开题报告0928

1、Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design学 生：谢 欣导 师：彭 成（教授） 韩 波（副教授）专 业：药 理 学青黛中靛红的结构改造及抑菌活性研究Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design目录CONTENTS预期结果和安排3 3经费预算4 4选题背景和意义1 1研究内容和方案2 2Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design目录CONTENTS预期结果和安排3 3经费预算4 4选题

2、背景和意义1 1研究内容和方案2 2Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design选题的背景 青黛，由各种产蓝植物青黛，由各种产蓝植物如藕蓝，马蓝，寥蓝，木蓝如藕蓝，马蓝，寥蓝，木蓝等茎叶发酵加工制成，可内等茎叶发酵加工制成，可内服及外敷，有清热、凉血、服及外敷，有清热、凉血、解毒之效。解毒之效。 现代药理研究现代药理研究:抗菌抗菌，抗，抗炎，调节免疫，保护肾脏，炎，调节免疫，保护肾脏，抗肿瘤，保肝利胆之功效。抗肿瘤，保肝利胆之功效。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertan

3、ker Design选题的背景靛玉红青黛酮靛蓝色胺酮其他靛红青黛化学研究 有文献显示，青黛中的有文献显示，青黛中的靛红靛红和色胺酮为其有效抑菌成分。但目前对靛红和色胺酮为其有效抑菌成分。但目前对靛红及其衍生物的研究较少。及其衍生物的研究较少。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design选题的背景靛红，又名吲哚醌，属于吲哚类生物碱，是中靛红，又名吲哚醌，属于吲哚类生物碱，是中药青黛的主要活性成分，也是存在于海洋生物药青黛的主要活性成分，也是存在于海洋生物龙虾及人体的内源性天然活性化合物。龙虾及人体的内源性天然活性化合物。药理活

4、性：药理活性：抗菌抗菌、抗动脉粥样硬化、降低胆固、抗动脉粥样硬化、降低胆固醇、抑制血管内皮细胞生长因子、抗癌、预警醇、抑制血管内皮细胞生长因子、抗癌、预警帕金森病及调节脑内乙酰胆碱和多巴胺的平衡帕金森病及调节脑内乙酰胆碱和多巴胺的平衡等。等。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design研究的目的和意义 通过对青黛中靛红的分离、提取，运通过对青黛中靛红的分离、提取，运用现代化学合成手段，结合当今国际前沿用现代化学合成手段，结合当今国际前沿的合成技术，对靛红进行结构改造，并对的合成技术，对靛红进行结构改造，并对改造后的产物进行抑

5、菌活性研究。改造后的产物进行抑菌活性研究。目目的的意意义义 应用现代有机化学合成技术研究我国应用现代有机化学合成技术研究我国的传统医药，以期得到具有活性较高、毒的传统医药，以期得到具有活性较高、毒性较小的手性先导化合物。性较小的手性先导化合物。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design目录CONTENTS预期结果和安排3 3经费预算4 4选题背景和意义1 1研究内容和方案2 2Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design研究流程分离分离 水煎水煎-乙醚提

6、取乙醚提取-层析柱分离层析柱分离-重结晶重结晶合成合成活性研究活性研究 滤纸片抑菌圈初试滤纸片抑菌圈初试 最小抑菌浓度的测定最小抑菌浓度的测定Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design提取分离青黛（粉末）青黛（粉末）青黛水煎液青黛水煎液酸性浓缩液酸性浓缩液加蒸馏水沸水加热1h，过滤，重复3次，合并滤液浓缩至2L，以浓盐酸调pH值至2-3浓缩醚液浓缩醚液乙醚提取3次脱水棕黄色段棕黄色段Rf=0.48Rf=0.48段段橙红色橙红色针晶针晶于200g硅胶柱进行柱层析，氯仿-丙酮(95：5)冲洗于100g硅胶柱进行层析，氯仿-丙酮

7、(9：l)展开，乙醚洗脱蒸干，以水重结晶Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design结构改造-合成思路3-位取代螺环化合物Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design结构改造-合成思路氧杂螺环化合物六元氮杂螺环化合物具有更多手性中心和取代基的全碳环螺环化合物Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design结构改造-氧杂螺环化合物合成初步拟定合成路线：初步拟定合成路线：Tankertanker

8、 DesignTankertanker DesignTankertanker Design结构改造-氧杂螺环化合物合成反应条件筛选及优化：反应条件筛选及优化：溶剂溶剂催化剂催化剂温度温度时间时间Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design结构改造-氧杂螺环化合物合成试剂购买 包含不同基团的原料，R1、R2、PG多样化底物制备 将购买到的R1、R2、PG进行排列组合，得到不同底物催化剂制备 二苯基脯氨醇硅醚的制备 氯铬酸吡啶的制备合成实验流程：合成实验流程：靛红衍生物的靛红衍生物的合成及鉴定合成及鉴定HPLC 13C NMR1

9、H NMRTankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design抑菌活性研究滤纸片抑菌圈初试图示：滤纸片抑菌圈初试图示：培养皿固体培养基菌悬液滤纸片（浸有不同产物）（浸有不同产物）抑菌圈Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design抑菌活性研究 滤纸片抑菌圈初试流程：滤纸片抑菌圈初试流程： 牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水 l.5kg/cm2压力下，灭菌20min培养基的制备 菌种的选择：大肠杆菌、铜绿假单胞菌 活化后制成菌数约106CFu/ml的菌悬液菌悬液的制

10、备 浸有不同浓度产物的滤纸片在平皿内间隔一定的距离贴4片，放入培养箱中35培养 取游标卡尺测量抑菌圈直径，同样的方法平行测试3次，求4个抑菌圈直径平均值抑菌圈直径的测量Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design抑菌活性研究 滤纸片抑菌圈初试分组：滤纸片抑菌圈初试分组：空白组 二甲基亚砜靛红组 不同浓度的靛红二甲基亚砜溶液产物组 不同浓度的靛红衍生物二甲基亚砜溶液Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design抑菌活性研究 最小抑菌浓度（最小抑菌浓度（MICM

11、IC）的测定）的测定空白组药物组（浓度作对倍稀释）浓度1浓度2浓度3浓度4含药肉汤不含药肉汤供试菌液供试菌液37孵育18-24小时，以不显示混浊、细菌未生长的那一管药液稀释度作为MIC。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design目录CONTENTS预期结果和安排3 3经费预算4 4选题背景和意义1 1研究内容和方案2 2Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design预期结果ndnd2 2 合成一系列的靛红衍生物st st1 1 成功分离青黛中的靛红成分rd

12、rd3 3 找出具有高抑菌活性的手性先导化合物 与对照品吲哚醌与对照品吲哚醌进行薄层层析对比，进行薄层层析对比，以以RfRf值是否相同值是否相同为为产品评价指标。产品评价指标。 根据可以购根据可以购买的底物合成买的底物合成R R1 1* *R R2 2* *PG=NPG=N种种靛红衍生物。靛红衍生物。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design2011.12实验安排对青黛中吲哚醌进行分离提取2012.1底物和催化剂制备2012.5产物的合成及鉴定2012.10抑菌活性实验最小抑菌浓度实验2013.12013.3Tankert

13、anker DesignTankertanker DesignTankertanker Design前期研究基础 反应条件筛选：反应条件筛选： 部分产物：部分产物：Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design前期研究基础Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design前期研究基础Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design前期研究基础Tankertanker DesignTankertank

14、er DesignTankertanker Design前期研究基础Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design目录CONTENTS预期结果和安排3 3经费预算4 4选题背景和意义1 1研究内容和方案2 2Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design经费预算测试费用：测试费用：3 3万。包括核磁共振测试万。包括核磁共振测试1.51.5万，高效液相测试万，高效液相测试1 1万，理论计万，理论计算算0.50.5万。万。菌种费用：菌种费用：1 1万。万。出版物出

15、版物/ /文献文献/ /信息传播费：信息传播费：0.50.5万。包括：文件检索、复印打印、期刊万。包括：文件检索、复印打印、期刊版面费等。版面费等。原料费用：合成各种催化剂、底物等化工原材料，原料费用：合成各种催化剂、底物等化工原材料，2 2万。万。试剂费用：各种分析纯的反应溶剂、色谱纯的试剂费用：各种分析纯的反应溶剂、色谱纯的HPLCHPLC溶剂等，溶剂等，1 1万。万。其他费用：新购置或更换一些手性色谱柱，各种玻璃反应仪器、劳保其他费用：新购置或更换一些手性色谱柱，各种玻璃反应仪器、劳保用品等用品等0.50.5万。万。包括：磁力搅拌器、真空水泵、真空油泵等小型反应仪、超净无菌工包括：磁力搅拌器、真空水泵、真空油泵等小型反应仪、超净无菌工作台，真空干燥箱、电热恒温培养箱、