考点一微生物的分离与培养

1、1培养基专题二微生物的培养与应用知识默写测定：对产生的进行定量的测定概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。(2) 营养组成：一般都含有。此外，还需要满足微生物生长对、以及特殊营养物质的要求。例如：培养乳酸菌时需在培养基中添加培养霉菌时需将培养基的PH调至，培养细菌时需将培养基调至(3) 种类：按照物理性质可分为培，养基禾廿培养基。2. 无菌技术(1) 含义：指在培养微生物的操作中，所有防止的方法。(2) 不同对象的无菌操作方法(连线)方法 灼烧灭菌 TSft灭菌 巴氏消毒 紫外线 化学药物类型n消毒h一火菌对象I接种针(环)IL培养IIRn操作者的衣着和手高压蒸汽灿M水沥他3

2、. 大肠杆菌的纯化培养(1) 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基匚匸t(2) 纯化大肠杆菌的方法 纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。 纯化大肠杆菌的关键步骤是 常用的微生物接种方法有两种a. :是通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(注意：在操作的第一步以及每次划线之前要接种环；在做第二次及其后的划线操作时，要从上一次划线的开始划线)b. :是将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。(注意：涂布平板的所有操作都应在进行)(3) 菌种的保存方法 对于频繁使用的菌种，

3、可以采用的方法。 对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。4、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1) 分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到作用。(2)将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称作(3) 统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用法(统计的菌落数一般比活菌的实际数)；也是测定微生物数量的常用方法；为保证结果准确，一般选择菌落数在的平板计数(4) 实验流程：土壤取样tt微生物的培养与观察t细菌的。(5) 鉴定：分解尿素的细菌：在以为唯一氮源的培养基中加入,如果PH升高，指示剂将5、分解纤维素的微生物

4、的分离(1) 纤维素酶作用的原理(2) 纤维素分解菌的筛选 原理纤维素分解菌刚果红纤维素纤维素酶>红色消失，出现 筛选方法：法，即通过来筛选纤维素分解菌。 培养基：以为唯一碳源的选择培养基。 实验流程土壤取样t选择培养tT涂布平板T挑选菌落 鉴别：纤维素酶发酵方法有和1培养基专题二微生物的培养与应用知识默写概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2) 营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对氧气以及特殊营养物质的要求。例如：培养乳酸菌时需在培养基中添加维生素；培养霉菌时需将培养基的PH调至培养细菌时需将培养基调至中性或微碱

5、性pH、酸性,种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。2. 无菌技术(1) 含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。关键：防止外来杂菌的入侵。(3) 不同对象的无菌操作方法(连线)方法或烏压蒸汽灭蔺类型干热灭曲II培养祖巴氏:消毒b.灭菌化学商物m.操作苦的衣杆和手I糕神针(丽IV,水區(地3. 大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 操作步骤计算t|称量t|溶化T灭菌t|倒平板 倒平板的方法及注意事项甲乙丙丁a. 请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙t乙t甲t丁。b. 甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。c. 丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。(2

6、) 纯化大肠杆菌的方法即可获纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落,得较纯的菌种。 纯化大肠杆菌的关键步骤是接种。 常用的微生物接种方法有两种a平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。（注意：在操作的第一步以及每次划线之前要灼烧接种环；在做第二次及其后的划线操作时，要从上一次划线的末端开始划线）b稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。（注意：涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行）系列稀释操作（如下图所示）：稀释液棉释液川涂布器将繭液

7、均匀地涂布在养基我而涂布时町转动培养JDL便菌取少俪液（不粗过ZmLA滴加到培养基表面将诂有少址酒常的涂心器在火焰上引燃诗酒制燃尽后，冷却卜10s涂布平板操作（如下图所示）:将涂和器肚在盛饰柿的烧杯中（3）菌种的保存方法对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。考点二微生物的筛选和计数II知识梳理夯实基础突破藍点1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（1）分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。（2）将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称作选择培养基（3）统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。（统计的菌落数一般比活菌的实际数低）；显微镜计数也是测定微生物数量的常用方法为保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板计数(4) 实验流程：土壤取样t样品的稀释t微生物的培养与观察t细菌的计数。_(5) 鉴定：分解尿素的细菌：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂如果PH升高，指示剂将变红2分解纤维素的微生物的分离纤维素酶作用的原理(2)纤维素分解菌的筛选葡萄糖苷酶。葡萄糖原理纤维素分解菌刚果红纤维素T红色复合物素T红色消失，出现透