生物化学核酸和蛋白质的生物合成ppt课件

1、核酸和蛋白质的生物合成复旦大学药学院 丁廷波乙酰乙酰CoA丙酮酸丙酮酸3-磷酸甘油醛磷酸甘油醛（e.g 葡萄糖）葡萄糖）脂肪酸脂肪酸单糖单糖甘油甘油核苷酸核苷酸氨基酸氨基酸糖类糖类脂肪脂肪蛋白质蛋白质核酸核酸NADH+H+,FADH2电子传递链电子传递链氧化磷酸化氧化磷酸化NAD+,FADCO2H2OO2ADPATP分解合成分解合成糖类，脂类糖类，脂类糖类糖类氨基酸氨基酸？遗传信息传递的规律中心法则DNARNA蛋白质复制转录翻译病毒RNA逆转录复制DNA的生物合成 半保留复制Meselson, M. and Stahl, F. W. (1958). The replication of DNA

2、 in E. coli. Proc. Nat. Acad. Sci. 1958, 44:671-682.半保留复制的概念半保留复制的概念DNADNA的复制是将两条亲本链分开，每一条作为合成的复制是将两条亲本链分开，每一条作为合成新链的模板，按碱基配对的规则合成新链，形新链的模板，按碱基配对的规则合成新链，形成两个子代成两个子代DNADNA双螺旋结构。双螺旋结构。子代子代DNADNA的双链中一条是原来的链，另一条是新合的双链中一条是原来的链，另一条是新合成的链，称为半保留复制成的链，称为半保留复制Semi-conservative Semi-conservative replicationrep

3、lication）。）。circular bacterial repliconOriginTerminusrepliconMultiple eukaryotic repliconsrepliconrepliconrepliconrepliconReplication forkreplicon DNA replicationDNA复制过程(以原核细胞为例)1复制起始点复制起始点 1.复制的起始2DnaA蛋白的结合20-40个个Dna A 单体形成大单体形成大的聚集体的聚集体Dna A单体结单体结合在合在9 bp 的的重复序列上重复序列上3Dna B解链酶，helicase的作用在在13bp重复重

4、复序列上序列上DNA解链解链Dna B和和Dna C参与复合物，参与复合物，形成复制叉形成复制叉4单链结合蛋白SSB的作用SSB结合结合于解开于解开的单链的单链上，使上，使单链保单链保持稳定持稳定5Dna G引物酶,primase的作用引物酶合成引物，引物的化学本质为RNA。6拓扑异构酶(topoisomerase)的作用 拓扑异构酶有两种。可以切断超螺旋的一条链或者两条链，使超螺旋放松。 常用的是拓扑异构酶,又称为旋转酶gyrase）2.复制的延伸RNA引物引物冈崎片断引导链随从链DNA聚合酶DNA polymerase)DNA聚合酶聚合酶III接在接在RNA引物后开始合成引物后开始合成新新

5、DNA链；链；DNA聚合酶聚合酶III以二聚以二聚体形式存在，分别负体形式存在，分别负责先导链和后滞链上责先导链和后滞链上DNA新链的合成；新链的合成；合成过程中，拓扑异合成过程中，拓扑异构酶和解旋酶构酶和解旋酶(Dna B)负责解开双链，引物负责解开双链，引物酶负责合成岗崎片段酶负责合成岗崎片段上的引物；上的引物；原核生物的DNA聚合酶有三种分别为DNA聚合酶，岗崎片段的合成与连接岗崎片段的合成与连接 DNA pol I DNA pol I 切除切除RNARNA引物引物DNA pol I DNA pol I 填补引物切除后留下的空隙填补引物切除后留下的空隙DNA ligase DNA lig

6、ase 完成片段连接完成片段连接DNA聚合酶聚合酶III合成岗崎片段合成岗崎片段RNA引物引物3.复制的终止 E.coli DNA上存在复制终点，上存在复制终点，Tus(terminus utilization substance)蛋白可以和复制终点结蛋白可以和复制终点结合，阻止复制叉的前进，使复制停止；合，阻止复制叉的前进，使复制停止； 新形成的两个子代新形成的两个子代DNA分子由拓扑异构酶分子由拓扑异构酶I或或II帮助完成分离，形成两个独立的子代帮助完成分离，形成两个独立的子代DNA分子。分子。真核生物DNA复制的特点 1.DNA的合成发生在细胞周期的S期。 2.DNA聚合酶有，五种。 3

7、.DNA聚合酶和形成复制聚合体， 聚合酶合成主导链，聚合酶合成随从链。 4.聚合酶负责线粒体DNA的合成，而 和参与DNA修复。 5.线性DNA的端粒由端粒酶负责复制。 6.多个复制起始点，双向复制。真核细胞的周期 Gap 1 Synthesis Gap 2 MitosisDNA的修复光复活修复直接修复方式之一）紫外线下胸腺嘧啶形成二聚体;光复活酶在蓝光照射下活化，解开 二聚体胸腺嘧啶切除修复无碱基部位的修复甲基化指导的不配对修复RNA的生物合成 转录及转录后加工转录的过程起始阶段转录起始阶段RNA聚合酶的作用转录的过程延伸阶段无亚基转录的过程终止阶段转录模板的特点：1DNA的一条链为模板2不

8、对称转录相关概念：1模板链2编码链3启动子4转录终止结构转录的模板RNA transcriptionDNA模板链反义链，模板链反义链，-链）链）DNA编码链有义编码链有义链，链，+链）链）上游下游原核生物启动子Pribnow box（-10区）区） RNA聚合酶结合位点聚合酶结合位点 T89A89T50A65A65T100Sextama box (-35区）区） RNA聚合酶识别位点聚合酶识别位点T85T83C81A61C69A52真核生物的启动子原核生物的终止子结构真核生物的转录终止机理不清楚原核生物的RNA聚合酶全酶holoenzyme): 2核心酶(core enzyme): 2不同的R

9、NA聚合酶，核心酶是相同的，但亚基不同。亚基决定了被转录基因的特异性。真核生物的RNA聚合酶类型类型部位部位转录产物转录产物对鹅膏蕈碱对鹅膏蕈碱的敏感度的敏感度I核仁核仁18s,5.8s,28srRNA耐受耐受II核质核质hnRNA极敏感极敏感III核质核质tRNA，snRNA,5srRNA中度敏感中度敏感因子 因子是原核生物中与转录终止有关的蛋白质，具有两种酶活性：解旋酶、ATP酶。原核生物转录后加工 原核生物的转录和翻译是偶联的，mRNA很少被加工。 原核生物的tRNA和rRNA需要加工。 1. 5-端戴帽 2. 3-端加尾 3.切除内含子，拼接外显子剪接 4.部分序列的甲基化。真核生物转

10、录后加工5-端戴帽3-端加尾RNA剪接示意图剪接示意图剪接的关键反应是转酯化反应。核酶：具有催化功能的核酸某些RNA的剪接是由自我催化完成的部分序列的甲基化有的甲基化在核糖上，有的甲基化在碱基上。RNA的另一种合成方式复制 RNA指导的RNA聚合酶 正链RNA 负链RNA基因转录的调节原核细胞转录水平的调节操纵子学说操纵子的结构Regulator gene乳糖操纵子的工作原理真核细胞基因转录的调节相关概念：1.顺式作用元件顺式调控元件）(Cis-acting element)2.反式作用因子(Trans-acting factor)顺式作用元件顺式调控元件）(Cis-acting elemen

11、t) 与被调控基因存在于同一个DNA上，能够调节该基因转录的特定序列， 称为顺式作用元件。包括启动子和增强子。反式作用因子(trans-acting factor) 能直接或间接辨认、结合顺式作用元件的蛋白质，在真核生物有很多种类，统称为反式作用因子。 因子和因子之间又需要互相 识别、结合，以准确的控制基因是否转录、何时转录。反式作用因子家族之 亮氨酸拉链反式作用因子家族之 锌指结构DNA的合成方式之 逆转录逆转录的过程1.RNA指导的DNA合成逆转录酶2.RNA的水解RNase H3.DNA指导的DNA合成DNA聚合酶蛋白质的生物合成之 翻译mRNA作为翻译的模版密码子：在mRNA的特定区域

12、(翻译编码区），每三个相邻的碱基组成一个密码子。 遗传密码的特点：1.连续性和不重叠性。2.密码的简并性。3.终止密码和起始密码。4.密码的通用性。同一段mRNA，不同的阅读框架tRNA转运翻译的原料氨基酸tRNA和氨基酸的连接酯键密码子与反密码子的摆动配对rRNA参与构建翻译的工厂核糖体翻译过程之氨基酸的活化 AA + tRNA 氨基酰氨基酰-tRNA 细胞中一般只有二十种氨基酰细胞中一般只有二十种氨基酰-tRNA合成酶，不同合成酶，不同tRNA与同一氨基酸的结合均由同一个酶催化。合成酶与同一氨基酸的结合均由同一个酶催化。合成酶有很强的校对功能。有很强的校对功能。黄色碱基为识黄色碱基为识别必须位点别必须位点起始氨基酰-tRNAl原核生物的起始氨基酰-tRNA为l fmet-tRNAfmetl真核生物的起始氨基酰-tRNA为l met-tRNAmet多肽链合成的过程核蛋白体循环1.肽链合成的起始核糖体小亚基先与mRNA结合。起始氨基酰-tRNA再与mRNA配对。核糖体大亚基与小亚基结合，起始氨基酰-tRNA位于大亚基的 P位2.肽链合成的延伸阶段 翻译过程中肽链的延伸是以下三种化学过程的循环。 1进位 2转肽 3移位核蛋白体循环之进位核蛋白体循环之转肽核蛋白体循环之移位3.肽链合成的终止 当A位上出现终止密码时，释放因子(releasing