类风湿性关节炎的实验室进展

1、 前言 1858年 英国 加罗德1940年 瓦勒 类风湿因子1941年 美国 类风湿性关节炎 中、英、美 类风湿性关节炎定义病因尚未明了以关节滑膜炎为特征慢性全身性自身免疫性疾病慢性.对称性.多滑膜关节炎、关节外病变好发年龄为3060岁区别：风湿性关节炎 风湿热（A组溶血性链球菌感染后引起的一种全身性、变态反应性、炎症性疾病） 发病年龄多在515岁 关节炎急性期患者可伴发热、咽痛，心慌、血沉增快及C-反应蛋白增高等表现 病情好转后可恢复至正常，该病在我国关节炎患者中占的比例已显著下降 好发于手.腕.足等小关节,反复发作,呈对称分布 早期有关节红肿热痛和功能障碍 晚期关节僵硬畸形,并伴有骨和骨骼

2、肌的萎缩 主要累及关节滑膜,其次为浆膜、心、肺及眼等结缔组织的广泛性炎症性疾病 晨僵、发热、疲乏无力、心包炎、皮下结节、胸膜炎、动脉炎、周围神经病变等 临床表现临床表现实验室常规 (一) 轻度至中度贫血 白细胞数大多正常，在活动期可略有增高，偶见嗜酸性粒细胞和血小板增多 多数病例的红细胞沉降率在活动性病变中常增高 血清铁、铁结合蛋白的水平常减低 实验室常规 (二) 血清白蛋白降低，球蛋白增高 免疫蛋白电泳显示IgG、IgA及IgM增多 C反应蛋白活动期可升高 实验室常规 (三) 类风湿因子RF：诊断RA的重要辅助方法 目前临床多限于检测IgM-RF，目前国内应用比较广泛的是聚苯乙烯微粒乳胶凝集

3、试验（LAT）和羊红细胞凝集试验（SCAT） 类风湿因子阴性不能排除本病的可能，须结合临床。 RF为自身抗体，可见于多种自身免疫性疾病及一些与免疫有关的慢性感染；故RF阳性，不一定就是类风湿性关节炎实验室常规 (四) 抗核抗体在类风湿性关节炎的阳性率约10%20%。 血清补体C3、C4等水平多数正常或轻度升高，重症者及伴关节外病变者可下降 关节腔穿刺液：不透明草黄色渗出液，其中中性粒细胞可达1万5万/mm3或更高，细菌培养阴性。疾病活动可见白细胞浆中含有类风湿因子和IgG补体复合物形成包涵体吞噬细胞，称类风湿细胞诊断标准 1晨僵至少1小时(6周)。 23个或3个以上关节肿(6周)。 3腕、掌指

4、关节或近端指间关节肿(6周)。 4对称性关节肿(6周)。 5皮下结节。 6手X光片改变。 7类风湿因子阳性(滴度1:32)。 需具备4条或4条以上标准，确诊为类风湿性关节炎晚期类风湿病人，因多已出现多关节病变及典型畸形，所以诊断多无困难在早期，仅少数关节受累时，诊断常比较困难。尤以单关节类风湿性关节炎，仅靠病史和临床表现决不能确诊早期诊断、早期治疗是阻止RA病情 发展和减少致残率的关键。 实验室进展 （一）自身抗体的检测 类风湿因子（RF） RA相关的自身抗体 RA特异性自身抗体 免疫球蛋白结合蛋白(BiP)为靶分子的抗体 自身抗体联合检测Saraux：IgM RF(ELISA)、IgG-AK

5、A、RF(乳胶凝集试验)联合检测是诊断RA的最佳实验室检测方法，敏感性33%，特异性99% Vencovsky：抗CCP、APF、AKA、RF的个别亚型(IgM RF)等自身抗体是早期RA侵蚀性疾病诊断标志李小峰：APF、AKA、RF 3种抗体联合检测时，1种以上任何抗体出现对RA诊断敏感性69.83%，2种以上抗体同时出现特异性为98.19%，3种抗体同时出现特异性99.86%李鸿斌：APF、AKA、抗Sa抗体和抗RA33抗体4种联合检测实验室进展 （二） 血管内皮生长因子(VEGF)在RA滑膜血管翳的形成过程中起关键作用，它直接促进滑膜组织新血管形成，增强血管通透性，不同病期RA患者血清及

6、关节滑液中VEGF水平可直接反映疾病的活动程度。 淋巴细胞活性及其信息传递异常与RA发生密切相关。RA患者淋巴细胞协同刺激分子异常表达，淋巴细胞的CD25，HLA-DR表达明显增多。实验室进展 （三）免疫球蛋白糖基化的改变 血清中IgG分子分为IgG2、IgG1和IgG0三种糖形。Watson等对风湿病患者血清中IgG分子糖链结构进行分析，发现不同类型患者糖链结构不同。RA患者具有显著的去半乳糖结构，即IgG0型。实验室进展 （四）基质金属蛋白酶的检测 基质金属蛋白酶(MMPs):可导致软骨降解，其水平与RA患者受累关节数目、X线分期严重程度及ESR呈正相关，而且 MMP-3不仅可反映病情活动

7、，其在血清中浓度的增高常提示已有关节软骨破坏。实验室进展 （五） 尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体： 在RA滑膜组织中的表达水平明显高于骨关节炎OA，其中RA滑膜衬里细胞呈明显的强阳性表达；滑膜组织中uPA与其受体的表达具有良好的协同性，其可增强滑膜细胞对软骨的破坏。RA滑液和血浆中uPA及其受体的表达水平可作为反映患者病情活动的有效指标。相关问题及进展类风湿性关节炎是一类异质性疾病，疾病的不同亚型以及患者的病程、治疗情况、脏器受累范围和程度等类风湿性关节炎是一类异质性疾病，疾病的不同亚型以及患者的病程、治疗情况、脏器受累范围和程度等均可影响检测结果均可影响检测结果分子诊断学技术、功能

8、基因组学和蛋白组学研究的深入，免疫学技术水平的成熟和完善，计算机网络技术分子诊断学技术、功能基因组学和蛋白组学研究的深入，免疫学技术水平的成熟和完善，计算机网络技术的广泛应用以及实验室质量保证系统的全面实施的广泛应用以及实验室质量保证系统的全面实施RA相关的自身抗体 抗型胶原抗体抗钙蛋白酶抑素(calpastain)抗体抗葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗体抗磷脂抗体RA特异性自身抗体 抗Sa抗体抗RA33 （异质性胞核核糖核蛋白）抗体抗核周因子抗体(APF)抗角蛋白抗体(AKA)抗聚丝蛋白抗体(AFA)抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体) 抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体) 国内外均有报道抗CCP

9、抗体在早期RA时即可出现，它将成为诊断RA的标记抗体。 其敏感性为46.6%，特异性为96.6%；已建立了以人工合成CCP为抗原的ELISA检测方法，检测RA患者血清中抗CCP抗体。 异质性胞核核糖核蛋白（RA3336） RA33/36可以出现在疾病的起病阶段，所以有早期诊断价值。RA33/36抗原的制备及其抗体的检测：用Ehrlich腹水癌细胞提取的抗原检测抗RA33/36抗体。 抗核周因子（APF） APF是1964年Nienhuis在RA血清中发现的一种抗人颊黏膜细胞浆内角质蛋白颗粒的抗体，荧光显微镜下在胞浆内呈一个或多个大小不等的圆形或椭圆形颗粒，其对RA的特异性随血清稀释倍数的增加而

10、增加。抗Sa抗体 从人胎盘提取Sa抗原，用免疫印迹或ELISA法检测抗Sa抗体。抗Sa抗体对RA的敏感性为43%，特异性为98%。由于该抗体在RA的早期可以测出，且其滴度随疾病活动性消长。因此，除作为早期诊断外，还可以作为RA活动的监测指标。抗角质蛋白抗体（AKA） 以Wistar大鼠的食管中段角质层为底物，用间接免疫荧光法检测，角质层有板层状或线状荧光沉积为阳性。AKA对早期RA的诊断特异性为90%，敏感性为32%。抗聚丝蛋白抗体(AFA) 近来发现AKA 与APF的真正靶抗原是聚角蛋白微丝蛋白（filaggrin）。现可用基因技术合成抗原聚角蛋白微丝蛋白，并通过免疫印迹或酶联免疫吸附法检测

11、AFA。证明AFA对RA诊断的敏感性为36.3%，特异性为93.4%。 定义病因尚未明了以关节滑膜炎为特征慢性全身性自身免疫性疾病慢性.对称性.多滑膜关节炎、关节外病变好发年龄为3060岁 好发于手.腕.足等小关节,反复发作,呈对称分布 早期有关节红肿热痛和功能障碍 晚期关节僵硬畸形,并伴有骨和骨骼肌的萎缩 主要累及关节滑膜,其次为浆膜、心、肺及眼等结缔组织的广泛性炎症性疾病 晨僵、发热、疲乏无力、心包炎、皮下结节、胸膜炎、动脉炎、周围神经病变等 临床表现临床表现诊断标准 1晨僵至少1小时(6周)。 23个或3个以上关节肿(6周)。 3腕、掌指关节或近端指间关节肿(6周)。 4对称性关节肿(6周)。 5皮下结节。 6手X光片改变。 7类风湿因子阳性(滴度1:32)。 需具备4条或4条以上标准，确诊为类风湿性关节炎晚期类风湿病人，因多已出现多关节病变及典型畸形，所以诊断多无困难在早期，仅少数关节受累时，诊断常