1 仪器基本信息的确认（见表1）表1仪器基本信息确认记录仪器基本信息仪器名称Agilent1260高效液相色谱仪仪器编号制造商检测器型号检测器序列号购入时间安装时间安装地点维修服务单位名称联系电话地址联系人备件供应单位联系电话技术资料检查名称确认结果备注Agilent1260局效液相色谱仪说

2、明书后无Agilent1260局效液相色谱仪米购合同后无装箱单后无计量检定证书（应在计量检定周期内）后无再确认时应具备Agilent1260图效液相色谱仪SOP后无再确认时应具备按采购合同对装箱单所列内容进行确认品名型号及序列号数量确认结果后无后无后无后无后无后无后无后无后无检查人：日期：年月日5.1.2 安装环境条件的确认表2安装环境条件的确认记录环境条件要求检查结果应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，排风良好口符合口/、符合台面仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动口符合口/、符合和电磁干扰源，仪器接地良好。环境温度15-30C口符合口不符合湿度室内湿度在20犷85%RH范围内。口

3、符合口不符合空调有温湿度控制措施口符合口/、符合排风通风良好口符合口不符合电路电源电源电压为(220±22)V,频率为(50±0.5)Hz口符合口/、符合接地口符合口/、符合不间断电源口符合口/、符合检查人：日期：年月曰5.2 运行确认严格按Agilent-1260高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表3表3运行确认记录操作步骤合格标准检查结果开机进入系统口符合口不符合系统值设置口符合口不符合打印机口符合口不符合退出系统关机口符合口不符合检查人：日期：年月曰5.3 性能确认5.3.1 试验条件的确认表4试验条件的确认记录

4、品名要求确认结果电子分析天平最大称量不小于100g,最小分度不大于1mg计量检定。口符合口不符合容量瓶校验口符合口不符合刻度吸管校验符合口不符合秒表分度值不大于0.1s符合口不符合数字温度计测量范围为0100c,最小分度不大于0.1Co符合口不符合标准物质蒸发光的标准物质氢化可的松符合口不符合其他色谱甲醇、超纯水、分析纯丙酮、异丙醇等。符合口不符合检查人:日期:年月日5.3.2 性能确认的内容及可接受标准表5性能确认的内容及可接受标准确认项目可接受标准泵流量误差流量设定值ml/min0.51.02.0测定次数333流动相收集时间/min1055泵流量设定值误差Ss5%3%2%泵流量稳定性误差S

5、r3%2%2%紫外-可见光检测器基线噪声不超过5X10-4AU基线漂移不超过5X10-3AU/h最小检测浓度茶/甲醇溶液的最小检测浓度不大于1X107g/ml机能整性定性测量重复性（6次测量）RSD<1.5%定量测量重复性（6次测量）RSD<3.0%数据处理系统能正常采集、保存、处理数据1.工作站能正常设置米集方法的参数2.工作者设置的米集方法能正常保存3.压力超过限定时工作站能自动报警4.漏液时工作站能自动报警5设置错误的参数时工作站能自动报警6修改原有方法后重新保存时有提示7.工作站能正常编辑样品系列表和单个进样信息8点击开始后工作站能正常进行样品分析9.样品分析的数据能正常保

6、存10.能使用工作站对保存的数据进行处理12.能正常打印数据处理结果5.3.3 性能确认检定方法5.3.3.1 泵流量设定值误差Ss与泵流量稳定性误差Sr的确认表6泵流量设定值误差SS和泵流量稳定性误差Sr的可接受标准流重设止值ml/min0.51.02.0测定次数333流动相收集时间/min1055允许泵流量设定值误差Ss5%3%2%泵流量稳定性误差Sr3%2%2%注:最大流量的设定值可根据用户使用情况而定。对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩短或延长。将仪器各部分连接好，以超纯水为流动相，分别设定0.5、1.0和2.0m

7、l/min三个流速，在流动相排出口用事先清洗、干燥并已称重的容量瓶收集流动相，0.5ml/min时用秒表计时收集10分钟，1.0和2.0ml/min时用秒表计时收集5分钟，在分析天平上称重，每个流速测定3次，按式(1)、式(2)计算Ss和Sr,查水的密度表计算，即得。Ss=(Fm平一Fs)/FsX100%(1)Sr=(FmaxFmin)/Fm平x100%(2)式中，Fm-F亦（W2-W1/（pt.t）,流量实测值，ml/min;W2容量瓶+流动相的质量，g；W1容量瓶的质量，g；pt实验温度下流动相的密度，g/cm；t收集流动相的时间，min；Fm同一组测量的算术平均值，ml/min；Fs流量

8、设定值，ml/min；Fmax同一组测量中流量最大值，ml/min；Fmin同一组测量中流量最小值，ml/min；表7泵流量设定值误差Ss和泵流量稳定性误差&测定记录Fs收集时间（分钟）W1W2FmFmpSsSr结论0.5105%3%符合规定口/、符合10101.053%2%符合规定口/、符合552.052%2%符合规定口/、符合55注：实验温度C纯水的密度pt：实验温度下超纯水的密度，g/cm检查人日期：年月日5.3.3.2 紫外-可见光检测器的检定5.3.3.2.1 基线噪声和基线漂移的检定选用C18色谱柱，以100%?醇为流动相，流量为1.0ml/min,紫外检测器的波长选在25

9、4nm检测灵敏度调到最灵敏挡。开机预热，待仪器稳定后（约60分钟）记录基线60min,从30min内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。（附图谱）由检测器的衰减倍数和测得的基线峰一峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示Nd=KB式中：Nd检测器基线噪声；K衰减倍数；B测得白基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU基线漂移用1h内基线偏离原点的值（AU/h）表示。表8基线噪声和基线漂移的检定确认项目确认结果技术要求是否符合规定基线噪声AU<5X104AU口是口否基线漂移AU/h<5X103AU/h口是口否检查人日期：年月曰5.3.3.2.

10、2 最小检测浓度在5.3.3.2.1的色谱条件下，由自动进样器或微量注射器注入1020ul,浓度为1X10-7g/ml的蔡/甲醇溶液，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算最小检测浓度。（按20ul进样量计算）。Q=2NdCV/20H式中：Cl最小检测浓度，g/mL；Nd基线噪声峰-峰高，mmC-标准溶液浓度，g/mL；H标准溶液白色谱峰高，mmV进样体积，ulo表9最小检测浓度确认记录确认项目确认结果技术要求是否符合规定最小检测浓度蔡/甲醇溶液g/ml<1x10-7g/ml口是口否g/ml检查人：日期：年月日5.3.3.3 蒸发光检测器的检定5.3.3.3.1 基线噪声和

11、基线漂移的检定选用Ci8色谱柱，以100灿谱乙月青为流动相，流量为1.0ml/min，漂移管温度设定为45°C,气体流速设定为1.5L/min检测灵敏度调到GAIN=1开机预热，待仪器稳定后（约60分钟）记录基线60min,从30min内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。（附图谱）由检测器的衰减倍数和测得的基线峰一峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示Nd=KB式中：Nd检测器基线噪声；K衰减倍数；B测得白基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU基线漂移用1h内基线偏离原点的值（AU/h）表示。表10基线噪声和基线漂移的检定确认项目确认

12、结果技术要求是否符合规定基线噪声MV00.5MV口是口否基线漂移MV/H<2MV/h口是口否检查人日期：年月日5.3.3.3.2 最小检测浓度在5.3.3.3.1的色谱条件下，使用氢化可的松标准品为样品，由自动进样器或微量注射器注入1020ul,浓度为，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算最小检测浓度。（按20ul进样量计算）。CL=2NdCV/20H式中:Cl最小检测浓度，g/mL；Nd基线噪声峰-峰高，mmC-标准溶液浓度，g/mL；H标准溶液白色谱峰高，mmV进样体积，ulo确认项目确认结果技术要求是否符合规定最小检测浓度溶液g/ml<2.5x10-7g/ml

13、（5ng的绝对进样量）口是口否g/ml表11最小检测浓度确认记录检查人:年月日日期:5.3.3.4 整机性能（定性、定量重复性）的确认将仪器各部分联接好，选用C8色谱柱，根据仪器配置的检测器，选择流动相和测量参数：紫外检测器和二极管阵列检测器用100刈醇为流动相，流量为1.0ml/min,检计算公式:RSD6定性或定量=?Xi.X2i土6f式中:测波长为254nm灵敏度选择在0.04左右，基线稳定后由自动进样器注入510ul、浓度为1X10-4g/ml的蔡/甲醇标准溶液。蒸发光散射检测器选用。8色谱柱，用85叱月青为流动相，流量为1.0ml/min,设定漂移管温度为45°C,气体流速

14、为1.5L/min,连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按下式计算相对标准偏差RSD1100%XRSD定性（定量）一定性（定量）测量重复性相对标准偏差；Xi第i次测得的保留时间或峰面积X6次测量结果的算术平均值;i一测量序号表12、整机性能(定性、定量重复性)的确认记录标物名称蔡浓度1x10-4g/ml进样量10ul波长254nm流动相甲醇流里1.0ml/min灵敏度选择序号123456平均值RSD是否符合规定保留时间(min)是口台峰面积是口台标物名称氢化可的松浓度1X10-4g/ml进样量10ul气体流量/温度45°1.5L/minC流动相85%乙睛沅里1ml/min灵敏

15、度选择GAIN=1序号123456平均值RSD是否符合规定保留时间(min)口是口否峰面积口是口否6 .确认结果汇总表表13确认结果汇总表确认项目检测结果*泵流量误差流里设te值ml/min0.51.02.0测定次数333流动相收集时间/min1055泵流量设定值误差SS(±5%)(±3%)(±2%)泵流量稳定性误差8(±3%)(±2%)(±2%)结论确认项目可接受标准确认结果紫外-可见光检测器*基线噪声不超过5X10-4AU*基线漂移不超过5X10-3AU/h*最小检测浓度蔡/甲醇溶液的最小检测浓度不大于1X10-7g/ml蒸发基线

16、噪声00.5MV基线漂移<2MV/h最小检测浓度02.5x107g/ml（5ng的绝对进样量）*整机性能定性测量重复性RSDw1.5%定量测量重复性RSD<3.0%数据处理系统能正常采集、保存、处理数据1.工作站能正常设置采集方法的参数2.工作者设置的采集方法能正常保存3.压力超过限定时工作站能自动报警4.漏液时工作站能自动报警5.设置错误的参数时工作站能自动报警6.修改原有方法后重新保存时有提示7.工作站能正常编辑样品系列表和单个进样信息8.点击开始后工作站能正常进行样品分析9.样品分析的数据能正常保存10.能使用工作站对保存的数据进行处理12.能正常打印数据处理结果7 .结果的处理7.1 凡带*号的确认项目全部达到规定技术要求的仪器为判为合格仪器，通过确认。7.2 只配一个检测器的仪器，任何一个带*号的项目不合格，该仪器为不合格仪器。7.3 配一个以上检测器的仪器，只要