081218高二生物《动物细胞工程2》

1、湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03动物细胞工程动物细胞工程2湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一一、动物细胞融合、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一一、动物细胞融合、动物细胞融合细胞细胞A A湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一一、动物细胞融合、动物细胞融合细胞细胞A A细胞细胞B B湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一一、动物细胞融合、动物细胞融合细胞细胞

2、A A细胞细胞B B杂种杂种细胞细胞湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一一、动物细胞融合、动物细胞融合细胞细胞A A细胞细胞B B杂种杂种细胞细胞物理法物理法化学法化学法湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一一、动物细胞融合、动物细胞融合细胞细胞A A细胞细胞B B杂种杂种细胞细胞灭活的病毒灭活的病毒物理法物理法化学法化学法湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：4.4.诱导方式诱导方式一、动物细胞融合一、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫

3、星远程学校2008年下学期制作 031.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。4.4.诱导方式诱导方式一、动物细胞融合一、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞4.4.诱导方式诱导方式一、动物细胞融合一、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学

4、期制作 031.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性细胞膜的流动性4.4.诱导方式诱导方式一、动物细胞融合一、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：4.4.诱导方式诱导方式指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性细胞膜的流动性物理法：离心、振动

5、、电激物理法：离心、振动、电激一、动物细胞融合一、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：4.4.诱导方式诱导方式指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEG)一、动物细胞融合一、动物细胞融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一、动物细胞融合一、动物细胞融合1.1.概念：

6、概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：4.4.诱导方式诱导方式指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒生物法：灭活的病毒湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 035.5.过程：过程：湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 035.5.过程：过程：动物动物细胞细胞A A动物动物细胞细胞B B湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远

7、程学校2008年下学期制作 035.5.过程：过程：动物动物细胞细胞A A动物动物细胞细胞B B诱导，融合诱导，融合湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 035.5.过程：过程：动物动物细胞细胞A A动物动物细胞细胞B B诱导，融合诱导，融合1 1个完整的个完整的杂交细胞杂交细胞ABAB湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 035.5.过程：过程：动物动物细胞细胞A A动物动物细胞细胞B B诱导，融合诱导，融合1 1个完整的个完整的杂交细胞杂交细胞ABAB注意：动物细胞的融合也需要把多个注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机

8、融合后，两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞再从中筛选杂交细胞湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 036.6.意义：意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。成为可能。湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 036.6.意义：意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。成为可能。7. 7. 应用：应用：成为研究细胞

9、遗传、细胞免疫、肿成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体抗体湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031.1.什么是抗体？什么是抗体？2.2.抗体是由何种细胞产生的？抗体是由何种细胞产生的？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031.1.什么是抗体？什么是抗体？2.2.抗体是由何种细胞产生的？抗体是由何种细胞产生的？抗体是具有免疫作用的蛋白质。抗体是具有免疫作用的蛋白质。湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作

10、 031.1.什么是抗体？什么是抗体？2.2.抗体是由何种细胞产生的？抗体是由何种细胞产生的？抗体是具有免疫作用的蛋白质。抗体是具有免疫作用的蛋白质。B B淋巴细胞受抗原刺激后，可淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。以产生抗体。湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03B淋巴细胞与抗体的关系：淋巴细胞与抗体的关系：湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03B淋巴细胞与抗体的关系：淋巴细胞与抗体的关系：1. B淋巴细胞受抗原刺激后，可以淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。产生抗体。2. 每一个每一个B淋巴细胞只分泌一种特淋巴细胞只分泌一种特异性抗体

11、。异性抗体。湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03B淋巴细胞与抗体的关系：淋巴细胞与抗体的关系：1. B淋巴细胞受抗原刺激后，可以淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。产生抗体。2. 每一个每一个B淋巴细胞只分泌一种特淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。异性抗体。传统的抗体生产方法及缺陷是传统的抗体生产方法及缺陷是什么？怎样解决这个问题？什么？怎样解决这个问题？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细

12、胞浆细胞 抗体抗体抗原抗原湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯抗原抗原湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；抗原抗原湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯筛选单

13、一浆细胞筛选单一浆细胞特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；抗原抗原湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯筛选单一浆细胞筛选单一浆细胞特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；不能增殖产生大量抗体不能增殖产生大量抗体抗原抗原湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯筛选单一浆细胞筛选单一浆细胞特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；产量低、反应不

14、够灵敏产量低、反应不够灵敏不能增殖产生大量抗体不能增殖产生大量抗体抗原抗原湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03一、单克隆抗体的概念一、单克隆抗体的概念由单个由单个B淋巴细胞经过无性繁殖淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的这一细胞群所产生的化学性质单一、特化学性质单一、特异性强异性强的抗体称为单克隆抗体。的抗体称为单克隆抗体。 湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下

15、学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？提示提示1 1：仅用细胞培养技术可行吗？：仅用细胞培养技术可行吗？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？提示提示1 1：仅用细胞培养技术可行吗？：仅用细胞培养技术可行吗？提示提示2 2：我们所学的哪种细胞是可以无：我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？限增殖的？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？提示提示1 1：仅用细胞培养技术可行吗？：仅用细胞培养技术可行吗？提

16、示提示2 2：我们所学的哪种细胞是可以无：我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？限增殖的？提示提示3 3：有什么方法能使：有什么方法能使B B细胞产生抗体细胞产生抗体 的能力和肿瘤细胞无限增殖能的能力和肿瘤细胞无限增殖能 力同时具备呢？力同时具备呢？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？设计方案：设计方案：湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞淋巴细胞只分泌一种特异性抗体只分泌一种特异性抗体

17、湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞淋巴细胞只分泌一种特异性抗体只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖能无限增殖湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞淋巴细胞只分泌一种特异性抗体只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖能无限增殖杂交细胞杂交细胞湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03

18、单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞融合、筛选细

19、胞融合、筛选 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓

20、瘤细胞细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选筛选, ,继续培养继续培养 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选筛选, ,继续培养继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞融合、

21、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选筛选, ,继续培养继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程体体外外培培养养注注射射到到小小鼠鼠腹腹腔腔湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03注射抗原注射抗原B B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选筛选, ,继续培养继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群单克隆抗体单克隆抗体 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程体体外外培培养养注注射

22、射到到小小鼠鼠腹腹腔腔湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 031. 原理：原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能产生足够数量即能迅速大量增殖，又能产生足够数量的单一抗体。的单一抗体。湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 过程过程湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 032. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞湖南长郡卫

23、星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择选择培养培养湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择选择培养培养杂交瘤细杂交瘤细胞胞(B-瘤瘤细

24、胞细胞)湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择选择培养培养杂交瘤细杂交瘤细胞胞(B-瘤瘤细胞细胞)克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择选择培养培养杂交瘤细杂交瘤细胞胞(B-瘤瘤细胞细胞)克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测杂交瘤杂交瘤细胞细胞湖南长郡卫星远程学校湖南

25、长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择选择培养培养杂交瘤细杂交瘤细胞胞(B-瘤瘤细胞细胞)克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测杂交瘤杂交瘤细胞细胞体外培养体外培养小鼠腹腔小鼠腹腔内增殖内增殖湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03诱导诱导融合融合2. 过程过程B淋巴淋巴细胞细胞骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择选择培养培养杂交瘤细杂交瘤细胞胞(B-瘤瘤细胞细胞)克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测杂交瘤杂交瘤

26、细胞细胞体外培养体外培养小鼠腹腔小鼠腹腔内增殖内增殖单克隆单克隆抗体抗体湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03思考：思考：1.1.本过程利用了哪些原理？本过程利用了哪些原理？2.2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合？细胞融合？湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03思考：思考：1.1.本过程利用了哪些原理？本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理胞培养原理2.2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合？细胞融合？湖南长郡卫星远程

27、学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03思考：思考：1.1.本过程利用了哪些原理？本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理胞培养原理2.2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合？细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞淋巴细胞分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03三、单克隆抗体的应用三、单克隆抗体的应用湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03三、单克隆抗体的应用三、单克隆抗体的应用单克隆抗体的单克隆抗体的优点：优点：特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高湖南长郡卫星远程学校湖南长郡卫星远程学校2008年下学期制作 03三、单克隆抗体的应用三、单克隆抗体的应用单克隆抗体的单克隆抗体的优点：优点：特异性强、灵敏度高特异性