食品中细菌总数的检验ppt课件

1、什么是菌落总数？菌落总数是指在被检样品的单位质量(g)、容积(ml)或外表积(cm2)内，在一定条件下培育后所生成的细菌集落的总数。 从食品卫生观念来看，食品中菌落总数越多，阐明食质量量越差，病原菌污染的能够性愈大。每种细菌都有它一定的生理特性，培育时只需分别满足不同的培育条件如培育温度、培育时间、PH、需氧性质等,才干将各种细菌培育出来。但在实践任务中，细菌菌落总数的测定普通都只用平板活菌计数法，因此并不能测出每克或每毫升中的实践总活菌数，因此所得结果，只反映一群在普通营养琼脂中发育的、嗜温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。菌落总数并不能区分细菌的种类，有时被称为杂菌数或需氧菌数等。 平板

2、活菌计数法嗜根据微生物在固体培育基上所能构成的菌落的生理及培育特征进展的。 一个菌落即代表一个单细胞，但食品检样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的方式存在，因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字应以单位质量、容积或外表积内的菌落数或菌落构成单位数报告之。细菌总数检测的意义细菌总数检测的意义l1、代表食品清洁形状的标志 l1食品中的细菌来自其消费、运输、储存、销售各环节中的外界污染；l 2在食品卫生规范中制定各种食品细菌总数的允许限量，可保证食品消费的清洁形状。l 2、预测食品耐贮藏的期限 l例：单位体积的鱼体菌落数目越少，在同样的贮藏温度下，其保质期就越长。 一、菌落总数检测常

3、用器材营养琼脂、8.5%无菌生理盐水、75%乙醇和冰箱、恒温培育箱、恒温水浴锅、托盘天平、可调式电炉、吸管、广口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿皿底直径为9cm、试管、试管架、酒精灯、均质器或乳钵、剪刀、灭菌镊子、75%酒精棉球、玻璃蜡笔、登记薄、不锈钢勺等器具用品 。 二、检验程序做成几个适当倍数的稀释度每皿内参与适量营养琼脂选择23个适宜稀释度，各取1ml参与灭菌平皿内培 育 3 6 + / - 1 。C,(48+2)h菌落计数报告检样 三、操作方法 1、检样稀释及培育1以无菌操作检样25ml(g)，放于225ml灭菌生理盐水或其他溶液的灭菌玻璃瓶内瓶内预置适量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或

4、研磨制成1:10的均匀稀释液。2用1ml灭菌吸管汲取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内，振摇试管，混合均匀，制成1：100的稀释液。3另取1ml灭菌吸管，按以上步骤操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次。4根据规范要求或对污染情况的估计，选择23个是以稀释度，分别在做10倍递增稀释液的同时，即以汲取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度在做两个平皿。5稀释液移入平皿后，应及时将凉至45。C左右的营养琼脂培育基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培育基倾入加有1ml稀释液的灭菌平皿内作空白对照。 6待琼脂凝固后，翻版平

5、板，置36+/-1。C恒温箱内培育48+/-2h,取出，计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数即得1mlg)样品所含菌落总数。 2、菌落计数方法 做平皿菌落计数时，可用肉眼察看，必要运用放大镜检查，以防脱漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平皿平均菌落数。到达规定培育时间，应立刻计数。如不能，应将平板放置于04。C，但不要超越24h。 3、菌落计数报告 1平板菌落数的选择 选取菌落数在30300之间的平皿作为菌落总数测定规范。每一个稀释度应采用2个平皿平均数。2稀释度的选择及菌落报告方式(3)菌落数的报告 为了正确地反映食品中各种需氧菌和兼性厌氧菌存在的情况，检验时须遵照以下要求和规定。1

6、、检验中所需玻璃仪器必需是完全灭菌的，并在灭菌前彻底清洗干净，不得有残留物2、检验的稀释液可用灭菌盐水或蒸馏水。3、留意每递增稀释一次，必需另换1支1ml灭菌吸管，这样所得检样的稀释倍数才准确。4、为防止细菌增值产生片状菌落，在检液参与平皿后，应在20min内倾入琼脂，并立刻便之与琼脂混合均匀。5、为了控制和了解污染，在取样进展检验的同时，于操作台上翻开一块琼脂平板，其暴露的时间应与该检样从制备、稀释到参与平皿时所暴露的时间相当，然后与加有检样的平皿一同培育，以了解检样在检验操作过程中有无遭到来自空气的污染。6、培育温度为37。C，培育时间为48+/-2h。7、参与平皿内的检样稀释液，有时带有

7、检样颗粒，在这种情况下，为了防止与细菌菌落发生混淆，可做一检样稀释液与琼脂混合的平皿，不经培育，与4。C环境中放置，以便在计数检样菌落时用作对照。8、检样如为微生物类制剂如酸乳、乳酒，那么平板计数中应相应地将有关微生物排除，不可并入检样的菌落总数中做报告。9、平板活菌计数法只能检出生长的活菌，不能检出样品中全部的细菌数。10、矿泉水和自来水等的检测，普通不稀释，直接取样进展琼脂平板培育。四、细菌菌落总数测定的其他方法n1、平板外表涂布法n将营养琼脂制成平板，经50。C，12h或35。C，1820h枯燥后，于其上滴加检样稀释液0.2ml，用L行棒涂布整个平板外表，放置约10min，将平板翻转，移至36+/-1。C温箱内培育24+/-2h取出按前述方法进展菌落计数，然后乘以5换算为1ml检样的菌落数，再乘以样品的稀释倍数，即得每克或每毫升检样所含菌落数。n2、平板外表点滴法n 与涂布法类似。所不同者，是用标定好的微量吸管或注射器针头按滴将检样稀释液滴加与琼脂平板固定的区域预先标4个区域，每区域滴一滴，每个稀释度滴2个区域，作为平行实