苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析

1、第七章第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析基本要求基本要求一、掌握一、掌握苯乙胺苯乙胺类拟肾上腺类药物的结构和类拟肾上腺类药物的结构和性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素药物的鉴别、性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点检查和含量测定的原理与特点 。二、熟悉二、熟悉主要苯乙胺类拟肾上腺素药物杂质主要苯乙胺类拟肾上腺素药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度的结构、危害、检查方法与含量限度三、了解三、了解影响苯乙胺类拟肾上腺素药物稳定影响苯乙胺类拟肾上腺素药物稳定性的主要因素、体内样品与临床监测方法性的主要因素、体内样品与临床监测方法 第一节第一节

2、 结构与性质结构与性质一、基本结构与典型药物一、基本结构与典型药物R R1 1CHCHCHCHNHNHR R2 2 HX HX OH ROH R3 3* *拟肾上腺素类拟肾上腺素类HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素*HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3 HCl盐酸去氧肾上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素ClH2NClCHOHCH2NH C(CH3)3HCl盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗无酚羟基无酚羟基CHOHCHCH3NHCH3HCl HCl盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱 弱碱性弱碱性酚羟基酚羟

3、基特性特性芳伯氨基芳伯氨基特性特性紫外吸收紫外吸收光学活性光学活性化学性质化学性质烃氨基侧链为仲烃氨基侧链为仲胺氮，显弱碱性胺氮，显弱碱性邻苯二酚邻苯二酚/ /酚羟酚羟基，基，FeClFeCl3 3反应，反应，易氧化易氧化手性碳原子，具手性碳原子，具有旋光性有旋光性盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗苯环苯环二、主要理化性质二、主要理化性质一、与铁盐的反应一、与铁盐的反应Ar-OHAr-OHFeClFeCl3 3络合显色络合显色 多为绿色多为绿色紫色紫色/ /紫红色紫红色 碱液碱液详见详见P224第二节第二节 鉴别试验鉴别试验二、与甲醛硫酸反应二、与甲醛硫酸反应 在此试剂中形成醌式结构而显色在此试剂中形成

4、醌式结构而显色 药物药物甲醛甲醛- -硫酸硫酸肾上腺素肾上腺素红色红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素淡红色淡红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素玫瑰红玫瑰红橙红橙红深棕红深棕红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素棕色棕色暗紫色暗紫色具有具有ArAr-OH-OH，易被氧化剂易被氧化剂I I2 2, H, H2 2O O2 2, K, K3 3Fe(CN)Fe(CN)6 6氧化氧化而显色而显色三、还原性反应三、还原性反应棕色棕色肾上腺素红（血红色）肾上腺素红（血红色）肾上腺素肾上腺素 22OH酸性下：酸性下：异丙肾上腺素红异丙肾上腺素红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素3222OSNaI重酒石

5、酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素pH3.56酒石酸酒石酸氢钾饱氢钾饱和溶液和溶液肾上腺素肾上腺素盐酸异丙肾盐酸异丙肾上腺素上腺素重酒石酸去重酒石酸去甲肾上腺素甲肾上腺素I25Na2S2O3深红棕深红棕紫色紫色无色无色/微红微红/淡紫淡紫互相区分互相区分四、四、 双缩脲反应双缩脲反应是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱，盐酸去氧肾上腺素鉴别碱，盐酸去氧肾上腺素鉴别盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱蓝紫色蓝紫色乙醚乙醚+CuSO4 + NaOH醚层醚层(紫红色紫红色)盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素紫紫色色 无色无色五、吸收光谱特征五、吸收光谱特征例如：盐酸异

6、丙肾上腺素例如：盐酸异丙肾上腺素 0.050.05mg/ml mg/ml maxmax = 280nm A =0.50 = 280nm A =0.50详见详见 P226P226一、酮体检查一、酮体检查 本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。若氢化不完全，易引入酮体杂质。 第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素肾上腺素酮肾上腺素酮 220 260 300nm肾上腺素肾上腺素及及肾上腺素酮肾上腺素酮的紫外吸收曲线的紫外吸收曲线max310nm310nm处，肾上腺素无吸收，酮体有吸收处

7、，肾上腺素无吸收，酮体有吸收 采用采用UV法检查：法检查： 利用酮体在利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。有吸收，本类药物无吸收。 例如：例如： 肾上腺素肾上腺素 配配2.0mg/ml =310nm A0.05 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 配配2.0mg/ml =310nm A0.20重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 配配2.0mg/ml =310nm A0.05二、有关物质的检查二、有关物质的检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇TLC盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍 PC其他其他HPLC 第四节第四节 含量测定含量测定非水溶剂的种类：非水溶剂的种类：

8、酸性溶剂酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强 相对碱度，相对碱度，如冰醋酸如冰醋酸碱性溶剂碱性溶剂：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强相对酸度，相对酸度，如二甲基甲酰胺如二甲基甲酰胺两性溶剂：具有酸、碱性能，如两性溶剂：具有酸、碱性能，如methanol惰性溶剂：没有酸、碱性的溶剂，丙酮、氯仿惰性溶剂：没有酸、碱性的溶剂，丙酮、氯仿一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法 弱碱性弱碱性( (一一) ) 基本原理基本原理当当HAHA酸性较强时，反应不能定量完成，必须酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低除去或降低HAHA的

9、酸性，使反应顺利地完成。的酸性，使反应顺利地完成。BHBH+ + A A- -+ +HClOHClO4 4BHBH+ + ClOClO4 4+ +HAHA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件因此，要根据不同情况采用相应测定条件( (二二) ) 一般方法一般方法供供试试品品+ +冰冰醋醋酸酸1010ml-30mlml-30ml若供试品为氢卤酸盐再加若供试品为氢卤酸盐再加5%5%醋酸汞醋酸汞的冰醋酸液的冰醋酸液3 3ml-5mlml-5ml结结果果高氯酸滴定液高氯酸滴定液以空白试验以空白试验校正校正( (三三) ) 问题讨论问题讨论1.1.适用范围适

10、用范围: :pKpKb b88的有机弱碱及其盐类的含量测定的有机弱碱及其盐类的含量测定pKpKb b为为8 81313的弱碱性杂环类药物，可采用本法的弱碱性杂环类药物，可采用本法 采用合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法采用合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法药物药物pKpKb b为为8 81010时，时， 选冰醋酸作为溶剂选冰醋酸作为溶剂 为为10101212时，选冰醋酸与醋酐的混合溶液时，选冰醋酸与醋酐的混合溶液 12 12时，应用醋酐作为溶剂时，应用醋酐作为溶剂 比醋酸合质子的酸性更强，比醋酸合质子的酸性更强，可增强药物的碱性可增强药物的碱性2(2(CHCH3 3CO)CO)2 2O O(C

11、H(CH3 3CO)CO)3 3O O+ + + + CHCH3 3COOCOO- -醋酐合乙酰氧离子醋酐合乙酰氧离子在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的甲酸甲酸，也能，也能使滴定突跃使滴定突跃显著增大显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。意测定结果。 2.2.酸根的影响酸根的影响冰醋酸中的酸性冰醋酸中的酸性:HClO:HClO4 4HBrHBrH H2 2SOSO4 4HClHClHSOHSO4 4- -HNOHNO3 3 当被置换出的酸的酸性较强，则此置换反应无当被置换出的酸的酸性较强，则此置换反应无法定量完成。法定量完成。盐酸盐盐

12、酸盐的酸性较强，因此的酸性较强，因此滴定前预滴定前预先加入醋酸汞先加入醋酸汞与氢卤酸生成在冰醋酸中难解离的与氢卤酸生成在冰醋酸中难解离的卤化汞，从而消除氢卤酸对滴定反应的不良影响。卤化汞，从而消除氢卤酸对滴定反应的不良影响。3.3.滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性 溶剂冰醋酸具有挥发性，膨胀系数较大，溶剂冰醋酸具有挥发性，膨胀系数较大，温度温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品若滴定样品与标定与标定HClOHClO4 4溶液时的温度不一致，温差未超过溶液时的温度不一致，温差未超过1010时，应将高氯酸滴定液的浓度用公式加以时，应将高氯酸滴定液的浓度用公式加以校正

13、校正)(0011. 010101ttNN0.0011：冰醋酸的体积膨胀系数：冰醋酸的体积膨胀系数 温差超过温差超过10时，应重新标定时，应重新标定4.终点指示方法终点指示方法 常用电位法和指示剂法。常用电位法和指示剂法。电位法：玻璃电极为指示电极电位法：玻璃电极为指示电极 饱和甘汞电极为参比电极饱和甘汞电极为参比电极指示剂：结晶紫（指示剂：结晶紫（crystal violet，CV） 碱性碱性 酸性酸性 紫紫、蓝蓝、蓝绿蓝绿、绿绿、黄绿黄绿、黄黄 在滴定不同强度的碱时，终点颜色变化不同。在滴定不同强度的碱时，终点颜色变化不同。较强的碱应以蓝色或天蓝色为终点；较强的碱应以蓝色或天蓝色为终点；较弱

14、的碱应以黄绿色或黄色为终点。较弱的碱应以黄绿色或黄色为终点。最好以电位滴定法作对照，以确定终点的颜色。最好以电位滴定法作对照，以确定终点的颜色。同时应作空白试验以减少滴定终点误差。同时应作空白试验以减少滴定终点误差。N能键合多个质子，表现为多元碱能键合多个质子，表现为多元碱非水滴定法测定有机碱含量的优点非水滴定法测定有机碱含量的优点1在水中难以溶解或易发生水解的有机碱及其盐在水中难以溶解或易发生水解的有机碱及其盐类，都可按非水法测定类，都可按非水法测定2由于有机溶剂的电离常数低，用于少量样品的由于有机溶剂的电离常数低，用于少量样品的滴定也有明显的终点滴定也有明显的终点3方法简便、快速，样品取量

15、少，结果也较准确方法简便、快速，样品取量少，结果也较准确 本类药物的原料药多采用此法。本类药物的原料药多采用此法。 1 1. .重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于相当于B B的有机酸盐，可直接滴定的有机酸盐，可直接滴定 2.2.盐酸异丙肾上腺素的测定盐酸异丙肾上腺素的测定 相当于相当于B B的盐酸盐，不能直接滴定，需加的盐酸盐，不能直接滴定，需加Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 处理后滴定处理后滴定 3.3.硫酸沙丁胺醇的测定硫酸沙丁胺醇的测定 相当于相当于B B的的H H2 2SOSO4 4盐，可直接滴定至其硫酸氢盐，盐，可直接滴定至其硫酸氢盐，加醋酐提高碱性加醋酐提

16、高碱性二、溴量法二、溴量法适用：重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素适用：重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素基本原理：具苯酚结构，酚羟基的邻对位基本原理：具苯酚结构，酚羟基的邻对位H H为活为活泼泼H H，能与过量的溴定量发生溴代反应，能与过量的溴定量发生溴代反应剩余剩余定、过量定、过量3结果用结果用空白试验空白试验进行校正进行校正三、三、 UVUV与比色法与比色法1.UV1.UV：结构中苯环具有紫外吸收：结构中苯环具有紫外吸收2.2.比色法：比色法：利用药物分子结构中的利用药物分子结构中的Ar-NHAr-NH2 2重氮化偶合显色重氮化偶合显色，如：盐酸克仑特罗栓如：盐酸克仑特罗栓利用药物分子结构中

17、的利用药物分子结构中的ArAr-OH-OH与与FeFe2 2络合显色络合显色，进行比色测定，如：盐酸异丙肾上腺素注射液、进行比色测定，如：盐酸异丙肾上腺素注射液、盐酸多巴胺注射液盐酸多巴胺注射液 四、四、HPLCHPLC 肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液等液等动物组织中盐酸克仑特罗的动物组织中盐酸克仑特罗的GC-MS测定测定2009200920112011年，央视年，央视3 31515特别行动特别行动“健美猪健美猪”真相真相曝光双曝光双汇子公司收购汇子公司收购含含“瘦肉精瘦肉精”猪肉猪肉第五节第五节 体内药物分析体内药物分析盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗平喘药平喘药非兽药非兽药非饲料添加剂非饲料添加剂使用剂量是人用药剂量的使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。提高瘦肉率的效果。中毒：肌肉颤动、心悸、心律失常、心动过速中毒：肌肉颤动、心悸、心律失常、心动过速检测方法检测方法GC-MSGC-MSHPLCHPLC-MS/MS色谱高