人教版高中生物选修1多聚酶链式反应扩增DNA片段练习题测试题

1、自我小测1.下列说法不正确的是（）A. 一条DNA母链只有一个3端，即羟基末端B. DNA勺两个3端位于相反的两端C. TaqDNA聚合酶只能与引物的3端结合并延伸子链D. DNA勺合成方向是从子链3端向5端延伸的2 .下列有关PCR勺描述不正确的是（）A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.扩增产量为y=（1+x）nD.扩增对象是氨基酸序列3 .标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）A.95C、55C、72CB.72C、55C、95CC.55C、95C、72CD.80C、55C、72C4 .下列有关PC阪应的叙述，正确的是（）A. PC或应所需要

2、的引物只是RNAB. PC或应所需要的材料是核糖核甘酸C. PC或应所需要的酶在60C会变性D. PC即应需要在一定的缓冲溶液中进行5 .有关PCR技术，下列叙述不正确的是（）A.用于PCR的引物长度通常为2030个核甘酸B,在用PCR技术扩增DNA寸，DNA勺复制过程与细胞内DNA的复制类似C. PCR反应只需一定的缓冲溶液和DNA模板以及四种脱氧核甘酸D. PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸6. DNA勺复制需要引物，其主要原因是（）A.可加快DNA勺复制速度B,引物可与DNA#链通过碱基互补配对结合C.引物的5端有助于DN咪合酶延伸DNAgD.DNAm合酶不能从头开

3、始合成DNA只能从3端延伸DNAg7. PCFB作中，从第二轮循环开始扩增的DNA片段（）A.长度固定B,一端固定C.都不固定D.不能确定8. PCR术扩增DNA需要的条件是（）目的基因引物四种脱氧核甘酸DNA聚合酶等mRNA核糖体A.B.C.D.9. 多聚酶链式反应（PCR是一种体外迅速扩增DNA段的技术。PCR程一般经历下述三十多次循环：95C下使模板DN侬性、解链-55C下复性（引物与DNA莫板链结合）f72C下引物链延伸（形成新的脱氧核甘酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（）A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA莫板链

4、的结合依靠互补配对原则完成C.延伸过程中需要DN咪合酶、ATP、四种核糖核甘酸D.PCRM细胞内DNAM制相比，所需要酶的最适温度较高10 .使用PCR仪的具体实验操作顺序应为（）设计好PCR仪的循环程序按配方准备好各组分用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分进行PC或应离心使反应液集中在离心管底部A.B.C.D.11 .在PCR实验操作中，下列说法不正确的是（）A.在微量离心管中添加各种试剂时，只需一个枪头B.离心管的盖子一定要盖严，防止液体外溢C.用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合D.离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果12 .在PCR扩增的实验中，加入一种提取物（一

5、种模板DNA片段），但实验得到的产物却有2种DNA其原因可能是（）A.基因突变B.TaqDNA聚合酶发生变异C.基因污染D.温度过高13 .下图是PC破术示意图，请回答下列问题。DNA片段周期2周期3(1)标准的PCR程一般分为、三大步骤。(2)引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段。(3)将双链DNA,使之变性，从而导致。(4)引物延伸需提供作为原料。14 .多聚酶链式反应(PCR是一种体外迅速扩增DNM段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。(1) DNA勺两条链是反向平行的，通常将的末端称为5端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNAM合酶就

6、能从引物的开始延伸DNA链。(2) PCRRJ用DNA勺热变性原理解决了打开DNA链的问题，1又导致了DNA聚合酶失活的新问题。至IJ20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到,它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫。(3) PCR勺每次循环可以分为三步。假设在PC或应中，只有一个DNA段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有个这样的DNM段。(4) 请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。(5) 简述PC破术的主要应用。15 .随着研究的不断深入，PCR方法被不断改进。它从一种定性的分析方法发展到定量测定；从原先只能

7、扩增几个kb(千碱基对)的基因到目前已能扩增长达几十个kb的DNAf段。PC叱术不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断等。PCR需要*II板DNA引物、脱氧核甘酸和DN咪合酶、ATP等条件，其简要过程如下图所示。请分析回答下列有关问题。|微量DNA样品|DNA互补链个离开为单链片|循环重复|以单链为模板着成千代I尔AJ(1)PC破术能把某一DNM段进行扩增，依据的原理是。PCRW体内DNA复制的不同之处主要表现在环境温度的不同，在PCR中先用95C高温处理的目的是,而这一过程中在细胞内是通过实现的。(2)通过分析得出新合成的DN6子中，A=T,C=G,这个事实说明

8、DNA分子的合成遵循。(3)若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。(4) DNA子链复制白方向是,这是由于。(5) PCR术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCFT增血?中的。参考答案1 .解析：我们通常将DNAII链的羟基（一OH末端称为3端，而将磷酸基团的末端称为5端，一个DN心子有两个3端和两个5端，它们分别位于DNA分子的两端，即每一端都有一个3端和一个5端。TaqDNA聚合酶只能与引物的3端结合并开始延伸DNA连，即子链总是从5端向3端延伸。答案：D2 .解析：PCR是一种体外迅速扩

9、增DNM段的技术，它能以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核甘酸为原料，在引物作用下使DNAm合酶从引物的3端连接脱氧核甘酸，短时间迅速复制上百万份的DNA拷贝，其扩增产量为y=（1+x）n,y代表DNA段扩增后的拷贝数，x表示平均每次的扩增效率，n代表循环次数。答案：D3 .解析：当温度上升到90C（9096C）以上时，双链DNAS聚为单链，称之为变性；当温度下降到50C（4060C）左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到72C（7075C）左右时，溶液中的四种脱氧核甘酸（A、T、CG）在TaqDNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。答

10、案：A4 .解析：PC或应需要的引物是DNA或RNA反应所需要的材料是脱氧核甘酸，PCR所需要的酶是耐高温的，在60C不会变性。答案：D5 .解析：PCR应中需要的条件有模板（DNA子）、原料（4种脱氧核甘酸）、酶（耐高温TaqDNA聚合酶）、引物（一段DNARNA和一定的缓冲液等。答案：C6 .解析：DNA勺两条链是反向平行的，为了明确地表示DNA的方向，通常将DNA勺羟基（一OH末端称为3端，而磷酸基团的末端称为5端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA而只能从3端延伸DNA链。因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DN咪合酶就能从引物的3端开始延伸DNABt,

11、DNA勺合成方向总是从子链的5端向3端延伸。答案：D7 .解析：PCRT增产物可分为长产物片段和短产物片段两部分。短产物片段的长度严格地限制在两个引物链5端之间，是需要扩增的特定片段。进入第二轮循环后，引物除与原始模板结合外，还要同新合成的链（即“长产物片段”）结合，引物在与新链结合时，由于新链模板的5端序列是固定的，这就等于这次延伸的片段3端被固定了终点，保证了新片段的起点和终点都限定于引物扩增序列以内，形成长短一致的“短产物片段”。答案：A8 .解析：PCR技术需要目的基因作为扩增的模板，耐高温的DNA聚合酶催化反应的进行，而引物的作用是使DNAM合酶从其3端开始连接脱氧核甘酸，四种脱氧核

12、甘酸是该过程的原料。答案：C9 .解析：变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现；复性过程中引物与DNA莫板链的结合依靠互补配对原则完成；延伸过程中需要DNA聚合酶、ATR四种脱氧核甘酸；PCR与细胞内DNAM制相比，所需要酶的最适温度较高。答案：C10 .解析：使用PCR仪进行DNAT增前，首先按照PC林系配方，依次将各组分加入微量离心管离心，使反应液集中于试管底部，然后再设计好PCF的循环程序进行PC或应。答案：C11 .解析：在微量离心管中添加各种试剂时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头必须更换，确保实验的准确性；离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢

13、；离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果。答案：A12 .解析：此现象属于PCR技术中的假阳性现象。其原因是靶基因污染。因此，在PCR实验中，一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、用一次性吸头等，尽量避免靶基因污染。答案：C13 .解析：（1）PCR程一般分变性复性-延伸三大步骤。（2）引物的化学本质为一小段单链DNA或RNA（3）将DNAm热至95C,可导致DNAS旋。（4）引物延伸需提供脱氧核甘酸作为原料以形成DNA?链。答案：（1）变性复性延伸（2）单链DNAeRNA（3）加热到95C双链DNAS聚成两条单链（4）四种脱氧核甘酸14 .解析：（1）DNA聚合酶只能把新

14、的核甘酸加到已经存在的核酸的3羟基上，与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。（2）因PCRJ用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。在高温环境中培养微生物，只有耐高温的微生物才能生存，其他微生物因高温下酶变性而死亡。用这样的选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。（3）DNA复制两条链均作为模板，进行半保留复制，所以复制5次后得到的子代DN后子数为25=32个。(4)新合成的DNA链带有引物，而最初的模板DNA勺两条链不带有引物。(5)PCR技术可以对DN册子进行扩增，所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、

15、古生物学、基因克隆和DNA列测定等方面。答案：(1)磷酸基团3端(2)耐高温的TaqDNA聚合酶选择培养基(3)变性、复性和延伸32(4)引物H引物II【111引物I引物HIIILII1r一一引物I引物III一厂厂(5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA列测定等15.解析：PCR术又称多聚酶链式反应，扩增过程中遵循的原理就是DNAM制。通过分析得出新合成的DN酚子中，A=T,C=G,这个事实说明DNA分子的合成遵循碱基互补配对原则；在PCR中选用95C高温处理的目的是将DNA分子中的氢键断裂，两条链解开，使DNA子变性。引物是一种单链DNARNA子，它能与解开的DNA母链的3端结合，为DNAm合酶提供吸附位点，使DNAm合酶从引物的3端开始连接脱氧核甘酸，