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文档简介

1、浅谈血常规2014级 彭滨目目 录录01血常规仪器检测原理02常见误差原因03常见血液病散点图讨论血常规仪器检测原理三种通道DIFFDIFF通道通道(粒系及单核系)(粒系及单核系)光散射光散射(红细胞、血小板)(红细胞、血小板)WBC/BASOWBC/BASO通道通道(嗜酸及分叶核)(嗜酸及分叶核)1 1 光散射光散射与细胞化学染色法白细胞分类计数与细胞化学染色法白细胞分类计数(SYSMEX,SYSMEX,迈瑞迈瑞) )1 1)过氧化物酶检测通道()过氧化物酶检测通道(DIFFDIFF通道):通道): 过氧化物酶活性过氧化物酶活性; ; 嗜酸性粒细胞阳性最强,嗜中性粒细胞强阳性嗜酸性粒细胞阳性

2、最强,嗜中性粒细胞强阳性 单核细胞弱阳性单核细胞弱阳性 淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。 样本样本+ +溶血剂溶血剂+过氧化酶过氧化酶(MPO)底物及现色剂底物及现色剂 光散射光散射 不同颜色的散点图不同颜色的散点图散射图定位:散射图定位:X X轴为吸光率(酶反应轴为吸光率(酶反应强度)强度)Y Y轴为光散射(细胞大小)显轴为光散射(细胞大小)显示检测结果。示检测结果。 鞘流技术使细胞单个通过检测区鞘流技术使细胞单个通过检测区,从而识别和计算细胞个数。,从而识别和计算细胞个数。BS5800BS5800和和SYSMEXSYSMEX在这通道计算白细在这通

3、道计算白细胞总数,胞总数,BS5300BS5300有专门的有专门的WBCWBC通道,通道,利用阻抗法计算总数利用阻抗法计算总数2 2)嗜碱性粒细胞)嗜碱性粒细胞/ /分叶核检测通道分叶核检测通道(WBC/BASOWBC/BASO通道通道) ) 溶血剂溶血剂Strmatolyzer-BAStrmatolyzer-BA将除嗜碱将除嗜碱细胞以外的细胞溶解,细胞以外的细胞溶解,光散射光散射 得到得到WBC/BASOWBC/BASO散点图散点图2 2 光散射法红细胞体积和光散射法红细胞体积和HGBHGB检测原理检测原理低角度低角度(2(2-3-3) )光散射:测量红细胞体积光散射:测量红细胞体积高角度高

4、角度(5(5-15-15) )光散射:测定红细胞血红蛋白浓度光散射:测定红细胞血红蛋白浓度得到得到MCVMCV、MCHMCH、MCHCMCHC测定值,计算出测定值,计算出RDWRDW、红细胞血红、红细胞血红蛋白分布宽度(蛋白分布宽度(red blood cell hemoglobin red blood cell hemoglobin distribution widthdistribution width,HDWHDW)MieMie理论(理论(Mie theory of light scatter for Mie theory of light scatter for homogeneous

5、 sphereshomogeneous spheres):当球形化的血小板一个一个):当球形化的血小板一个一个通过激光照射区时:通过激光照射区时:高角度(高角度(5 5 1515)光散射:检测细胞折射指数)光散射:检测细胞折射指数(reactive indexreactive index,RIRI););低角度(低角度(2 23 3)光散射:测量细胞大小。)光散射:测量细胞大小。大血小板与各种碎片如果体积相似,但由于内容物不大血小板与各种碎片如果体积相似,但由于内容物不同,同,RIRI相差较大,故能鉴别。相差较大,故能鉴别。3.3.光散射法血小板检测原理光散射法血小板检测原理文 本 内 容低低

6、角角度度散散射射信信号号 体体积积大大小小巨大未成熟细胞区LIC中性粒+嗜碱粒细胞区NEU+BAS异型淋巴细胞区ALY中性粒核左移细胞区LEF SHIF嗜酸性粒细胞区EOS嗜碱性粒细胞区BAS(淋巴细胞区LYM单核细胞区MON02常见误差原因1 白细胞计数假性增高白细胞计数假性增高 1.1 由于标本采血不顺利,或抗凝剂不足,或混匀不充分,致使标本产生凝血,血小板凝集。解决方法:加适量的抗凝剂,重新采血,充分混匀标本后重新检测。1.2 天气寒冷,由于室温低,产生蛋白沉淀小块,这时仪器直方图血小板右边曲线下不来。解决方法:37 加温,离心后等量生理盐水兑换血浆,充分混匀标本后重新检测。1.3 标本

7、红细胞溶解不彻底 见于肝病、异常血红蛋白症、高脂血症、红细胞膜变化而无法完全溶血(肝硬化)等患者,这时仪器直方图左边淋巴峰抬高。解决方法:标本二倍稀释,离心后等量生理盐水兑换血浆,充分混匀标本后重新检测,记得结果要乘以稀释倍数。1.4 标本出现幼红细胞 见于新生儿、脐带血、溶血性贫血等,这时直方图淋巴峰双峰。解决方法:手工计数。1.5 标本出现大型血小板 见于脾亢、血小板减少症等,由于疾病,这些患者的老中青血小板同时释放出来参加血液循环。解决方法:手工计数。 文 本 内 容02常见误差原因2 白细胞计数假性降低白细胞计数假性降低2.1 寒冷性白细胞凝集 解决方法:37 加温,充分混匀标本后重新

8、检测。2.2 非寒冷性白细胞凝集 这时直方图右边出现小山峰,涂片有凝集。解决方法:37 加温或等量生理盐水兑换血浆,充分混匀标本后重新检测。3 红细胞计数假性增高,一般系人为因素,不存在真正原因红细胞计数假性增高,一般系人为因素,不存在真正原因标本久置后未充分混匀,底部吸样。解决方法:充分混匀可避免。人体大量脱水,使血液浓缩,此时另一个参数红细胞压积会升高。解决方法:脱水纠正后重新采集标本检测。4 红细胞计数假性降低红细胞计数假性降低红细胞凝集,这时MCV值很大,镜下有凝集小块。解决方法:37 水浴孵5 min1,轻轻混匀,再检测。5 血红蛋白假性增高血红蛋白假性增高5.1 乳糜标本 由于溶液

9、浑浊,引起吸光度增加,造成Hb结果假性增高。解决方法:等量生理盐水兑换血浆。5.2 白细胞异常增高 当大于100.010个L时2,由于白细胞过高,溶液浑浊,引起吸光度增加,造成Hb结果假性增高。解决方法:用HiCN分光光度法测定Hb,比色前要高速离心取上清液比色。文 本 内 容02常见误差原因6 MCV假性增高假性增高6.1 高血糖、高氮质血症、高能量输液,钻入红细胞内后肿大。解决方法:离心比积测定,二倍稀释后5 min再测定。6.2 小淋巴细胞大量出现,被当作红细胞。6.3 红细胞凝集,MCV 值升高,红细胞计数降低。6.4 红细胞长时间放置产生球状化。7 血小板计数假性增高血小板计数假性增

10、高7.1 标本原因 标本中存在大血小板小红细胞、细胞碎片、冷凝集素引起细胞凝集等。小细胞是引起血小板计数结果产生误差的常见原因 ,现代化血细胞计数仪可采用自动设置浮标界限方法进行排除。对于冷凝集素引起的干扰,可以37 水浴孵5 min后重新上机检测。7.2 仪器在安装时出现的一些问题 如接头松动、地线安装不好,对血小板均产生干扰,特别是地线连接出了问题,血小板基数可达15010个L以上,在这种情况下,必须马上查清原因,清洗调整仪器,装好地线,使血小板的基数为0,或手工复查后方可发报告,避免错误报告产生。7.3 试剂不合格(如沉淀很多) 不配套试剂,均可引起错误结果的出现。解决办法就是更换合格试

11、剂。文 本 内 容02常见误差原因8 血小板计数假性降低血小板计数假性降低8.1 采血后不能及时测定是血小板减少的一个重要原因 目前大部分血常规均用自动血球仪测定,由于一些原因,导致标本久置,这样会因血小板离体时间太长,发生变形、自溶、体积变小,太小的血小板,机器也会漏过,致使计数减少。因此采集的标本应该及时检测。8.2 静脉采血 必须一针见血,顺利采到标本,且与抗凝剂迅速摇匀,否则血小板体积小,离开血管后易粘附于血管破损处及组织(也会粘附于玻璃等部位),并相互聚集,使血小板计数减少。解决方法:重新采血,及时检测。8.3 巨大血小板现象 解决方法:手工计数。8.4 抗凝剂有时也会影响血小板计数

12、 如EDTA可引起非特异性血小板凝集,使血小板计数减少。换用肝素、枸橼酸钠抗凝可消除干扰。文 本 内 容低低角角度度散散射射信信号号 体体积积大大小小巨大未成熟细胞区LIC中性粒+嗜碱粒细胞区NEU+BAS异型淋巴细胞区ALY中性粒核左移细胞区LEF SHIF嗜酸性粒细胞区EOS嗜碱性粒细胞区BAS(淋巴细胞区LYM单核细胞区MON文 本 内 容03常见血液病散点图讨论正常样本正常样本正常样本正常样本老化样本老化样本中性粒细胞增多中性粒细胞增多中性粒细胞增多中性粒细胞增多嗜酸性粒细胞增加嗜酸性粒细胞增加嗜酸性粒细胞增加嗜酸性粒细胞增加嗜碱性粒细胞增加嗜碱性粒细胞增加嗜碱性粒细胞增加嗜碱性粒细胞

13、增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加核左移,未成熟细胞核左移,未成熟细胞-LIC核左移,未成熟细胞核左移,未成熟细胞-LIC核左移,未成熟(有核红?)核左移,未成熟(有核红?)核左移,未成熟(有核红?)核左移,未成熟(有核红?)异常异常/异性淋巴细胞异性淋巴细胞-ALY异常异常/ /异性淋巴细胞异性淋巴细胞-ALY-ALY人工镜检结果缺铁性贫血缺铁性贫血-IDA缺铁性贫血缺铁性贫血-IDA-地中海贫血地中海贫血维生素维生素B12缺乏症缺乏症寄生虫感染寄生虫感染粒细胞缺乏症粒细胞缺乏症粒细胞缺乏症粒细胞缺乏症慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病-CML慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病-CML慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病-CLL慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病-CLL急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病-ALL急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病-ALL急性原始粒细胞白血病急性原始粒细胞白血病-M2

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