脑缺血论文：缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠TLR4和NF-κB表达的影响

1、脑缺血论文：缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠TLR4和NF-kB表达的影响【中文摘要】第一部分大鼠局灶性脑缺血后处理动物模型的建立建立大鼠局灶性脑缺血后处理(ischemicpostconditioning,IP)模型，并确定IP对局灶性脑缺血再灌注(ischemicreperfusion,l/R)损伤发挥神经保护的最佳时间窗。方法：将成年健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组(n=10),假手术组、缺血再灌注组(I/R)组、IP-15S组、IP-30S组、IP-45s组和IP-60S组。采用线栓法阻塞大脑中动脉(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)建立局灶性脑缺血

2、再灌注模型。IP方法为在MCAO2f后对每个亚组大鼠分别给与3个循环的15s/15s、30s/30s、45s/45s、60s/60s再灌注/缺血。所有动物于再灌注24h进行神经功能缺损评分，并测定脑梗死体积及细胞凋亡的变化。结果：用线栓法成功建立大鼠缺血再灌注模型。与I/R组相比,IP-15s组、IP-30S组、IP-45S组大鼠神经功能缺损评分明显降低(PV0.05),其中IP-15S神经功能缺损评分低于IP-30S、IP-45s(P<0.05)OI/R组脑梗死体积及凋亡细胞计数显著增加,IP-15s组、IP-30S组、IP-45S组较I/R组显著降低，特别以IP-15S组明显(PvO

3、.05)。IP-60S组与I/R组无显著性差异(P>0.05)。结论：改良的线栓法效果可靠，是制备MCA再灌注的理想模型；缺血后处理能减轻局灶性的脑缺血再灌注损伤，其最佳时间窗为反复3次,15s/15s再灌注/缺血。第二部分缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠TLR4和NF-kB表达的影响探讨缺血后处理(IP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注时Toll样受体4(TLR4)和核因子-kB(NF-kB)表达的影响，阐明TLR4-NF-KB信号通路在脑缺血后处理中的作用。方法：将成年健康雄性SD大鼠110只,随机分为假手术组(n=10)、缺血再灌注(I/R)组(n=50)和缺血后处理组(IP)(n=50)。后

4、两组根据再灌注时间每组又分为6h、12h、24h、48h、72h五个亚组(n=10)。采用线栓法阻塞大脑中动脉(MACO)2h建立局灶脑缺血模型，后处理方法为大脑中动脉阻闭2h后持续再灌注前，行3个循环的15s/15s再灌注/缺血。对各组进行神经功能缺损评分,TTC染色测定脑梗死体积，免疫组化法检测脑组织TLR4和NF-kB蛋白的表达，原位杂交法检测TLR4和NF-kmRNA勺表达。结果：(1)I/R组和IP组大鼠均可见神经功能缺损及缺血侧大脑半球梗死。与I/R组相比,IP组大鼠脑梗死体积明显减少(PV0.05),神经功能缺失评分明显改善(P<0.05)。I/R组TLR4蛋白及mRNA在

5、再灌注6h开始升高,24h达高峰，之后逐渐下降。IP组TLR4蛋白及mRNA!达时间曲线与I/R组相一致，但与I/R组各相应亚组比较,IP组的TLR4蛋白及mRNA表达均明显降低(P<0.05)。(3)NF-kB蛋白及mRN在I/R组和IP组均与再灌注6h升高,24h达高峰后下降，与TLR4时间变化曲线相一致。与I/R组各相应亚组比较,TLR4蛋白及mRNA表达在IP组均明显降低(P<0.05)。结论：(1)缺血再灌注可引起TLR4和NF-kB的表达。(2)IP能抑制缺血再灌注后TLR4和NF-kB的表达，减小缺血再灌注损伤，改善神经行为功能【英文摘要】Partl:Establis

6、hmentofanimalmodelsoffocalischemicpostconditioning:Toestablishanimalmodeloffocalcerebralischemicpostconditioningandtoinvestigatetheopticaltimewindowsofischemicpostconditioningagainstfocalcerebralischemicinjuryinrats.Methods:Atotalof60healthy,male,SDratswererandomlyassignedtosixgroups(n=10each):shams

7、urgerygroup,I/RgroupandIPgroupwithdifferenttimeintervals(15s,30s,4sand1min).Focalcerebralischemicreperfusionmodelwereformedviamiddlecerebralarteryocclusion(MACO).IPgroupwereestablishedbytherecyclesofreperfusion/ischemiaatdifferenttimeintervals(10s,15s,30s,45sand60srespectively)aftermiddlecerebralart

8、eryocclusion(MCAO)for2hours.Themodelswereevaluatedwithexaminatingneurologicdeficitscores,infarctvolumeandnervecellapoptosisat24hafterreperfusion.Results:Theischemicreperfusionmodelsintheratsweresuccessfullyestablishedbyintraluminalsuturemethod.ComparedwiththeI/Rgroup,theneurologicdeficitscoressignificantlydecreasedinIP-15s,IP-30sandIP-45s