电导法测定果蔬细胞膜渗透率1

1、实验五实验五电导法测定果蔬细胞膜渗透率电导法测定果蔬细胞膜渗透率o 一、实验目的一、实验目的 果蔬在冷藏及冷藏运输中，经常发生冷害或果蔬在冷藏及冷藏运输中，经常发生冷害或冻害而影响产品质量。如何及时正确地鉴别冷冻害而影响产品质量。如何及时正确地鉴别冷害及冻害的发生，是果蔬贮运中需要解决的问害及冻害的发生，是果蔬贮运中需要解决的问题。题。 植物体遭受冷害时，细胞膜的透性发生变化，植物体遭受冷害时，细胞膜的透性发生变化，细胞中电解质（主要是钾离子）向外渗透速度加细胞中电解质（主要是钾离子）向外渗透速度加快，细胞膜渗透速度称为渗透率。它可以通过测快，细胞膜渗透速度称为渗透率。它可以通过测定果蔬组织提

2、取液电导率的方法来确定。定果蔬组织提取液电导率的方法来确定。二、实验原理二、实验原理o 果蔬组织提取液的电导率可用下式表示：果蔬组织提取液的电导率可用下式表示： LKC （1）C电导度，表示提取液的导电能力，可用电导仪电导度，表示提取液的导电能力，可用电导仪直接测得。另外，电导度（直接测得。另外，电导度（C）是电阻）是电阻R的倒数，的倒数，即：即：C1/R K电极常数，它是测定电导时两极片间的距离电极常数，它是测定电导时两极片间的距离（单位为）与极片的截面（单位为）与极片的截面A（单位为（单位为2）之比，）之比，其单位为其单位为()-1，因此，电导率，因此，电导率L的单位则为的单位则为-1-1

3、，m-1-1和和-1-1，测定植物细胞膜的电导率多，测定植物细胞膜的电导率多以以-1-1为单位。（欧姆）为单位。（欧姆）o 电极常数（电极常数（K），因电极而异。每个电极的电极常），因电极而异。每个电极的电极常数均应个别测定，测定电极常数（数均应个别测定，测定电极常数（K）值的方法是）值的方法是利用已知电导率利用已知电导率L的标准的标准KCl溶液。用需测定的电溶液。用需测定的电极测定此标准溶液的电导度（极测定此标准溶液的电导度（C），从），从式中可求式中可求出它的出它的K值。值。 o 果蔬细胞膜渗透率（果蔬细胞膜渗透率（Le），是测试材料活组织），是测试材料活组织提取液的电导率（提取液的电导率

4、（L1）与测试材料被杀死后提）与测试材料被杀死后提取液的电导率（取液的电导率（L0）之百分比。）之百分比。o Le（%）L1/L0100%（2） o Le实际表示在一定时间内，细胞电解质渗出量占总实际表示在一定时间内，细胞电解质渗出量占总电解质量的百分比。电解质量的百分比。o 因为：因为：L1KC1 L0KC0o 所以：所以：o LeKC1/(KC0)100%C1/C0100% 由由式可见，不必计算电导率，而用电导仪直接测定电式可见，不必计算电导率，而用电导仪直接测定电导度（导度（C），即可计算出细胞膜的渗透率（），即可计算出细胞膜的渗透率（Le）。）。o 黄瓜、青椒（部分进行低温处理）黄瓜、

5、青椒（部分进行低温处理）o DJS1C型电导仪、抽气机、切片器、振荡器、型电导仪、抽气机、切片器、振荡器、打孔器、滤纸、大试管、烧杯、电炉。打孔器、滤纸、大试管、烧杯、电炉。三、材料及用具三、材料及用具 材料处理：选取果品一份放入室温下贮藏，为正常材料处理：选取果品一份放入室温下贮藏，为正常组；另一份放入过低温度下使其受冷害，为处理组。组；另一份放入过低温度下使其受冷害，为处理组。用打孔器及切片器将样品制成厚薄均匀，大小一致的用打孔器及切片器将样品制成厚薄均匀，大小一致的组织圆片，称取组织圆片，称取2克（或十个圆片），放入盛有克（或十个圆片），放入盛有20mL去离子水的试管中，在真空干燥器中抽

6、气浸泡去离子水的试管中，在真空干燥器中抽气浸泡10min后，后，缓慢放入空气，水即渗入细胞间隙，组织圆片变成透缓慢放入空气，水即渗入细胞间隙，组织圆片变成透明，细胞内溶质易于渗出，重复明，细胞内溶质易于渗出，重复3-5次，取出试管振荡次，取出试管振荡半小时。半小时。四、操作方法四、操作方法测定：o 用用DJS1C型电导仪插入试管，测定外渗液型电导仪插入试管，测定外渗液的电导度。测定后再将试管放入水浴锅沸水的电导度。测定后再将试管放入水浴锅沸水中中5min，加热杀死组织，待冷却室温后再测，加热杀死组织，待冷却室温后再测定提取液的电导度，按定提取液的电导度，按式即可计算出细胞式即可计算出细胞膜的渗

7、透率。膜的渗透率。 电导仪的使用电导仪的使用o 将电极引线接到仪器相应接线柱上。将电极引线接到仪器相应接线柱上。o 接通电源，打开电源开关。接通电源，打开电源开关。o 将量程开关拨向将量程开关拨向“检查检查”位置，常数旋钮位置，常数旋钮指向指向“1”1”刻度，温度钮指向刻度，温度钮指向“25”25”，调节，调节校准钮，使仪器显示校准钮，使仪器显示100uS/cm, 100uS/cm, 完成校准。完成校准。o 将开关拨向将开关拨向“测定位置测定位置”，指针应回到零，指针应回到零点。点。o 拨动选择测量范围的旋钮，使其处于测定范围之内，拨动选择测量范围的旋钮，使其处于测定范围之内，如不知测量范围，

8、应先放在最大程位置上，如不知测量范围，应先放在最大程位置上，由大到小，由大到小，逐级调整逐级调整。o 将电极用重蒸馏水冲洗干净，并用滤纸吸取附着的将电极用重蒸馏水冲洗干净，并用滤纸吸取附着的水分，放在需测组织提取液中，等指针稳定后，读指水分，放在需测组织提取液中，等指针稳定后，读指针所指的数值，此数值即是该提取液的电导度。针所指的数值，此数值即是该提取液的电导度。o 按上述方法，测定组织圆片杀死后提取液的电按上述方法，测定组织圆片杀死后提取液的电导度。导度。o 将电极用蒸馏水洗干净，放在水中，如长期不将电极用蒸馏水洗干净，放在水中，如长期不用，则应将电极冼净晾干，包装放置。用，则应将电极冼净晾干，包装放置。 五、记录与计算五、记录与计算处理处理电导度（电导度（C）渗透率（渗透率（Le）正常正常组组正常正常煮死煮死处理处理组组冻害冻害煮死煮死六六 注意事项注意事项o 整个电导测定需要在恒温条件下进行，因为温度整个电导测定需要在恒温条件下进行，因为温度不仅影响细胞内离子内外渗透速度，而且影响提不仅影响细胞内离子内外渗透速度，而