生物化学资料

1、一蛋白质一、填空： 1、大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为 _16、_% ，如测得 1 克样品含氮量为 10mg, 则蛋白质含量为 _62。5mg_ 。2、根据蛋白质分子的形状，可将其分为（球）状蛋白质和（ 纤维）状蛋白质。3、人体蛋白质的基本组成单位为 -_L-氨基酸_ ，共有 _20_ 种。4、氨基酸的结构通式为_ R IH2N - C - COOH I H_。 5、氨基酸的等电点用（PI ）表示，其含义是（净电荷为0时的环境pH值 ）。6、氨基酸在等电点时，主要以_两性_离子形式存在，在pHpI的溶液中，大部分以_负离子_离子形式存在，在pHpI的溶液中，大部分以_正离子_离子形式存在

2、。7、蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的 _氨_ 基和另一氨基酸的 _羧_ 基连接而形成的。8、在 20 种氨基酸中，酸性氨基酸有 _Glu_ 和 _Asp_2 种，具有羟基的氨基酸是 _酪氨酸_ 和 _丝氨酸_ ，能形成二硫键的氨基酸是 半胱氨酸_. 9、组成蛋白质的 20 种氨基酸中，含有咪唑环的氨基酸是 _组氨酸_ ，含硫的氨基酸有 _半胱氨酸_ 和 甲硫氨酸_ 。 10、蛋白质中的 _苯丙氨酸_ 、 _酪氨酸_ 和 _色氨酸_3 种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在 280nm 处有最大吸收值。11、在 _280_nm 波长附近有特征性吸收峰的氨基酸有 _色氨酸_ 和 酪氨酸_

3、 。 12、20种氨基酸中，（ 半胱氨酸 ）在稳定许多蛋白质结构中起重要作用，因为它可以参与形成链内和链间共价键。13、溴化氰可使Gly-Ary-Met-Ala-Pro裂解为（Gly-Ary-Met ）和（Ala-Pro ）两肽段。14、测定肽段常用的方法是（ CNBr ）化学降解法，采用的试剂是（ 溴化氰 ）。15、 常用的肽链N端分析的方法有二硝基氟苯法、苯异硫腈法、二甲基氨基萘磺酰氯法和氨肽酶法。C端分析的方法有肼解法和羧肽酶法等。16、维持蛋白质的一级结构的化学键有 二硫键_ 和肽键 _ ；维持二级结构靠 _氢_ 键；维持三级结构和四级结构靠 次级键_ 键，其中包括 _氢键_ 、 _离

4、子键_ 、 范德华力_ 和 _疏水作用力_. 17、蛋白质的二级 结构最基本的有两种类型，它们是 _-螺旋_ 和-折叠_ 。 18、 -螺旋结构是由同一肽链的 _每个氨基酸残基的氨基_ 和 _其前面第四个氨基酸残基的羧基_ 间的 _氢_ 键维持的，螺距为 _0.54nm_, 每圈螺旋含 _3.6_ 个氨基酸残基，每个氨基酸残基沿轴上升高度为 _0.15nm_ 。天然蛋白质分子中的 -螺旋大都属于 _右_ 手螺旋。19、在蛋白质的 -螺旋结构中，在环状氨基酸 _脯氨酸_ 存在处局部螺旋结构中断。20、 _Pro_不是-氨基酸，它经常改变肽链折叠的方式。 21、一般来说，球状蛋白质的_非极_性氨基

5、酸侧链位于分子内部，_极_性氨基酸侧链位于分子表面。22、多肽链中氨基酸的 _顺序_ ，称为一级结构，主要化学键为 _肽键_. 23、体内有生物活性的蛋白质至少具备 _三级_ 结构，有的还有 _四级_ 结构。24、维持蛋白质构象的化学键有_氢键_、_离子键_、_二硫键_、_疏水作用力_和_范德华力_。25、蛋白质为两性电解质，大多数在酸性溶液中带 _正_ 电荷，在碱性溶液中带 _负_ 电荷。当蛋白质的净电荷为 _0_ 时，此时溶液的 pH 值称为 _等电点_ 。 26、任何破坏（ 水化层 ）和（带点层 ）的因素都能使蛋白质分子聚集而沉淀。27、在不含任何盐的纯水中进行蛋白质等电点的测定，可得（

6、等电子点 ）。28、（渗析 ）和（超滤 ）是利用蛋白质大分子不能通过半透膜的特点，将蛋白质大分子和其它小分子分离开来。29、蛋白质颗粒表面有许多 _亲水基因_ ，可吸引水分子，使颗粒表面形成一层 _水化膜_ ， 可防止蛋白质从溶液中 _聚集并沉淀_ 。30、蛋白质可与某些试剂作用产生颜色反应，可用作蛋白质的 _ 和 _ 分 析。常用的颜色反应有 _茚三酮反应_ 和 酚试剂反应_ 。31、蛋白质变性主要是其 次级键_ 结构遭到破坏，而其 _一级_ 结构仍可完好无损。32、蛋白质可通过（酸水解 ）、（碱水解 ）或（酶水解 ），将其水解成氨基酸。33、蛋白质（ 酸 ）水解，得到的氨基酸都是L-型。3

7、4、阳离子交换树脂含有（ 酸性 ）基团，阴离子交换树脂含有（ 碱性 ）基团。35、氨基酸自动分析仪通过（完成全部离子交换色谱 ）过程分离氨基酸混合物。36、用阳离子交换树脂分离氨基酸时，氨基酸的洗脱顺序一般按（酸性 ）、（中性 ）、（碱性 ）的顺序先后被洗脱，在电荷相同时，（ 极性 ）大的氨基酸先被洗脱出来。 DEAE-纤维素是一种_阴离子_交换剂，CM-纤维素是一种_阳离子_交换剂。37、用凝胶过滤分离蛋白质，分子量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较 _长_ ，因此最先流出凝胶柱的蛋白质，其分子量最 _大_ 。 38、用电泳方法分离蛋白质的原理，是在一定的 pH 条件下，不同蛋白质的 _所带电荷

8、性质_ 、 _数目_和 _相对分子质量_ 不同，因而在电场中移动的 _方向_ 和 _速率_ 不同，从而使蛋白质得到分离。39、测定蛋白质含量的方法主要有_凯氏定氮法_、_双缩脲法_、_紫外吸收法_和_福林酚试剂法_。二、判断1、氨基酸在水溶液中或结晶态时主要以兼性离子形式存在。（对）2、所有氨基酸都具有旋光性。 （错，除了甘氨酸。）3、构成蛋白质的 20 种氨基酸都是必需氨基酸。（错，八种） 4、天然氨基酸都具有一个不对称-碳原子。（错，除了甘氨酸） 5、到目前为止，自然界发现的氨基酸为20种左右。错6、由于各种天然氨基酸都有280nm的光吸收特性，据此可以作为紫外吸收法检测蛋白质的依据。（错

9、，只有芳香族，Tyr,Tyr,Phe）7、溶液的pH值可以影响氨基酸的pI值。（错）8、CNBr能裂解Gly-Met-Pro三肽。（对）9、蛋白质的空间结构就是它的三级结构。（错，三维结构） 10、在多肽分子中只存在一种共价键即肽键。（错，二硫键） 11、蛋白质的亚基(或称亚单位)和肽链是同义的。（错，亚基一般由一条肽链组成） 12、所有的蛋白质都具有一、二、三、四级结构。（错）15、蛋白质是生物大分子，但并不都具有四级结构。（对） 16、肽键是双键，所以不能自由旋转。（错，-CO-NH-带有部分双键的性质，不能沿C-N键自由旋转）18、在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点

10、。（对）19、蛋白质的等电点可以改变，但等离子点不能改变。（对）20、盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离制备。（对）21、所有的肽和蛋白质都能和硫酸铜的碱性溶液发生双缩脲反应（错，含两个或两个以上的肽键）22、双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。（错，只有一个肽键）23、可利用蛋白质酸水解研究其色氨酸含量。（错）24、可利用胰蛋白酶将蛋白质水解成氨基酸。（错）25、用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。（错）26、氨基酸在电场中的迁移率与氨基酸所带电荷及相对分子质量成正比。（错）27、SDS-PAGE中，蛋白质的的移动速度主要取决于

11、蛋白质的相对分子质量，与其本身电荷无关。（对）28、蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏，因此涉及肽键的断裂。（错） 29、变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的。（错） 30、变性后的蛋白质其分子量也发生改变。（错）31、变性后的蛋白质不可能再恢复原来的空间结构。（错）32、一氨基一羧基氨基酸的pI为中性，因为-COOH和-NH+3的解离度相等。（ 错）33、生物体内只有蛋白质才含有氨基酸。（错 ） 34、蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。（对 ） 三、选择1、 某一溶液中蛋白质的百分含量为 55% ，此溶液的蛋白质氮的百分浓

12、度为 A(A) 8.8% (B) 8.0% (C) 8.4% (D) 9.2% (E) 9.6%2、下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的?D A.酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环 B.酪氨酸和丝氨酸都含羟基 C.亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸 D.脯氨酸和酪氨酸都是非极性氨基酸 E.组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是杂环氨基酸3、下列氨基酸中哪些具有分支的碳氢侧链?B (1).缬氨酸 (2).组氨酸 (3).异亮氨酸 (4).色氨酸 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,44、在生理 pH 条件下，下列哪种氨基酸带正电荷？C A 丙氨酸 B 酪氨酸 C 赖氨酸 D .异亮氨酸 5、下列

13、哪种氨基酸属于亚氨基酸？ BA 丝氨酸 B 脯氨酸 C 亮氨酸 D 组氨酸6、下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？ CA Leu B Ala C Gly D Ser E Val 7、 蛋白质分子中的氨基酸属于下列哪一项？C (A) L- 氨基酸 (B) D- 氨基酸 (C) L- 氨基酸 (D) D- 氨基酸 (E) L 、 D- 氨基酸 8、 属于碱性氨基酸的是C(A) 天冬氨酸 (B) 异亮氨酸 (C) 组氨酸 (D) 苯丙氨酸 (E) 半胱氨酸 9、 280nm 波长处有吸收峰的氨基酸为C(A) 丝氨酸 (B) 谷氨酸 (C) 色氨酸 (D) 精氨酸 10、 下列有关氨基酸的叙述，错误的是C

14、(A) 丝氨酸和苏氨酸侧链都含羟基 (B) 异亮氨酸和撷氨酸侧链都有分支 (C) 组氨酸和脯氨酸都是亚氨基酸 (D) 苯丙氨酸和色氨酸都为芳香族氨基酸 (E) 精氨酸和赖氨酸都属于碱性氨基酸 11、 常出现于肽链转角结构中的氨基酸为A(A) 脯氨酸 (B) 半胱氨酸 (C) 谷氨酸 (D) 甲硫氨酸 (E) 丙氨酸 12、 在各种蛋白质中含量相近的元素是B(A) 碳 (B) 氮 (C) 氧 (D) 氢 (E) 硫 13、 下列氨基酸中含有羟基的是B(A) 谷氨酸、天冬酰胺 (B) 丝氨酸、苏氨酸 (C) 苯丙氨酸、酪氨酸 (D) 半胱氨酸、蛋氨酸 (E) 亮氨酸、缬氨酸 14、下列氨基酸哪一个

15、含有吲哚环？CA、Met B、Phe C 、Try D、 Tyr15、含有咪唑环的氨基酸是：CA、 Val B、Tyr C 、His D、 Phe16、甘氨酸的解离常数是pK1=2.34, pK2=9.60 ，它的等电点（pI）是( B )。A、7.26 B、5.97 C 、7.14 D、10.7717、氨基酸在等电点时具有的特点是：E A 不带正电荷 B 不带负电荷 C A 和 B D 溶解度最大 E 在电场中不泳动18、氨基酸不具有的化学反应是：AA、 双缩脲反应 B、茚三酮反应C 、DNFB反应 D、 与甲醛的反应19、下列关于蛋白质中L-氨基酸之间形成的肽键的叙述，哪些是正确的?A (

16、1).具有部分双键的性质 (2).比通常的C-N单键短 (3).通常有一个反式构型 (4).能自由旋转 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,420、在一个肽平面中含有的原子数为：D A. 3 B.4 C.5 D.621、形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和它相邻的两个-碳原子处于( C )。A、不断绕动状态 B、可以相对自由旋转C、同一平面 D、随不同外界环境而变化的状态22、蛋白质分子中-S-S-断裂的方法是（C ） A、加尿素 B、透析法 C、加过甲酸 D、加重金属盐23、下列关于二硫键的叙述，哪一项是错误的？DA、二硫键是两条肽链或者

17、同一条肽链的两分子半胱氨酸之间氧化后形成的；B、多肽链中的一个二硫键与巯基乙醇反应可形成两个巯基；C、二硫键对稳定蛋白质的构像其重要作用；D、二硫键对蛋白质的四级结构是必须的。25、有一多肽经酸水解后产生等摩尔的Lys，Gly和A1a.如用胰蛋白酶水解该肽，仅发现有游离的Gly和一种二肽。下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构?B A.Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala B.Ala-Lys-Gly C.Lys-Gly-Ala D.Gly-Lys-Ala E.Ala-Gly-Lys26、测定小肽氨基酸顺序的最好方法是D A.2，4-二硝基氟苯法(FDNB法) B.二甲氨基萘磺酰氯

18、法(DNS-Cl法) C.氨肽酶法 D.苯异硫氰酸法(PITC法) E.羧肽酶法27、下列哪一项不是蛋白质 -螺旋结构的特点？ BA 天然蛋白质多为右手螺旋 B 肽链平面充分伸展 C 每隔 3.6 个氨基酸螺旋上升一圈。 D 每个氨基酸残基上升高度为 0.15nm. 28、蛋白质-螺旋的特点有C(A) 多为左手螺旋 (B) 螺旋方向与长轴垂直 (C) 氨基酸侧链伸向螺旋外侧 (D) 肽键平面充分伸展 (E) 靠盐键维系稳定性29、维系蛋白质二级结构稳定的化学键是E(A) 盐键 (B) 二硫键 (C) 肽键 (D) 疏水键 (E) 氢键 30、 有关蛋白质一折叠的描述，错误的是C(A) 主链骨架

19、呈锯齿状 (B) 氨基酸侧链交替位于扇面上下方 (C) -折叠的肽链之间不存在化学键 (D) -折叠有反平行式结构，也有平行式结构 (E) 肽链充分伸展 31、胰岛素分子A链与B链的交联是靠B(A) 氢键 (B) 二硫键 (C) 盐键 (D) 疏水键 (E) Vander Waals力 32、关于蛋白质亚基的描述，正确的是D(A) 一条多肽链卷曲成螺旋结构 (B) 两条以上多肽链卷曲成二级结构 (C) 两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质 (D) 每个亚基都有各自的三级结构 (E) 以上都不正确 33、正确的蛋白质四级结构叙述应该为C(A) 蛋白质四级结构的稳定性由二硫键维系 (B) 蛋白质变性时

20、其四级结构不一定受到破坏 (C) 蛋白质亚基间由非共价键聚合 (D) 四级结构是蛋白质保持生物活性的必要条件 (E) 蛋白质都有四级结构34、当蛋白质处于等电点时，可使蛋白质分子的（D ） A、稳定性增加 B、表面净电荷不变 C、表面净电荷增加 D、溶解度最小35、 蛋白质吸收紫外光能力的大小，主要取决于D(A) 含硫氨基酸的含量 (B) 肽键中的肽键 (C) 碱性氨基酸的含量 (D) 芳香族氨基酸的含量 (E) 脂肪族氨基酸的含量 36、蛋白质溶液的稳定因素是C(A) 蛋白质溶液的粘度大 (B) 蛋白质分子表面的疏水基团相互排斤 (C) 蛋白质分子表面带有水化膜 (D) 蛋白质溶液属于真溶液

21、 (E) 以上都不是 37、盐析法沉淀蛋白质的原理是A(A) 中和电荷，破坏水化膜 (B) 盐与蛋白质结合成不溶性蛋白盐 (C)调节蛋白质溶液的等电点 (D)以上都不是 38、下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的？A A 蛋白质分子的净电荷为零时的 pH 值是它的等电点 B 大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出 C 由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点 D 以上各项均不正确 39、下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的？B A 胶体性质 B 两性性质 C 沉淀反应 D 变性性质 E 双缩脲反应 40、血清白蛋白（pI为4.7）在下列哪种pH值溶液中带正电荷？A(A) p

22、H4.0 (B) pH5.0 (C) pH6.0 (D) pH7.0(E) pH8.0 41、下列哪一项不是蛋白质的性质之一？ CA 处于等电状态时溶解度最小 B 加入少量中性盐溶解度增加 C 变性蛋白质的溶解度增加 D 有紫外吸收特性 42、 蛋白质变性时不应出现的变化是：E 1. 蛋白质的溶解度降低 B. 失去原有的生理功能 C. 蛋白质的天然构象破坏 D. 蛋白质分子中各种次级键被破坏E. 蛋白质分子个别肽键被破坏 43、蛋白质变性是由于 B (1).氢键破坏 (2).肽键断裂 (3).亚基解聚 (4).破坏水化层和中和电荷 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3

23、,4 44、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量是根据各种蛋白质 BA.在一定pH条件下所带净电荷的不同 B.分子大小不同 C.分子极性不同 D.溶解度不同 E.以上说法都不对 45在寡聚蛋白质中，亚基间的立体排布，相互作用以及接触部位间的空间结构称之为CA 三级结构 B 结缔现象 C 四级结构 D变构现象46甘氨酸的解离常数是pk1=2.34,pk2=9.60,它的等电点（pi）是B A7.26 B5.97 C 7.14 D 10.7747肽链中的肽键是C A顺式结构 B顺式和反式共存 C反式结构48天然蛋白质中含有的二十种氨基酸的结构 D A全是L-型 B全部是D-型 C部分是L-型 部

24、分是D-型 D除甘氨酸外都是L-型四、问答1、为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量？答：各种蛋白质的含氮量颇为接近，平均为16% ，因此测定蛋白质的含氮量就可推算出蛋白质的含量。常用的公式为100克样品中蛋白质含量（克%） 每克样品中含氮克数 6.25100 。2、蛋白质是如何分类的？ 答：1根据蛋白质的外形分类：球状蛋白质，纤维状蛋白质。2根据蛋白质的化学组成分类：简单蛋白质只由氨基酸组成。结合蛋白质=蛋白质部分+非蛋白质部分。3、写出氨基酸的结构通式，并说明其结构特征。（蛋白质的基本组成单位是什么？其结构特征是什么？） RI NH2- C-COOHI H除Pro外，均为-氨基酸。除Gly均

25、具有光学异构体，为L-氨基酸。4、怎样对常见氨基酸进行分类？答：1按R基的化学结构分为脂肪族、芳香族、杂环、杂环亚氨基酸四类。2按R基的极性和在中性溶液的解离状态分为非极性氨基酸、极性不带电荷、极性带负电荷或带正电荷的四类。 带有非极性R（烃基、甲硫基、吲哚环等，共9种）：甘（Gly）、丙（Ala）、缬（Val）、亮（Leu）、异亮（Ile）、苯丙（Phe）、甲硫（Met）、脯（Pro）、色（Trp） 带有不可解离的极性R（羟基、巯基、酰胺基等，共6种）：丝（Ser）、苏（Thr）、天胺（Asn）、谷胺（Gln）、酪（Tyr）、半（Cys）带有可解离的极性R基（共5种）：天（Asp）、谷（Gl

26、u）、赖（Lys）、精（Arg）、组（His），前两个为酸性氨基酸，后三个是碱性氨基酸。5、将固体氨基酸溶于pH7的水中所得的氨基酸溶液，有的pH大于7，有的 pH小于7，这种现象是如何产生的？答：氨基酸在水中的两性离子既能像酸一样放出质子，也能像碱一样接受质子，氨基酸具有酸碱性质，是一类两性电解质。6、根据氨基酸的pK值，指出G1y、Asp、Lys和His在(1)pH1.0、(2) pH4.0、(3)pH10时可能带的静电荷(用-、0或+表示)。（1）+ + + + （2）+ - + + （3）- - - +7、什么是肽平面？它有哪些基本特征？答：肽键中的四个原子和它相邻的两个-碳原子构成一

27、个平面称为肽平面。（1）肽平面是刚性平面，肽平面的键长和键角一定。（2）太平面之间可以旋转。8、如何测定蛋白质的一级结构？答：a. 通过末端分析确定蛋白质分子由几条肽链构成。 b. 将每条肽链分开，并分离提纯。 c. 肽链的一部分样品进行完全水解，测定其氨基酸组成和比例。 d. 肽链的另一部分样品进行N末端和C末端的鉴定。 e. 拆开肽链内部的二硫键。 f. 肽链用酶促或化学的部分水解方法降解成一套大小不等的肽段，并将各个肽段分离出来。 g. 测定每个肽段的氨基酸顺序。 h. 从第二步得到的肽链样品再用另一种部分水解方法水解成另一套肽段，其断裂点与第五步不同。分离肽段并测序。比较两套肽段的氨基

28、酸顺序，根据其重叠部分拼凑出整个肽链的氨基酸顺序。 i. 测定原来的多肽链中二硫键和酰胺基的位置。9、分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽，如能，则指出其水解部位。肽 酶(1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶(2)Phe-Met-Leu 羧肽酶(3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶(4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶10、某一蛋白质用胰蛋白酶处理后得到一个五肽，含Arg、Leu、Asp、Ser、Tyr,为了确定肽的氨基酸序列，进行了Edman降解，每次降解剩下的肽段的氨基酸组成如下：第一次Edman 降解后：Arg 、Asp、 Ser 、Tyr第二次Edman 降解后：Arg 、Asp

29、 、Ser 第三次Edman降解后： Arg 、Ser 请给出这个五肽的氨基酸序列并说明理由（胰蛋白酶主要作用于碱性氨基酸羧基端肽键）。11、有一个A段：经酸水解分析得知由Lys、His、Asp、两个Glu、Ala以及Val、Tyr组成。当A肽与DNFB试剂反应后，的DNPAsp；当用羧肽酶处理后得游离撷氨酸。当A肽用胰蛋白酶降解时，得到两种肽，其中一种的氨基酸组成为（Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr），另一种的氨基酸组成为（His、Glu、以及Val），可给出DNPHis。此外，A肽用糜蛋白酶降解时，也得到两种肽，其中一种为（Asp、Ala、Tyr），另一种为（Lys、His、两个Gl

30、u、以及Val）。问：分析A肽的氨基酸顺序，并说明理由。（糜蛋白酶作用于芳香族氨基酸羧基端肽键）12、用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、-巯基乙醇、胰蛋白酶、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫腈、胰凝乳蛋白酶。(1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序(2)鉴定肽的N-端氨基酸(3)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键(4)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键(5) 水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键（6）使二硫键氧化断裂（7）氨基酸定量分析14、试比较Gly、Pro与其它常见氨基酸结构的异同，它们对多肽链二级结构的形成有何影响？ 答：（1）Gly的R基就一个氢原子，在蛋

31、白质中提供的空间位阻最小。是唯一不含手性碳原子的氨基酸，因此不具有旋光性。容易形成转角Pro由于有独特的R基（杂环、亚氨基），至使他也易于产生转角 （2）肽键中有Pro残基时由于Pro的亚氨基参与了肽键的形成来形成氢键。在多肽链中，只要出现Pro，a-螺旋就被中断，产生一个弯曲或者结节。（3）b-转角由四个连续的Aa残基组成，第n个Aa残基的-co-和第n+3个Aa残基的-nh-形成氢键，请见维持b-转角的稳定性，在这种结构中这两种氨基酸出现的频率高。15、聚赖氨酸在pH7时呈无规则线团，在pH10时则呈-螺旋；聚谷氨酸在pH7时呈无规则线团，在pH4时则呈-螺旋，为什么？16、什么是蛋白质的

32、二级结构？它主要有哪几种？各有何结构特征？ 是指多肽链中有规则重复的构象。多肽链并不是简单的线型，而是按照一定方式规则地旋转或折叠。二级结构的基本构象 ：a-螺旋、b-折叠、b-转角、无规卷曲等a-螺旋： 维系a螺旋的作用力是氢键：氢键是由肽链上的N-H（亚氨基）氢和它前面（N端）第四个残基上的C=O氧之间形成，氢键与螺旋轴几乎平行。b-转角： 、肽链几乎是完全伸展的，0.35nm。 、肽链呈锯齿状，肽平面呈片状。 、氢键是维持b折叠的作用力。肽链之间或一条肽链的不同肽段之间形成氢键，几乎所有的肽键都参与链间氢键的交联，氢键与链的长轴方向接近垂直。无规卷曲： 没有一定规律的松散肽链结构，但仍是

33、紧密有序的稳定结构，通过主链间及主链与侧链间氢键维持其构象。17、蛋白质三级结构的构象特征。答： 三级结构构象近似球形。 亲水表面，疏水核。分子中的亲水基团（具有极性基团侧链的氨基酸残基）相对集中在球形分子的表面，疏水基团（非极性氨基酸残基）相对集中在分子内部。 稳定性主要靠疏水相互作用维系，其它：氢键、二硫键、离子键和范德华力。 三级结构形成了，蛋白质分子的生物活性部位就形成了，在球形分子的表面往往有一个很深的裂缝，活性部位就在其中。 18、举列说明蛋白质的四级结构。19、论述蛋白质分子各级结构的涵义及维持结构的作用力。答：1）蛋白质的一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。 （2）维持

34、一级结构的化学键：肽键，有些蛋白质还包括二硫键。 二级结构：是指多肽链中有规则重复的构象。多肽链并不是简单的线型，而是按照一定方式规则地旋转或折叠。维持二级结构的的化学键有氢键，静电引力，范德华力，疏水相互作用，二硫键。 三级结构：蛋白质分子处于它的天然折叠状态的三维构象。三级结构是多肽链在二级结构的基础上进一步盘绕、折叠。维持三级结构的化学键考疏水相互作用维系，其它的由氢键，二硫键，离子键和范德华力。 四级结构：多亚基蛋白质的三维结构，实际上是具有三级结构的多肽链（亚基 ）以适当方式聚合所呈现出的三维结构。维持四级结构的化学键作用力主要靠疏水相互作用，其他的有氢键，离子键，范德华力。20、扼

35、要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。(1)在低pH时沉淀。(2)当离子强度从零逐渐增加至一定值后，其溶解度下降，最后出现沉淀。(3)在一定的离子强度下，达到等电点时，表现出最小的溶解度。(4)加热时沉淀。 21、由蛋白质水解制备氨基酸可以采用什么方法，说明理由。答：酸水解法:优点是不易引起水解产物旋光性的变化；缺点是Try被沸酸完全破坏。碱水解法：有点事Try在水解中不受破坏；缺点是水解产生的Aa发生旋光异构作用。酶水解法：优点是条件温和，Aa完全不被破坏也不发生旋光异构现象；缺点是水解不彻底，中间产物多。22、说明利用滤纸层析分离氨基酸的原理。答：利用氨基酸的极性不同使混合物分

36、离，若分子中极性基团相同，而亚甲基数增加则整个分子的极性相应降低，Rf值随之增大。23、说明利用离子交换层析分离氨基酸的原理。答：离子交换树脂使混合样品中的各种氨基酸分离的原理是由两种因素综合作用的结果。 （1）氨基酸与树脂电离基团饿静电相互作用，这种作用受环境PH值影响而变化。 （2）氨基酸的R基团与树脂的非极性苯环的疏水相互作用，疏水性强的R基团与树脂的亲和力大。24、说明亲和层析分离纯化蛋白质的原理及基本步骤。答：利用生物大分子和其他物质进行特异性又可逆的结合这一特质，对这些生物大分子物质进行层析分离的方法。 步骤：制备亲和吸附剂 上柱 结合 分离 洗脱25、说明凝胶过滤分离蛋白质的原理

37、。答：原理分子筛层析。介质交联葡萄糖、 琼脂糖 （多孔的网状 聚丙烯酰胺形成的凝胶珠 结构）原理是利用具有网状结构的凝胶分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。26、说明SDS-PAGE用于蛋白质相对分子质量测定的原理。答：(1）聚丙烯酰胺凝胶是一种凝胶介质，蛋白质在其中的电泳速度决定于蛋白质分子的大小、形状和所带电荷数量。(2）十二烷基硫酸钠(SDS）可与蛋白质大量结合，结合带来两个后果：由于SDS是阴离子，故使不同的亚基或单体蛋白质都带上大量的负电荷，掩盖了它们自身所带电荷的差异;使它们的形状都变成杆状。这样，它们的电泳速度只决定于其相对分子质量的大小。(3）蛋白质分子在SDS

38、-PAGE凝胶中的移动距离与指示剂移动距离的比值称相对迁移率，相对迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系。因此，将含有几种已知相对分子质量的标准蛋白质混合溶液以及待测蛋白溶液分别点在不同的点样孔中，进行SDS-PAGE;然后以标准蛋白质相对分子质量的对数为纵坐标，以相对应的相对迁移率为横坐标，绘制标准曲线;再根据待测蛋白的相对迁移率，即可计算出待测蛋白的相对分子质量。27、为什么凝胶过滤时，相对分子质量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDSPAGA时，它为何又迁移的最快？答; （1）原理：蛋白质分子SDS-PAGE的电泳迁移率主要取决于它的分子量，而与所带电荷和形状无关。蛋白质分子在溶液中

39、与SDS按一定的重量比例结合（1.4gSDS/g蛋白质）。 结合后的蛋白质带上大量阴离子，SDS的负电荷远远地超过了蛋白质本身所带的电荷，因而掩盖了蛋白质分子间所带电荷的差别。同时SDS和蛋白质结合后分子的次级键被破坏了，构象发生了改变，由亚基组成的寡聚蛋白质也转变为单体的形式，经实验分析， 蛋白质和SDS复合物的形状呈细杆状，它的粗细与蛋白质的种类无关，长度与蛋白质分子量成正比。所以在SDS-PAGE凝胶电泳中，蛋白质本身的电荷与分子构象（或形状）的差异已消除，故蛋白质电泳迁移率完全取决于它的分子量。 而凝胶过滤时，样品上柱后，小分子进入凝胶微孔，大分子不能进入，故洗脱时大分子先洗脱下来而小

40、分子后洗脱下来，这样相对分子量较小的蛋白质有较长的保存时间。28、 Lys、 Leu 、Asp、 Ala 和Glu的混合液在高pH时，加到阴离子交换树脂上，用连续递减的pH溶液洗脱时，预测这些氨基酸的洗脱顺序。答：Lys Ala Leu Asp Glu29、（1）当Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合物在pH3.9进行纸电泳时，哪些氨基酸移向正极、哪些氨基酸移向负极？（2）纸电泳时，带有相同电荷的氨基酸常有少许分开，例如Gly与Ieu，请说明原因。（3）设Ala、Val、Glu、Lys、Thy的混合物pH为6.0，指出纸电泳后氨基酸的分离情况。30、利用阳离子交换层析分

41、离下列每一对氨基酸，哪一种氨基酸先被pH7的缓冲溶液从离子交换柱上洗脱出来。（1）Asp和Lys 答：Asp（2）Arg和Met Met（3）Glu和Val Glu（4）Gly和Leu Gly（5）Ser和Ala Ser31、利用SDSPAGE测定蛋白质亚基的相对分子质量。给出了作为标准物的4种纯化蛋白质亚基的相对分子质量和相应的迁移率。求迁移率为蛋白质1和2的平均值的未知蛋白质的相对分子质量。蛋白质编号相对分子质量迁移率1150005cm235000是1的39325000是1的63420000是1的8132、W、X、Y、Z4种蛋白质组成的混合样品，经凝胶过滤层析后，得到的层析图如下所示，根据

42、图形判断4种蛋白质的相对分子质量的大小及含量的多少，并说明理由。33.在一抽提液中含有三种蛋白质,其性质如左：试设计一个方案来分离纯化这三种蛋白质。34、什么是蛋白质变性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？答：蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，这种现象称为蛋白质变性。（一）生物活性丧失（二）某些理化性质的改变（三）生物化学性质的改变35.分离蛋白质的方法？答：盐析和等电点沉淀，离子交换层析，凝胶过滤，亲和层析。36.分离氨基酸的方法？答：滤纸层析，离子交换层析，薄层层析，电泳。37蛋白质及氨基酸的分析测定？答：蛋白质含量测定：凯

43、氏定氮法，双缩脲法，福林酚试剂法，紫外吸收法。蛋白质相对分子质量测定和纯度测定：SDS-PAGE。氨基酸定性定量分析：显色反应。二酶1、大多数酶的化学本质是（蛋白质 ）。2、全酶由_酶蛋白_和_辅因子_组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中_酶蛋白_决定酶的专一性，辅因子_起传递电子、原子或化学基团的作用。3、辅因子包括_辅酶_和_辅基_等。其中_辅基_与酶蛋白结合紧密，_辅酶_与酶蛋白结合疏松，可用_透析_除去。 4、根据国际系统分类法，所有的酶按所催化的化学反应的性质可以分为六大类_氧化还原类_，_转移酶类_，_水解酶类_，_裂合酶类_，_异构酶类_和_合成酶类_。5、EC 3.1.

44、1.11属于（ 水解 ）酶。 6、酶的活性中心包括_结合中心_和_催化中心_两个功能部位，其中_结合中心_直接与底物结合，决定酶的专一性，_催化中心_是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。7、酶活性中心内的必需基因分为 _结合基因_ 和 _催化剂因_.8、 _酶原_ 激活实质上是酶的 _活性中心_ 形成或暴露的过程。 9、使酶具有高效率的机制有（邻近与定向 ）、（张力与形变）、（共价催化）和（OH-和H+催化）。10、同工酶指的是（催化效果 ）相同，（ 分子结构 ）不同的一组酶。11、 Km 值等于酶促反应速度为最大速度 _一半_时的 _底物_ 浓度。 12、如果一种酶对A、B、C三种底物

45、的米氏常数分别为Kma、Kmb、Kmc，且KmaKmb Kmc，则此酶的最适底物是（ C ）、与酶亲和力最小的底物是（ A ）。13、酶促动力学的双倒数作图，得到的直线在横轴上的截距为_-1/Km_，纵轴上的截距为1/Vmax_。14、pH影响酶活力的原因可能有以下几方面：(1)影响_酶的底物的解离_，(2)影响 _酶分子的构象_。 15、不可逆性抑制剂常与酶的 _活性中心_ 以 _必须基因共价_键相结合。16、可逆性抑制中， _竞争性_ 抑制剂与酶的活性中心相结合， _非竞争性_ 抑制剂与酶的活性中心外必需基团相结合。 17、 酶活力是指_酶催化一定化学反应的能力_，一般用_V_表示。二、判

46、断：1、本质为蛋白质的酶是生物体内唯一的催化剂。（ 错 ）2、一般来说酶是具有催化作用的蛋白质，相应地蛋白质都是酶。（ 错 ）3、 L-氨基酸氧化酶可以催化D-氨基酸氧化。（ 错 ）4、辅因子在酶促反应中，主要是协助酶蛋白识别底物。错5、对于酶的催化活性来说，酶蛋白的一级结构是必需的，而与酶蛋白构象的关系不大。错6、酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。错7、酶的分类是依据其催化反应类型。（ 对 ）7、酶活性中心是酶分子的一小部分。（ 对 ）8、辅酶与酶蛋白的结合不紧密，可以用透析的方法除去。（对 ）10、同工酶就是一种酶同时具有几种功能。（ ）11、同工酶指功能相同、结构也相

47、同的一类酶。12、米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。（对 ）13、一种酶有几种底物就有几种Km值。对 14、 Km是酶的特征常数，在任何条件下，Km是常数。对 15、Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。对16、根据米氏方程，当Cs=km/3时，V=67%Vmax。错17、一个酶作用于多种底物时，其最适底物的Km值应该是最小。（对 ）18、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。（ 错 ）19、酶反应的最适pH只取决于酶蛋白本身的结构。错20、当ES复合物的量增加时，酶促反应速度也增加。错21、所有的抑制剂都作用于酶的活性中心。错22、竞争性抑制剂在结构上与酶的底物相

48、类似。（对 ）23、酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。错三、选择1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于：C A.反馈抑制 B.底物抑制 C.竞争性可逆抑制 D.非竞争性可逆抑制 E.反竞争性可逆抑制2、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？A A.His的咪唑基 B.Lys的氨基 C.Arg的胍基D.Cys的巯基 E.Trp的吲哚基3、辅酶与酶的结合比辅基与酶的结合更为( B ) A、紧 B、松 C、专一4、酶促反应中决定酶专一性的部分是( A ) A、酶蛋白 B、底物 C、辅酶或辅基 D、催化基团5、酶催化的反应与无催化剂的反应相比，在于酶能够：( B )A.

49、提高反应所需活化能 B、降低反应所需活化能 C、促使正向反应速度提高，但逆向反应速度不变或减小6、酶反应速度对底物浓度作图，当底物浓度达一定程度时，得到的是零级反应，对此最恰当的解释是：( C ) A、形变底物与酶产生不可逆结合 B、酶与未形变底物形成复合物C、酶的活性部位为底物所饱和 D、过多底物与酶发生不利于催化反应的结合7、下列关于辅基的叙述哪项是正确的？( D ) A、是一种结合蛋白质 B、只决定酶的专一性，不参与化学基因的传递 C、与酶蛋白的结合比较疏松 D、一般不能用透析和超滤法与酶蛋白分开8、全酶是指什么？( D )A、酶的辅助因子以外的部分 B、酶的无活性前体 C、一种酶一抑制

50、剂复合物 D、一种需要辅助因子的酶，具备了酶蛋白、辅助因子各种成分。9、下列关于酶特性的叙述哪个是错误的？( D )A、催化效率高 B、专一性强 C、作用条件温和 D、都有辅因子参与催化反应10、酶具有高度催化能力的原因是( A ) A、酶能降低反应的活化能 B、酶能催化热力学上不能进行的反应C、酶能改变化学反应的平衡点 D、酶能提高反应物分子的活化能11、具有生物催化剂特征的核酶(ribozyme)其化学本质是（ B ） A、蛋白质 B、RNA C、DNA D、糖蛋白12、下列关于酶活性中心的叙述正确的。（ D ） A、所有酶都有活性中心 B、所有酶的活性中心都含有辅酶 C、酶的活性中心都含有金属离子 D、所有抑制剂都作用于酶活性中心。13、酶的活性中心是指：A A 酶分子上含有必需基团的肽段 B 酶分子与底物结合的部位 C 酶分子与辅酶结合的部位 D 酶分子发挥催化作用的关键性结构区 E 酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域 14、酶的辅酶是D(A) 与酶蛋白结合紧密的金属离子 (B) 分子结