溶菌酶的溶菌作用教学文案

1、溶菌酶的溶菌作用实验材料与器材实验材料与器材 1 1、人的唾液（含有溶菌酶）、溶菌酶标准品、生理盐水。、人的唾液（含有溶菌酶）、溶菌酶标准品、生理盐水。 2 2、细球菌（、细球菌（M.Lysodeikticus)M.Lysodeikticus)。 3 3、1.0%1.0%盐水琼脂管（盐水琼脂管（7 7-8mL/8mL/管）、灭菌的管）、灭菌的1mL1mL吸管、毛细吸管、吸管、毛细吸管、打孔器、平皿、竹签和橡皮乳头等。打孔器、平皿、竹签和橡皮乳头等。 注：注：唾液唾液 生理盐水（阴性对照）生理盐水（阴性对照） 溶菌酶（阳性对照）溶菌酶（阳性对照） 实验步骤：实验步骤：1 1、取灭菌的小平皿一个，

2、用灭菌、取灭菌的小平皿一个，用灭菌1mL1mL的吸管吸取的吸管吸取0.5mL(90.5mL(9亿亿/mL/mL）细球菌活菌菌液注入平皿内。）细球菌活菌菌液注入平皿内。2 2、取已溶化并冷却至、取已溶化并冷却至45-5545-55的生理盐水琼脂管一支，倾的生理盐水琼脂管一支，倾注于上述平皿内，迅速水平混匀，平放待凝。注于上述平皿内，迅速水平混匀，平放待凝。3 3、用打孔器（孔径为、用打孔器（孔径为6mm6mm）打孔，用竹签挑出孔中琼脂。）打孔，用竹签挑出孔中琼脂。4 4、先用清水漱口，略待片刻将唾液吐于灭菌平皿内，用毛细、先用清水漱口，略待片刻将唾液吐于灭菌平皿内，用毛细吸管吸出（吸管吸出（注意

3、不要有气泡，不要溢出注意不要有气泡，不要溢出），并分别加入生），并分别加入生理盐水和溶菌酶标准品。置理盐水和溶菌酶标准品。置3737，18h18h后观察结果。后观察结果。31预测实验结果预测实验结果 阳性结果：加在唾液空周围出现一圈很明显的溶菌环。阳性结果：加在唾液空周围出现一圈很明显的溶菌环。注意事项注意事项 在实验中应该注意无菌操作，否则杂菌生长会影响溶在实验中应该注意无菌操作，否则杂菌生长会影响溶菌环的观察菌环的观察 小吞噬实验小吞噬实验实验原理实验原理 机体内具有吞噬功能的细胞可分为两大类，即小吞噬细胞机体内具有吞噬功能的细胞可分为两大类，即小吞噬细胞和大吞噬细胞。小吞噬细胞一般指血液

4、中的和大吞噬细胞。小吞噬细胞一般指血液中的中性粒细胞中性粒细胞。 中性粒细胞（中性粒细胞（neutrophilicgranulocyteneutrophilicgranulocyte）在瑞氏染色血）在瑞氏染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细小的（小的（0.20.20.40.4微米）浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈微米）浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆状或杆状或2 25 5分叶状，叶与叶间有细丝相连。其颗粒表面有一分叶状，叶与叶间有细丝相连。其颗粒表面有一层膜包裹，颗粒中含髓过氧化物酶、酸性磷酸酶、吞噬素、层膜包裹，颗粒

5、中含髓过氧化物酶、酸性磷酸酶、吞噬素、溶菌酶、溶菌酶、葡糖苷酸酶、碱性磷酸酶等。中性粒细胞具趋化葡糖苷酸酶、碱性磷酸酶等。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。作用、吞噬作用和杀菌作用。实验材料与器材：实验材料与器材：1 1、表面葡萄球菌菌液（、表面葡萄球菌菌液（9亿亿/mL）。）。2、3.8%枸枸櫞櫞酸钠或肝素（酸钠或肝素（25U/mL）。）。3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、瑞氏、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、瑞氏-姬姬娒娒萨染料、萨染料、PH6.4PB、酒精、棉球、采血针等。、酒精、棉球、采血针等。实验步骤：实验步骤： 1 1、取厚凹玻片一张，在凹孔中滴加一滴（、取厚

6、凹玻片一张，在凹孔中滴加一滴（0.4mL0.4mL）3.8%3.8%枸枸櫞櫞酸酸钠或肝素（钠或肝素（25U/mL25U/mL）。）。 2 2、酒精棉球消毒手指后，用采血针从消毒部位采取、酒精棉球消毒手指后，用采血针从消毒部位采取2 2大滴（约大滴（约0.2mL0.2mL）加入凹孔中混匀。）加入凹孔中混匀。 3 3、加表皮葡萄球菌菌液、加表皮葡萄球菌菌液1 1 滴（滴（0.02-0.04mL0.02-0.04mL），然后用牙签轻），然后用牙签轻轻搅匀。轻搅匀。4 4、将玻片放湿盒内，置、将玻片放湿盒内，置3737孵箱中孵箱中40-50min40-50min。5 5、作用完毕，取出、作用完毕，取出

7、1 1滴制成薄片，自然干燥。滴制成薄片，自然干燥。6 6、置瑞氏液、置瑞氏液1min1min，置，置PH6.4PBPH6.4PB中中3min3min，置瑞氏，置瑞氏- -姬姬娒娒萨染萨染料染料染5-10min5-10min，蒸馏水洗，待干镜检。，蒸馏水洗，待干镜检。预测实验结果预测实验结果 胞浆呈淡蓝色或淡红色，细菌呈深蓝色或紫色，红胞浆呈淡蓝色或淡红色，细菌呈深蓝色或紫色，红细胞呈褐色，细胞核呈紫红色。细胞呈褐色，细胞核呈紫红色。注意事项注意事项 1 1、个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能力、个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能力亦不同。亦不同。 2 2、涂血片时不宜太厚，否则不宜观察。、涂血片时不宜太厚，否则不宜观察。 胞质呈无色或胞质呈无色或极浅的淡红色，极浅的淡红色，有许多弥散分布有许多弥散分布的细小的（的细小的（0.20.20.40.4微米）浅红或微米）浅红或浅紫色的特有颗浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆粒。细胞核呈杆状或状或2 25 5分叶状，分叶状，叶与叶间有细丝叶与叶间有细丝相连。相连。 油镜下见中性油镜下见中性粒细胞胞浆呈淡粒细胞胞浆呈淡兰色，核分叶、兰色，核分叶、紫红深染，葡萄紫红深染，葡萄球