VITEK2Compact全自动细菌鉴定仪的操作规程

1、VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪的标准操作规程1 .目的规范VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪的操作规程，保证检验质量.2 .授权操作人经培训并通过考核合格的微生物实验室工作人员。3 .原理为光电技术，电脑技术和细菌八进位制数码鉴定技术相结合的鉴定方法。每个鉴定卡内含有64项生化反应, 每三项为一组,组内各项反应阳性时分别赋值为1,2,4,然后计算每组数值。根据64项生化反应结果即可获 得生物数码。在电脑控制下，读数器每隔15分钟对每一试卡读数一次，对各反应孔底物进行光扫描,动态观 察反应变化，一旦试卡内终点指示孔达到临界值，表示此卡检测完成，系统将最后一次判读结果所

2、得的生物 数码与菌种资料库标准菌生物模型相比较,经矩阵分析得到鉴定值和鉴定结果。4 .工作环境相对湿度：20%80%；温度1530；电源电压：200240V, 50/60Hz。5 .操作程序5.1 开机5.1.1 依次打开UPS,交流电源，仪器将自动进行初始化。仪器孵育转盘温度上升至测试卡所需的温度。（5 15分钟）5.1.2 启动完成之后，屏幕下方的状态区显示OK,代表仪器可以处理测试卡了。5.1.3 依次打开显示器，打印机，电脑电源，进入VITEK 2 Compact软件应用界面。5.2 卡片的选择5.2.1 鉴定卡GN：革兰阴性菌鉴定卡；GP：革兰阳性菌鉴定卡；YST：酵母菌鉴定卡；NH

3、:苛养菌鉴定卡；ANC：厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡5.2.2 药敏卡AST-GNxx:革兰阴性菌药敏卡；AST-GPxx:革兰阳性菌药敏卡。5.3 菌悬液配置及药敏卡稀释5.3.1 悬浮液 0.45%NaCl 溶液,PH4.57.2。5.3.2 菌悬液浓度：见表1表1 VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪各种鉴定卡所需细菌悬液浓度GNGPYSTAST-GNxxAST-GPxxNH0.50.63McF 0.50.63McF1.82.2 McF3.0ml 盐水+145位3.0ml 盐水+280惧2.83.2McF0.50.63McF菌悬液0.50.63McF菌悬液5.4 操作流程5.4.1

4、根据细菌种类选卡。将卡片和盐水从冰箱取出，室温放置1520分钟。5.4.2 在载卡架上放置试管,每管中加入0.45%NaCl溶液3ml。5.4.3 校正比浊仪。标准比浊管校正可接受浊度范围，见下表:标准可接受花圈0.5 McF0.440.562.0 McF1.852.153.0 McF2.793.21i5.4.4 挑取培养1824小时纯菌落，配置菌悬液，浓度要求参照表1。用比浊仪测定菌悬液浓度，如同时 作药敏,应稀释并混匀。物品准备：0.45%NaCl溶液；载卡架上放置无菌试管；一次性无菌拭子；配套标准定量移液枪。取145ul菌液稀释，将AST-GN卡插入稀释菌液取280ul菌液稀释，将AST

5、-GN卡插入稀释菌液5.4.5 按顺序将卡片放置于载卡架上，输样管插入菌液中。药敏卡放置在配对鉴定卡后面。5.4.6 将载卡架放入填充仓，按填充即Start Fill。蓝色指示灯闪亮提示填充完毕。将载卡架取出并放 入装载仓。仪器自动扫描，审核卡片信息，确认无误后自动封口和上卡。仪器口的蓝色箭头闪亮提示操作完 成。5.4.7 进入软件主界面，输入标本信息，对标本进行编号，保存。5.4.8 仪器每隔15分钟自动阅读所有测试卡,最终将确认无误的结果传至中文电脑。5.4.9 仪器已完成的卡片自动卸载入废卡槽。5.5 结果处理5.5.1 鉴定结果 为1种细菌时,可信度高的结果仪器将自动传输至病人资料数据

6、库,并长期储存。三2种 细菌时,应按仪器注释做补充实验,确定正确鉴定结果,并将结果传输到数据库中。不能鉴定的细菌，应查找 分离平板,确认细菌纯度,必要时重新分纯,重新鉴定。5.5.2 药敏结果同时进行鉴定和药敏结果时,鉴定结果会自动加到药敏卡上,否则需手工添加。如出现专家评语,应对药敏结果作适当修改并确认最终结果。如出现浏览信息应按程序处理并确认最终结果。上述处理完毕,结果会自动传输到LIS数据库中。5.6 关机5.6.1 一般状态下不关机，机器24小时工作。遇到下列情况需关闭或者重启开关：电源断开、移位等特殊 情况。5.6.2 先关闭VITEK 2 Compact仪器：在仪器用户界面按回车键

7、，屏幕出现主菜单，进入关机功能指令:Main MenuMaintenanceShutdownYes 关机。5.6.3 依次关闭交流电源,英文工作电脑及其他附属设备并拔掉电源插座。6 .质量控制6.1 质控频率及方法6.1.1 鉴定卡的质控 每月和更新批号时用相应标准菌株做一次质控。每一新生产批号鉴定卡需用相应质控菌株做质控以检测生化反应的可靠性，材料和试验批号必须记录并 保存。6.1.2 药敏卡的质控每周和更新批号时用相应标准菌株做一次质控。6.2 质控菌株见表2表2 VITEK 2 Compact各种鉴定卡质量控制使用的质控菌株反应卡种类质控菌株GN霍氏肠杆菌ATCC700323GP腐生葡萄

8、球菌ATCC-BAA750YST白色念珠菌ATCC14053NH齿蚀艾肯ATCC1152AST-GN13大肠埃希菌 ATCC25922AST-GP67金黄色葡萄球菌ATCC29213AST-GP68肺炎链球菌 ATCC49619AST-GN09铜绿假单胞菌ATCC278536.3 质控操作步骤6.3.1 按5.4.6程序上卡,扫描试卡后,在对试卡维护时选择质控卡。6.3.2 根据卡的种类，按仪器提示选择所对应的质控菌株，再保存。6.3.3 质控结束后查看结果是否在控。6.3.4 如失控，应立即按照6.4步骤进行查误。6.3.5 如误差无法解决,应联系梅里埃公司或代理商的技术代表。6.4 失控结

9、果分析和处理如失控，应按照以下步骤进行查误校正。6.4.1 明显错误可能为:错误使用质控菌株。悬浮液（0.45%盐水）污染。悬浮液PH及浓度未在要求的 范围内。没有按照标准操作程序操作。6.4.2 如无明显错误，应按以下步骤进行误校正。重新实验以确认误差结果；确认比浊仪校正在有效期内,并妥善保存；确认所有试剂均在有效期内,并妥善保存；孵育/判读箱温度正常；标准菌株未受污染,生物特性没有改变；菌悬液浓度符合要求；标准菌株接种平板正确,孵育时间正确。7 .校正7.1 例行校正至少每年一次。7.2 故障校正质控失控,监测指标失控，仪器移位，维修后需校正。7.3 校正后验收校正后，微生物实验室负责人对

10、各项指标核实,达标后方可。8 .维护和保养程序日常维护应清洁废卡槽、清洁仪器内试卡架、清洁光学读数头、清洁充填仓、清洁载卡架。8.1 清洁废卡槽打开废卡收集器舱口,取出废卡收集器将所有卡片倒入医疗废物桶,用洗必泰消毒废卡槽，再放回舱内。 8.2清洁仪器内试卡架Carousel8.1.1 试卡架分为四个部分,清洗前,应确认卡架内已没有待处理的试卡。8.1.2 进入卡架卸载程序:Main Menu- Maintence-Carousel Removal,点击 OK。仪器显示 Preparing for section Removal ,按仪器提示,依次卸载4个试卡架,消毒清洁并干燥试卡架（每月用棉

11、签蘸取75%酒精，擦 拭仪器内的传感器）。8.1.3 进入卡架装载程序Main Menu-MaintenceReplace Carousel,按照仪器提示装载4个试卡架,盖好 试卡架进入盖。8.3 清洁光学读数头8.3.1 进入读数头清洁程序：Main Menu- Maintence-Optics Cleaning8.3.2 打开孵育器盖子,拔出读数头,用擦镜纸清洁。用棉签蘸取75%酒精擦拭传送皮带,将读数头装好,关上 孵育器的门,仪器自动检测读数头的吸光度值,自检通过后,仪器进入准备状态。8.4 清洁充填仓打开舱门，用棉签蘸取蒸馏水清洁舱门。8.5 清洁载卡架用75%酒精洗擦试架表面。再用干净软棉布擦拭，待其干燥再使用。9 .影响仪器检测准确性的因素9.1 菌悬液浊度配制不当。9.2 配制菌悬液的生理盐水污染。9.3 未挑取纯菌落作鉴定和药敏。9.4 仪器工作不正常。10 .应急处理10.1 出现不能自行解决故障,应及时联系经销商或工程师维修处理,并告知微生物实验