病原微生物实验室生物安全培训

1、病原微生物实验室生物安全培训-、实验室生物安全相关法律法规二、病原微生物实验活动风险评估三、BSL-2实验室的设施和设备要求四、生物安全实验室良好工作行为指南五、实验室生物危险物质溢洒处理指南一溝蹄全劇法律法规病原微生物实验室生物安全管理条例（2018年国务院令第698号）人间传染的病原微£名录（卫科教发200615号）实验室生物安全通用要求（GB19489-2004/2008）病原微生物实验室生物安全通用淮则（WS233-2002/2017）生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定（2006年卫4拶个间传染的病原微生物菌（莓）种保藏机构

2、管理办法（2009年卫生部第68号病原微生物实验室生物安全管理条例第七条国家根据病原微生物的传染性.感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：第一类病原微生物：是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物：是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在入与人.动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类病原微生物：是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物：是指在通常情况下不会引起人类或

3、者动物疾病的微生物。第一二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。病原微生物条例靠垂蜃凰家实行统一的实验室生物安全标准。实验室应当符合国家标准和要求。A第九条采集病原微生物样本应当具备下列条件：（-）具警采集病原微生物样本所需要的生物安全防护永羽相齟的设备；（二）具有掌握相关知识和操作技能的工作人员；（三）具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施；（四）具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。曇，病原微生物实譬呼雀聲举例亠第十八条三级、四级。(BSL=BSL2SL-3.家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为级、二级、3第一条物实验活动。级

4、、二级实验室不得从事高致病性病原微生9第二十五条新建、改建或者扩建一级、二级实验室，应当BSL-4)向设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案込病原微生物实譬型聲賞懸例第二十八条我国尚未发现或者已经宣布消灭的病原微生to物，任何单位和个人未经批准不得从事相关实验活动。第三十四条实验室或者实验室的设立单位应当每年定期对工作人员进行培训，保证其掌握实验室技术规范、操作规程.生物安全防护知识和实际操作技能，并进行考核。工作人员经考核合格的，方可上岗人应至少是所春机构生物委全委鹫錨讒飜安全管理体系的设计、实4礦概議饌索讓建翳力専接向SfetefiBf7.1.3i）指定每项活动的项目负责人其负

5、责制定并向实理层提交活动连効、岚险评估报罕血刍星询里目组人员館训及健康监督怦划、求；Slii®»7.1.6安全管理体系文件通常包括管理手册、工作轆轆i餾塞严应有供现场卩7.1.7应指导所有人员使用和应用与其相关的安全犧系文件及其实施要求，并评估其理解和运用病原微生物实验室生物安全通用准则卩7211实验室人员的健康档案应包括但不限于:卩a）岗位风险说明及知情同意书（必要时）；b）本底血清样本或特定病原的免疫功能相关记录卩C）预防免疫记录（适用时）；d）健康体检报告;沪e）职业感染和职业禁忌症等资料；卩f）与实验室安全相关的意外事件、事故报告等。7.3.1实验室菌（毒）种及感染

6、性样本保存、使用管理，应依据国家生物安全的有关法规。»7.3.2实验室应有2名工作人员负责菌（毒）种及感染性样本的管理。7.3.4高致病性病原微生物菌（毒）种及感染性样本的保存应实行双人双锁。7.3.8菌（毒）种及感染性样本在使用过程中应有专人负责，入库.出库及销毁应记录并存档。断.生产6739实验室应当将等实验活动中获得的有保存价值的各类菌（毒）种或感染性样本送交保藏机构逬行鉴定和保藏。7.3.10高致病性病原微生物相关实验活动结束后，应当在6个月内将菌（毒）种或感染性样本就地销毁或者送交保藏机构保藏。97.3.11销毁高致病性病原微生物菌（毒）种或感染性样本肘应采用安全可靠的方法

7、，并应当对所用方法进行可靠性验证。销毀工作应当在与拟销毀菌（毒）种相适应的生物安全实验室内逬行，由两人共同操作，并应当对销毁过程逬行严格监督和记录。»7.5.4实验活动应在与其防护级别相适应的生物安全实验室内开展。7.5.8二级生物安全实验室从事高致病性病原微生物实验室活动除应满足人间传染的病原微生物名录对实验室防护级别的要求外还应向省级卫生和计生行政主管部门申请。ilFJ实验室使用®微生物（毒）种或样本和已经消灭的病原微生物菌（毒）种或样本、人间传染的病原微生物名录规定的第类病原微生物菌（毒）种或样本.或国家卫生和计划生育委员合规定的其他菌（毒）种或样本，应当经家卫生和计

8、划生育委员合批准；*IkSS星需需i銘翻1产应当纟工省级人基实验窒所在法人机新批也应当7.5.11从事高致病性病原微生物相关实验活动应当有2名以上的工作人员共同进行。从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室工作人员或者其他有关人员，应当经实验室负责人批准。卩7.5.13实验室应当建立实验档案，记录实验室使用情况和安全监督情况。实验室从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验档案保存期不得少于20年。CoS»7.7.1实验室应根据操作的病原微生物种类、污染的对象和污染程度等选择适宜的消毒和灭菌方法,以确保消毒效果。»7.7.2实验室根据菌（毒）种、生物样本及其他感染性材料和污

9、染物，可选用压力蒸汽灭菌方法或有效的化学消毒剂处理。实验室按规定要求做好消毒与灭菌效果监测。»7.7.3实验使用过的防护服、一次性罩、手套等应选用压力蒸汽灭菌方法处理。亠774医疗废物等应经压力蒸汽灭菌方法处理后再按相关实验室废物处置方法处理。&7-8.4实验室废物的处置应有书面记录，并存档。7.9.8高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的运输，应当按照国家有关规定进行审批。地面运输应有专人护送，护送人员不得少于两人。»我国对具体病原微生物的分类详见卫生部颁布的人间传染的病原微生物名录。»该名录除对病原微生物逬行危害程度分类外，还规定了其不同实验操作的防护水

10、平以及运输的包装要求O表1.病毒分类名录Q序号Q病毒名称Q分嘉实验活动所需生物安全实验室级别0运输包装分类切备注乜病毒培养9动物感染实验3未经培养的感染材料的操作3灭活材料的操作3无感染性材料的操作却A/BpUN编号Q英文名。中文名Q分类学地位Q1类天花病毒Q復病毒科Q第一类QBSL-4PABSL-4PBSL-3PBSL-2PESL2UN2814P2Crimean-CoKgohemorrhagicjevervirus(Xinjianghemorrhagicjevervirus)a克里米亚一刚果出血热病毒（新鑑出血热病毒）2布尼亚病毒科P第一类QBSL-3PABSL-3PBSL-3PBSL-2P

11、ESL22UN2814Pa.病毒培养：指病毒的分离、培养、滴定、中和试验、活病毒及其蛋白纯化、病毒冻干以及产生活病毒的重组试验等操作。利用活病毒或其感染细胞（或细胞提取物），不经灭活进行的生化分析、血清学检测、免疫学检测等操作视同病毒培养。使用病毒培养物提取核酸，裂解剂或灭活剂的加入必须在与病毒培养等同级别的实验室和防护条件下进行，裂解剂或灭活剂加入后可比照未经培养的感染性材料的防护等级进行操作。b动物感染实验：指以活病毒感染动物的实验。c. 未经培养的感染性材料的操作：指未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸检测、生化分析等操作。未经可靠灭活或固定的人

12、和动物组织标本因含病毒量较高，其操作的防护级别应比照病毒培养。d. 灭活材料的操作：指感染性材料或活病毒在采用可靠的方法灭1=1活后进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸检测、生化分析、分子生物学实验等不含致病性活病毒的操作。e. 无感染性材料的操作：指针对确认无感染性的材料的各种操作,包括但不限于无感染性的病毒DNA或cDNA操作。社冲表2细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体分类名录卩序病原菌名称a危害程度分类P实验活动所需生物安全实验室级别P运输包装分类9备注Q中文名0大量活菌操作7动物感染实验3样本检测9非感染性材料的实验心嶷别。UN编号Q1.Bacillus躱劎磁心炭疽寿匏杆苗

13、卩第二类QBSL-3PABSL-3PE汇2BSL1AQUN2813p2.布噜氏苗届3第二类。BSL2AB5L»3PESO23B533UN231如苴中弱耒株或疫苗株可在BSU2实验室噪作。a3.鼻疽仮魏Q第二类QBSL-3PABSL-3PESJ2QBSL1AQUN2813炭3.真菌分类名录卩序号4-»逋菌名称27危害程度分类3实验活动所需生物安全实验室级别Q运输包装分类9a备注Q学名中文名大量活菌操作7动物感染实验3样本检测9非感染性材料的实验2A/BUN编号Q1.第二类QBSJ%ABSL-3PBSJ2QBSJ2AQUN2814Pp2.乌皮猱爼级胞浆苗4第二类QBSJ%ABS

14、L-3PBSJ2QBSJ2AQUN2814Pp3.芙膜爼级胞浆苗4第二类QBSJ%ABSL-3PBSJ2QBSJ2AQUN2814Pp4.第二类QBSL3QABSL-3PBSJ2QBSJ2AQUN2814Pp»a大量活菌操作：实验操作涉及“大量”病原菌的制备,或易产生气溶胶的实验操作（如病原菌离心、冻干等）。yb动物感染实验：特指以活菌感染的动物实验。CoS»C样本检测：包括样本的病原菌分离纯化、药物敏感性实验、生化鉴定.免疫学实验.PCR核酸提取、涂片、显微观察等初步检测活动。ad非感染性材料的实验:物学、免疫学等实验。如不含致病性活菌材料的分子生4）i（4（毒）种或话奋

15、喝传染的病原微生物名录中，以下情况按照本规定逬行运1、第一类、第二墅原微生物堇（毒）种或样本（例：炭疽芽鞄杆菌，结核分枝杆菌，埃博拉谓毒）诙饗議墾貓骼赠原IO鋼3、疑似高致病性病原微生物菌（毒）种或样本。富鬻織歸I翳物°餐塞麟籬物碍种鵜严省级'睥離疇勰觀駱严由对于为控制传染病暴发.流行或者突发公共卫生事件应急处理的高致病性病原微生物菌毒种或样本的运输申请，省翁轟針舉最響課暑錚需器諜F上朋購鬻趣物»接收单位应当符合以下条件:(-)具有法人资格；(-)具备从事高致病性病原微生物实验活动资格的实验室;(三)取得有关政府主管部门核发的从事高致病性病原微生物实验活动、菌(毒)

16、种或样本保藏、生物制品生产等的批准文件。喩聽齢菌（毒）2.民航托运：由民航主管部门批准的航空承运人（国航.东方）和机场实施运输。包装耍求三层.包装系统吸水物辅助容器（中层）外包装（外层）作用：包装及保护主容器资料：数量.危险性申明、样品鉴定书.发送/接器层容内主收者信息（置防水袋内，贴于辅助容器外）作用：外保护标识：生物危险、警告、提示、放置方向（使用干冰时，应留有排气孔）A航空运输的A类包装（UN号2844JA如有破损、渗漏或遗失请立即通知当地卫生行政部门联系人：联系电话：V收样单位：详细地址：邮政编码：联系人：联系电话：送样单位：详细地址：邮政编码：联系人：联系电话：生物危害授权人员方可进

17、入BSL-3实翰室名称:病原体名称:责任人:紧急联系电话：嶽微生物实验室生物安全标识中华人民共和国卫生彳盏嵇宦WS5892018消毒中洗眼装置生物安全应急处置箱消毒中病原微生物实验室生物安全通用准则(WS233-2002/2017)实验室应建立并维持风险评估和风险控制制度，应明确实验室持续进行风险识别、风险评估和风险控制的具体要求(参见附录A)o风险评估应以国家法律、法规、标准、规范，以及权威机构发布的指南、数据等为依据。对已识别的风险逬行分析，形成风险评估报吿。品誰穎鞭奉勰髓黔子时,应识实验活动涉及致病性生物因子的已知或；特性涉及致病性生物因子的实验活动。&实验活动涉及到遗传修饰生物

18、体(GMOs)时，应考虑重组体引起的危害。游涉及致病性生物因子的动物饲养与实验活动。»感染性废物处置过程中的风险。&实验活动安全管理的风险。沪涉及致病性生物因子实验活动的相关人员。游实验室设施.设备。沪实验室生物安保制度和安保措施，重点识别所保藏的或使用的致病性生物因子被盗、滥用和恶意释放的风险。&己发生的实验室感染事件的原因分析。以下情况发生时>应进行风险再评估。沪病原体生物学特性或防控策略发生变化时;沪开展新的实验活动或变更实验活动（包括设施.设备.人员.活动范沪操作超常规量或从事特殊活动；沪本实验室或同类实验室发生感染事件.感染事故;沪相关政策、法规.标准

19、等发生改变。三.BSL2实验室的设施.设备要求实验室生物安全通用要求GB19489-2008病原微生物实验室生物安全通用准则(WS233-2017)7生物安全实验室：通过防护屏障和管理措施,达到生物安全要求的病原微生物实验室。生物安全实验室由防护区和辅助工作区组成OA实验室防护区：实验室的物理分区，该区域内生物风险相对较大，需对实验室的平面设计、围护结构的密闭性、气流，以及人员逬入、个体防护等逬行控制的区域。9实验室辅助工作区：是指生物风险相对较小的区域，也指生物安全实验室中防护区以外的区域。»核心工作间：是生物安全实验室中开展实验室活动的主要区域,通常是指生物安全柜或动物饲养和操作

20、间所在的房间。9缓冲间：设置在被污染概率不同的实验室区域间的密闭室。需要时，可设置机械通风系统，其门具有互锁功能，不能同时处于开启状态。防护屏障（硬件）：级屏障：操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级二级屏障：生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二隔离。（安全设备）级隔离（设施）。管理措施（软件）：实验室管理规程标准操作程序6生物安全实验室在设计上是“盒中盒”的结构9主要采用了物理隔离分区和负压通风过滤技术。物理隔离分区：用物理隔断（包括墙体）和密闭门把实验室与公共的外环境隔开。负压通风过滤：通过控制气流速度和方向，使气流从污染概率小区域流向污染概率高区域，并通过HEPA滤器过滤后排放。沪HE

21、PA滤器的滤材是多层、网格交错排列的。卩通常以0.3um微粒为测试物，在规定的条件下滤除效率高于99.97%的空气过滤器。FilterFramaContinuousShtMstofFlatFirterMediumBond8arwoenFdgrPack厲我lntr«4FramoHEPAFlltorHEPAifi过筛：直径大于滤材网眼的颗粒被拦截;卩沉降：对于直径0.3阿以上的气溶胶粒子作用较强。气溶胶粒子直径虽然小于网眼，由于粒子的重力和热沉降或静电沉降作用也可能被阻拦在滤材上;。惯性撞击：气溶胶粒子直径虽然小于网眼，由于粒子的惯性撞击作用也可能被阻拦在滤材上；离子扩散：对于直径小于0

22、.1卿的气溶胶粒子作用较强。气溶胶粒子直径虽然小于网眼，由于粒子的扩散作用也可能被阻拦在滤材上。生物安全实验室安全设备防护原理9实验室内所有的污染物，包括废物、废液和使用过的器材、物品，必须消毒灭菌后才能带出实验室消毒灭菌设备9所有可能产生微生物气溶胶的实验操作，都应将微生物气溶胶限制在一个很小的空间范围内，使操作人员与污染空气隔离开生物安全柜（二）生物安全柜具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低实验过程中产生的生物性气溶胶对操作者和环境污染的风险。生物安全柜分三个级别，共有六种：I级II级Al、A2、Bl、B2m级大约618cm处分开，其中的一半通过前面的排风格栅，而另一半则通过

23、后面的排风格栅排出排风格栅排出，从而为实验产品提。房间空气污染空气HEPA过滤空气A：前开口；B：可视窗口；C：排风HEPA过滤器；D：后面的压力排风系统；E：送风HEPA过滤器；F：风机II级A2型生物安全柜1、风机将房间空气经前窗操作口引入安全柜内并进入前面的进风格栅内2、前操作窗口流入气流速度至少应该达050m/s3. 供气先通过送风HEPA过滤器，再向下流动通过工作台面4、空气在向下流动到距工作台面5. 所有在工作台面形成的气溶胶立刻被向下的气流带走，并经两组供最好的保护6、气流接着通过后面的负压通风系统到达位于安全柜顶部介于供风和排风过滤器之间的空间7、70%经供风HEPA重新返回操

24、作区域，30%经排风HEPA排入房间或外面超净工作台的原理:水平层流的洁净台原理图垂直层流的洁净台原理图生物安全柜必须是通过安全认证标准的产品美国NSF49：2002欧盟EN12469:2000中国SFDAYY0569-2005生物安全柜的安装位置避开通道处，远离能破坏由工作空气屏障产生的隔离层的房间气流。沪安全柜不应放在流通空气入口，以免空气能吹过前操作或吹向排气过滤器。沪与墙壁.房顶最好要有30cm的间距，最少应有8cmo生物安全柜的使用规范9正确使用生物安全柜可以使操作者免受气溶胶的攻击,但并不能避免溅出、破裂发生对操作者造成的威胁。9任何造成安全柜内气流紊乱的不良操作，都会危及操作者的

25、安全。9生物安全柜的性能应定期逬行检测。9尽可能不在柜内使用酒精灯，必需时选用安全酒精灯。9可用微型的电灼烧器逬行细菌接种,或使用一次性接种环。红外接种环灭菌器【独具魅力病质之选】§00*A多功能电灼式接种环（针）2、使用时不要打开玻璃观察窗。3、开始工作之前，列出实验所需物品的清单，先用75%乙醇消毒物体表面后将所需物品放入，以避免双臂频繁进入破坏气流。4、打开紫外灯照射30分钟。5、打开风机5T0min,调整好操作椅的高度，使操作者的脸部在工作窗口之上。操作过程中注意窗式报警器和桂流1BiologicalSafetyCabinetuU0.31K13I物品摆放与防污染措施1. 尽量

26、少放仪2、摆放物品不要阻塞排气格栅的空气流通。3、废物容器/袋必须放在安全柜内o4、安全柜内洁净物品/污染物品分别放置在不同区域。在操作区域铺设吸收垫或消毒液湿巾O6、操作尽量在工作台中央或后部，注意动作对定向气流的影响。7、工作用纸不允许放在生物安全柜内o在生物安全柜上工作在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到驛区的方向进行手晟自物晶磁污弟韵IK域废奔物托盘垃圾袋r'llw唯）关机前污染的清除仁在实验结束时，包括仪器在内的生物安全柜里的所有物百清除表面污染后，才能移出安全柜;2、在每次使用后/每天实验结束时要清除生物安全柜内表面的污染，工作台面和内壁要用适当的消毒剂进行擦拭以清除表

27、面的污染，但不要擦拭送风滤器的扩散板；3、在对目标生物体有效时，可以采用75%酒精来消毒。如使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，还必须用清水再次进行擦拭。4、关机前应使风机继续运行5min以净化内部的气体。柱物安全柜的净化在进行生物安全柜维护、更换HEPA过滤器、性能测试以及重新安置之前,必须对已用于感染性材料工作的生物安全柜进行净化处理。一般常用的消毒剂包括甲醛、过氧化氢、二氧化氯等。甲醛熏蒸9最传统的气体消毒方法，成本最为低廉。沪有致癌作用，已经越来越受到使用限制。注意：甲醛熏蒸消毒前，所有氯化氢必须从安全柜中移开。氯化氢在f存在时，在环境空气情况下，会形成致癌物二氯甲基瞇CME）。甲醛熏蒸器过氧

28、化氢蒸汽现在有_种新的方法可完全代替传统的甲醛熏蒸，既采用过氧化氢蒸汽对生物安全柜逬行消毒，通常发生器通过一个喷射接与主舱体连罷訓翻齬翩接口'同如果这两个配置都没有的话，可以使用一个临时的门封板，并且已经预装好了合适的连接接,将其安装在前面操作上，通过门封上的接将过氧化氢蒸汽喷入生物安全柜内。潺第三节.高压灭菌器按冷空气排放方式分为两种：下排气式（重力置换式）压力蒸汽灭器和预真空式压力蒸汽灭菌器普通压力蒸汽灭菌器在设计时一般不考虑排出的冷空气对环境的污染,在生物安全实验室的压力蒸汽灭菌器的排气管道上应该有冷空气消毒处理装置。下排气式压力蒸汽灭菌器9利用重力置换的原理，使热蒸汽在灭菌器中

29、自上而下将冷空气由下排气孔排出，排出的冷空气由饱和蒸汽取代，利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。JAPANtomygwSS-2SCAlON落先二卅i一_一LMQ.R4用）si沁预真空式高压灭菌器9采用脉动真空排气方式消除灭菌室内残存冷空气对温度的影响（排除率99%）,既加，快了升温速度，减少了对被灭菌物品的损伤，又充分保证了灭菌温度均匀性。生物安全密封气体锁死装置，冷凝水和废水通过封闭的管路逬行安装地点的排水口。收，最终通过密封的接连接蠶备箱醵蠶据聲蟲黜药兰爲1舉。双扉预真空高压灭菌器卩双门互锁。9双侧开门的预真空高压灭菌器特别适用于有清洁区、污染区之分的场所，专门处理由污染区逬入清洁区的污染物

30、品。6负压BSL-2和BSL-3实验室。双扉脉动真空高压灭菌器（BSL2）SMINW口：.N越灭菌效果监测。化学指示卡（管）法：将即能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间的化学指示卡（管）放入物品中央，经一个灭菌周期后，取出指示卡（管），根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。生物监测法：指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽匏(ATCC7953或SSIK31株)GB19489-20086.1中规定BSL-1实验室的设施和设备应满足以下要求：6.1.1实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。6.1.2应有防止节肢动物和啮齿动物逬入的措施。亠6.1.3应设洗手池，宜设置在

31、靠近实验室的出处。®6.1.4在实验室门处应设存衣或挂衣装置，可将个人服装与实验室工作服分开放置。水.耐化学品和消毒剂不应铺设地毯。6.1.6实验室台柜和座椅等应稳固，边角应a6.1.7实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面应防水、耐腐蚀、耐扌痂d坚固。61.8实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。61.9应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并应不妨碍逃生和急柬°姑蠶潮鈔然通风。如果采用机械通96.1.12实验室内应避免不必要的反光和强光。30米内»61.安全措&6.1.16施，应&6.1.1

32、7应设应急照明装置。1.18应有足够的电力供应。61.19应有足够的固定电源插酋-鹹疑设备權触同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。6.1.20供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回流设计。6.1.21应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材.急救器材等。&6.1.22应配备适用的通讯设备。亠6.1.23必要时，应配备适当的消毒设备。第五节、BSL-2实验室的设施和设备要求GB19489-20086.2中规定BSL-2实验室的设施和设备应满足以下要求：6.2.1适用肘，应符合本标准6.1的要求。6.2.2实验室主入的门、放置生物安全柜

33、实验间的门应可自动关闭。6.2.3实验室工作区域外应有存放大量的备用物品的条件。6.2.4应在实验室工作区配备洗眼装置。其它适当的消巔暮貫6.2.6应在操作经空气传播致病性生物材料的实验间内配备生物安全柜。6.2.7生物安全柜的安装和使用应遵循制造商的建议。如果生物安全柜的排风在室内循环，室内应具备通风换气的条件；如果使用需要管道排风的生物安全柜，应通过独立于建筑物公共通风系统的管道排出。琛麟歸斜重要设备如培养箱、生物陕西省CDC二级生物安全实验室示意图常压常压实骑宰负压实验室淋浴间机房收样登记室缓冲间U内廊室生物安卫9实验室主入处应有标识，明确说明生物防护级别.操作的生物因子、实验室负责人姓

34、名.生物危害授权人员方可进入BSL-3紧急联络方式和国际通用的生物危险符号；适用时，应同时注明其它危险。实翰室名称:病原体名称:M任人:紧急联系电话：四.生物安全实验室良好工作行为指南B194892008»操作者必须履行良好的行为规范才能从最大限度上保证实验室的生物安全。»良好的生物安全实验室技术规范要满足保护操作者和实验环境的要求，必要时还要考虑对操作对象的保护。»正确的生物安全意识可以使操作者最大限度地保护自己，避免失误和事故，并且即使发生意外，也会进行妥善的处置。实验室感染的传播链容器中的病原体< 规程/设备泄漏< 规程/设备传播< 个人防

35、护装备感染途径/感染剂量易感宿主< 预防接种硬件：实验室的设计建造设备的配置个人防护装备软件：严格的管理规程良好的操作规范潜伏期医学监测轻度（vlO个甄粒*中度（11100个甄粒H重（100个题粒H轅片凝集试验；a腹腔接种动物，局部不涂消毒剂尸离心时离心管破裂倾倒毒液；4实验动物尸体解剖，4打碎干燥菌种安甑，4火焰上灼热接种环汁用乳沐研磨动物组织；4打开干燥菌种安甑；4颅內接种5心离心沉淀刖后注入、倾到、混悬毒液"搅拌后立即打开搅样器盖;十接种鸡胚或抽取培盍液滴格在不同表面上2十，小白鼠豊內接种；亠养菠；*用注射器从安甑中抽取毒菠；4注射器针尖脱落喷出毒液;+接种环接种平典、试

36、管或三角烧瓶等;十打开培养容器的蝮龌瓶盖学A扌率碎带有培养物的平奥；4刷衣服、拍打衣服卩实验室气溶胶感染的控制»减少微生物气溶胶的产生（操作技术）4阻断微生物气溶胶的扩散（设施、设备）4防止微生物气溶胶的人体暴露和吸入（个人防护装备）生物安全实验室良好工作行为指南GB佃4892008附录AA1引言本附录旨在帮助生物安全实验室制定专用的良好操作规程。实验室应牢记，本附录的内容不一定满足或适用于特定的实验室或特定的实验室活动，应根据实验室的风险评估结果制定适用的良好操作规程。A2生物安全实验室的清洁啟麓咼行霹2.3定期清洁墙面，如果墙面有可见污物时，及时进需清洁和消毒。不宜无目的或强力清

37、洗，避免破坏墙iHJo2.4J在抽积尘的部位，不常用的物品最好存放2.1由受过培训的专业人员按照专门的规程清洁实验和窗嚨斂卿鯛勞清洁地2.2保持工作表面的整洁。每天工作完后都要对工作歆铮啟亀鱷辭I挂式的台下»2.5清洁地面的时间视工作安排而定，不在日常工作时间做常规清洁工作。用浸有清洁剂的湿拖把清洗地板是最常用的方法；家用型吸尘器不适用于生物安全实验窒使用；不要使用扫帚等扫地。新用普通废物袋收集塑料或纸制品等非危险性亠蹲|»收集心注射器、碎玻璃、亠28用专用的耐高压蒸汽消毒的塑料袋收集任何具有生物危险性或有潜在生物危险性的废物。根据废弃物的特点选用可靠的消毒方式，比如是否包

38、含基因改造生物.是否混有放射性等其它危险物.是否易形成胶状物堵塞灭菌器的排水孔等，要监测和评价消毒效果。耐受Prions病细菌芽抱敏感微小隐抱子虫CryptosporidiumparvumTB,M>terrae)(女IHBV)分枝杆菌（如无包质炎真菌（如，念珠菌属，曲霉属）细菌繁殖体（如：金葡，绿脓）包膜病毒（如：流感、麻疹、HIV）亟低效消毒剂水平.常用化学灭菌剂的性能比较杀菌剂使用浓度(%)消毒水平被灭活微生物特征细菌包膜病毒无包膜病毒结核分枝杆菌细菌芽抱含氯高效+/-过氧乙酸0.00102高效+戊二醛2高效+甲醛38高效冲效+/-酒精70%中效+季胺盐0.4丄a低效+消毒剂腐蚀性有

39、害残留物被有机物灭活皮肤、眼刺激性呼吸道刺激性含氯+-过氧乙酸+-+-戊二醛-+-+甲醛-+-+酒精+/-+-季胺盐-+常用化学灭菌剂的安全性及特征注意事项1）氯气具有强毒性！因此只能在通风良好的地方储存和使用。2）漂白剂不能与酸混合以避免氯气快速释放。3）氯的许多副产物可能对人体及环境有害,避免滥用含氯消毒剂,特别是漂白剂。二：LI1集外线消毒紫外线适用于空气.物体表面等消毒。消毒使用的紫外线是C波紫外线f波长范Bl是200nm275nmf杀菌作用最强的波段是250nm270nm紫外线光源必须使用能够产生达到国家标准的辐照值杀菌紫外灯,普通30W直管紫外灯在距离灯管处检测的辐射253.7nm

40、o室安装紫外灯的数量为平均每m3不少于1.5W照射时间不少于30mino°3.2对个人日常清洁和消毒的要求，如洗手、淋浴（适用时）等。»3.3对/处理隐3a3.1建立并执行准入制度。区不要饮食、抽烟、八人行为的要求，一形眼镜.使用化体防护装备，如手套、护目镜、防护服、卩34正确使用罩、帽子、亠3.5JR手套工作。每当污染、破损或戴一定时间后，更换手套;戛当操伍危险性材料的工作结束时隆去手窘并洗手魯开1斓吏翳籍鹭。严格麝洗手數程。犢清戴手套注意要点:3）口;脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一手腕部的屈題外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手套腕部内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状;丢弃在高压消毒袋中并进行消毒处理。曜生物或其他有害物质有T佩戴»3.7存在空气传播的风险时需要逬行呼吸防护，用于呼吸防护的罩在使用前要进行适配