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文档简介

1、绪论模式微生物:微生物由于其“五大共性”加上培养条件简便,因此是生命科学工作者在研究基础理论问题时最乐于选用的研究对象。比面值:单位体积所占有的表面积,既表面积/体积。微生物五大共性:体积大,面积小;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,异变异;分布广,种类多。第一章 原核生物的形态、结构和功能原核生物:既广义的细菌,指一大类细胞核无核膜包裹,只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物,包括真细菌和古生菌。革兰氏染色法:细菌先经碱性染料结晶紫染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌紫色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性

2、菌(G)。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。磷酸壁:结合在G+细菌细胞壁上的一种酸性多糖,主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。古生菌:一类在进化途径上很早就与真细菌和真核生物互相独立的生物种群。肽聚糖:真细菌细胞壁中特有的成分,由肽和聚糖两部分组成,期中的肽包括四肽尾和肽桥两种,而聚糖则是由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸两种单糖相互间隔连接成的长桥。假肽聚糖:甲烷杆菌等部分古生菌细胞壁的主要成分。其多糖骨架由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸以-1,3糖苷键交替连接而成,连在后一氨基糖上的肽尾,由L-Glu、L-Ala和L-L

3、ys三个L型氨基酸组成,肽桥则由L-Glu一个氨基酸组成。缺壁细菌:指细胞壁缺乏或缺损的细菌。包括原生质体、球状体、L型细菌和支原体。间体:是一种由细胞膜内褶而形成的囊状结构,其内充满着层状或管状的泡囊。聚-羟丁酸:一种存在于许多细菌细胞质内属于脂质的碳源类贮藏物,具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压等作用。磁小体:一种纳米级、高纯度、高度均匀、有独特结构的链状单磁畴磁晶体。羧酶体:是存在于一些自养细菌细胞内的多角形或六角形内含体,是自养细菌所特有的内膜结构,大小与噬菌体相仿(约10nm)。内含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶。是自养型细菌固定CO2的部位。糖被:包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定

4、的透明胶装物质。荚膜:某些细菌表面的特殊结构,是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质,荚膜的成分因不同菌种而异,主要是由葡萄糖与葡萄糖醛酸组成的聚合物,也有含多肽与脂质的。“拴菌”实验:设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固地“拴”在载波片上,然后在光镜下观察该细胞的行为。异形胞:存在于丝状生长种类中的行大、壁厚、专司固氮功能的细胞,数目少而不定,位于细胞链中间或末端。衣原体:一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型G原核生物。原体:具有感染力的细胞称作原体。呈小球状,细胞壁厚,致密,不能运动,不生长(RNA:DNA=1:1),抗干旱,有传染性。试图式G+细菌和G细菌细胞壁的主要构造,并简要说明其异

5、同。成 分革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细胞肽聚糖磷壁酸类脂质蛋白质含量很高(一般为90%)含量较高(<30)一般无(<2)0少量含量很低(520)0含量较高(约 20)含量较高试图示肽聚糖单体的模式构造,并指出G+细菌和G细菌在肽聚糖的成分和结构上的差别。G-细菌与G+细菌的肽聚糖的差别仅在于:1)四肽尾的底3个氨基酸不是L-lys,而是被一种只有在原核微生物细胞壁上才有的内消二氨基庚二酸(m-DAP)所代替;2)没有特殊的肽桥,其前后两个单体间的连接仅通过甲四肽尾的第4个氨基酸D-Ala的羧基与乙四肽尾的第3个氨基酸m-DAP的氨基直接相连,因而只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网

6、套。何谓“拴菌”实验?它的创新思维在何处?答:“拴菌”实验即设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固地“拴”在载波片上,然后在光镜下观察该细胞的行为。研究细菌芽孢有何理论和实际意义?芽孢的有无、形态、大小和着生位置等是细菌分类和鉴定中的重要形态学指标;这类菌种芽孢的存在,有利于提高菌种的筛选效率,有利于菌种的长期保藏;是否能杀灭一些代表菌的芽孢是衡量和制定各种消毒灭菌标准的主要依据;许多产芽孢细菌是强致病菌。例如,炭疽芽孢杆菌、肉毒梭菌和破伤风梭菌等;有些产芽孢细菌可伴随产生有用的产物,如抗生素短杆菌肽、杆菌肽等。试列表比较细菌鞭毛、菌毛和性毛的异同。项目鞭毛菌毛性毛形态长,波曲,中空;分鞭毛丝

7、、钩形鞘和基体3部分短,直,细,中空;构 造简单较长,较直,中空;构造简单数目一至数十条250-1 000余条一至少数几条着生部位端生,周生,侧生周生不定成分鞭毛蛋白菌毛蛋白性毛蛋白功能运动黏附传递遗传物质代表菌大肠杆菌,芽孢杆菌,梭菌,弧菌,假单胞菌等G致病菌等G细菌的雄性菌株第二章 真核微生物的形态、构造和功能真核微生物:一大类细胞核具有核膜、能进行有丝分裂,细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的生物。菌物界:指与动物界、植物界相并列的一大群无叶绿素、依靠细胞表面吸收有机养料、细胞壁一般含几丁质的真核微生物。酵母菌:一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌。溶酶体:一种由单层

8、膜包裹、内含多种酸性水解酶的小球形、囊泡状细胞器,主要功能是细胞内的消化作用,消化自身死亡蛋白质和外来异物。酵母纤维素:外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖,都是分支状聚合物,中间夹着一层蛋白质。假菌丝:芽殖后,如果长大的子细胞与母细胞不分离,期间仅以狭小的面积相连,称为藕节状的细胞串。2m质粒:一个位于细胞核内的闭合环状超螺旋DNA分子,长约2m(6kb)。假根:低等真菌匍匐丝与固体基质接触分化出来的根状结构,具有固着和吸取养料等功能。附着胞:许多寄身于植物的真菌在其芽管或老菌丝顶端会发生膨大、分泌黏状物,借以牢固地黏附在宿主的表面。菌核:一种形状、大小不一的休眠菌丝组织,在不良条件下,会保存数年生

9、命力。菌索:白色根状菌丝组织,功能为促进菌体蔓延和抵御不良环境。子实体:在其里面或上面可产生无性或有性孢子,有一定形状和构造的任何菌丝体组织。锁状联合:形成喙状突起而连合两个细胞的方式不断使双细胞分裂,从而使菌丝尖端不断向前延伸。简述酵母菌的5个特点。 答:(1)生活史中,个体主要以单细胞状态存在;(2)多数营出芽繁殖,也有的裂殖;(3)能发酵糖类产能;(4)细胞壁常含甘露聚糖;(5)喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长。试列表比较真菌孢子的类型、主要特点和代表种属。孢子名称染色体倍数外形数量外或内在其他特点实例无性孢子游动孢子孢囊孢子分生孢子节孢子厚坦孢子芽孢子掷孢子nnnnnnn圆、梨

10、、肾形近圆形极多样柱形近圆形近圆形镰、豆、肾形多多极多多少较多少内内外外外外外有鞭毛,能游动水生型有鞭毛少数为多细胞各孢子同时形成在菌丝顶或中间形成在酵母细胞上出芽形成成熟时从母体射出壶菌根霉、毛霉曲霉、青霉白地霉总状毛霉假丝酵母掷孢酵母有性孢子卵孢子结核孢子子囊孢子担孢子2n2nnn近圆形近圆形多样近圆形1至几1一般8一般4内内内外厚壁,休眠厚壁,休眠,大,深色长在各种子囊内长在特有的担子上德氏腐霉根霉,毛霉脉孢霉、红曲蘑菇,香菇什么叫锁状联合?其生理意义如何?图示。锁状联合: 形成喙状突起而连合两个细胞的方式不断使双细胞分裂,从而使菌丝尖端不断向前延伸。生理意义:保证了双核菌丝在进行细胞分

11、裂时,每节(每个细胞)都能含有两个异质(遗传型不同)的核,为进行有性生殖,通过核配形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准,凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。第三章 病毒和亚病毒因子病毒:一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”,其本质是一类含DNA或RNA的特殊遗传因子。亚病毒因子:凡在核酸和蛋白质两种成分中,只含有其中之一的分子病原体或是由缺陷病毒构造的功能不完整的病原体。病毒粒:专指成熟的、结构完整的和有感染性的单个病毒。噬菌斑:当一个噬菌体感染一个敏感细胞后,隔不久即释放出一群子代噬菌体,在固体培养基中,它们通过琼脂层的

12、扩散又侵染周围的宿主细胞,并引起它们的裂解,如此经过多次重复,就出现了一个由无数噬菌体粒子构成的群体噬菌斑,它是透亮不长菌的小圆斑,每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。烟草花叶病毒:一种在病毒学发展史各阶段都有重要影响的模式植物病毒。烈性噬菌体:在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解5阶段而实现其繁殖的噬菌体。温和噬菌体:不能在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解5阶段而实现其繁殖的噬菌体。裂解性周期:烈性噬菌体所经历的繁殖过程。溶源性:温和噬菌体侵入相应宿主细胞后,随宿主的复制而进行同步复制,并不引起素质细胞裂解,前噬菌体:整合在宿主基因组上的温和噬菌体的核酸。核型多角

13、体病毒:一类在昆虫细胞核内增殖的、具有蛋白质包含体的杆状病毒,数量最多。质型多角体病毒:一类在昆虫细胞质内增殖的、可形成蛋白质、包含体的球状病毒。类病毒:一类只含RNA一种成分、专性寄生在活细胞内的分子病原体。目前已知的最小可传染致病因子,只在植物中发现。拟病毒:一类包裹在真病毒粒中有缺陷的类病毒。卫星病毒:一类基因组缺陷、必须依赖某形态较大的专一辅助病毒才能复制和表达的小型伴生病毒。朊病毒:又成蛋白侵染子,一类不含核酸的传染性蛋白质,因能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的感应性构想变化,从而可使宿主致病。病毒杀虫剂:利用病毒制剂进行生物治虫。病毒的一般大小如何?与原核生物和真核生

14、物细胞有何大小上的差别?最大的病毒和最小的病毒(不计亚病毒因子)是什么?绝大多数病毒都是能通过细菌滤器的微小颗粒,直径大多数在100nm(20200nm)上下。病毒、细菌和真菌直径比约为1:10:100。最大的病毒为直径达400nm的拟菌病毒和另一种海洋原生动物病毒,最小的病毒之一是猪圆环病毒和长尾鹦鹉喙羽病毒。试图示并简介病毒的典型构造。病毒粒,也称病毒粒子,专指成熟的、结构完整的和有感染性的单个病毒。其基本成分是核酸和蛋白质。核酸位于他的中心,称核心,蛋白质包围在核心周围,形成了衣壳。衣壳是病毒粒的主要支架结构和抗原成分,有保护核酸等作用。核心和衣壳合称核衣壳,它是任何病毒都具有的基本结构

15、。试以烟草花叶病毒为代表,图示并简述螺旋对称型杆状病毒的典型构造。TMV外形呈直杆状,衣壳含2130个皮鞋状的蛋白亚基。亚基以逆时针方向作螺旋排列,共围130圈。其ssRNA以相同的螺距盘旋于蛋白质外壳内,每3个核苷酸与1个蛋白质亚基相结合,因此,每圈为49个核苷酸。病毒的核酸有哪些类型?试举例并列表比较之。期中还有哪几种类型目前还未找到代表性病毒?今后前景如何?核酸类型病毒代表动物病毒植物病毒微生物病毒DNAssDNA线状细小病毒H-1等玉米条纹病毒核盘菌SsHADV-1病毒环状待发现待发现M13噬菌体dsDNA线状腺病毒待发现E.coli的T系环状猿猴病毒40花椰菜花叶病毒PM2噬菌体RN

16、AssRNA线状艾滋病毒豇豆花叶病毒RNA噬菌体dsRNA环状呼肠孤病毒植物伤流病毒各种真菌病毒何谓一步生长曲线?它分几期,各期有何特点?一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体增殖规律的实验曲线称作一步生长曲线或一级生长曲线。潜伏期 从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。又可分为隐晦期和胞内累积期。裂解期 从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。平稳期 指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。 裂解量 每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数什么是溶源菌,它有何特点?如何检出溶源菌?溶源菌是一类被温和噬菌体感染后能相互长期共存,一般不会出现迅

17、速裂解的宿主细菌。特点:自发裂解,诱发裂解,免疫性,重复性,溶源转变检测:将少数的溶源菌与大量的敏感性指示菌相混合,再与琼脂性培养基混合后制一个平板,经培养后溶源菌就长成菌落。由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体会引起自发裂解,其释放的噬菌体可不断侵染溶源性细菌菌落周围的指示菌菌落,于是就形成一个个中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈围着这种独特噬菌体。第四章 微生物的营养和培养氨基酸自养微生物:能把尿素、铵盐、硝酸盐甚至氮气等简单氮源自行合成所需要的一切氨基酸的一类微生物。生长因子:一类对调节微生物正常代谢所必须,但不能用简单的碳、氮源自行合成的微量有机物。微量元素:凡所需浓度在10-610

18、-8mol/L范围内的元素。碳氮比:碳源与氮源含量之比。严格来讲,C/N比应该是指在微生物培养基中所含的碳源中的碳原子摩尔数与氮源中的氮原子摩尔数之比。单细胞蛋白:是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。半固体培养基:指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。鉴别性培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂。什么叫生长因子?它包括哪几类化合物?微生物与生长因子的关系有哪几类?试举例加以说明。生长因子是一类

19、对调节微生物正常代谢所必须,但不能用简单的碳、氮源自行合成的微量有机物。广义来讲包含维生素、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、C4C6的分支或直链脂肪酸,有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需的氨基酸在内。生长因子自养型微生物:不需要从外界吸收任何生长因子,如E.coli生长因子异养型微生物:需要从外界吸收多种生长因子才能维持正常生长,如各种乳酸菌。生长因子过量合成型微生物:能合成并大量分泌某些维生素等生长因子,如阿舒假囊酵母。什么叫碳氮比?试对5种分子式清楚的常用氮源按其含氮量的高低排一个次序。碳氮比,即碳源与氮源含量之比。严格来讲,C/N比应该是指在微生物培养基中所含的碳源中的碳原子摩尔数与氮

20、源中的氮原子摩尔数之比。氮源名 : NH3 CO(NH2)2 NH4NO3 (NH4)2CO3 (NH4)2SO4含氮/% : 82 46 35 29.2 21设计培养基的4个原则、4个方法是什么?你能提出一个更好的原则和方法吗?什么是半固体培养基?它在微生物学研究中有何应用。4个原则:目的明确;营养协调;理化适宜;经济节约。4个方法:生态模拟;借鉴文献;精心设计;实验比较。什么叫鉴别性培养基?试以EMB为实例分析其具有鉴别性功能的原因。鉴别性培养基,一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。EMB培养基中的

21、伊红和美兰两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G细菌。在低酸度下,这两种染料会结合并形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。如E.coli能强烈分解乳糖而产生大量混合酸,菌体表面带H+,故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美兰结核,故使菌落染上深紫色,且从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。第五章 微生物的新陈代谢还原力:一些物质具有的较强的还原性,物质利用还原性可以发生多种生化反应,从而驱动生物生理过程ED途径:存在于某些缺乏完整EMP途径的微生物中的一种替代途径,为微生物所特有。细菌酒精发酵:丙酮酸脱羧成乙醛,乙醛又可进一步被NADH2还原为乙醇,经ED途径发酵生存乙醇的方法。硝酸盐呼吸:在无

22、氧条件下,某些兼性厌氧微生物利用硝酸盐作为呼吸链的最终氢受体,把它还原成亚硝酸、NO、N2O直至N2的过程。 硫呼吸:以无机硫作为呼吸链的最终氢受体并产生H2S的生物氧化作用。同型酒精发酵:酿酒酵母能够通过EMP途径进行同型酒精发酵,即由EMP途径代谢产生的丙酮酸经过脱羧放出CO2,同时生成乙醛,乙醛接受糖酵解过程中释放的NADH+H+被还原成乙醇。异型乳酸发酵的双歧杆菌途径:Stickland反应:以一种氨基酸作为底物脱氢,而另一种氨基酸作为氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型。紫膜:为盐生盐杆菌和红皮盐杆菌等嗜盐性细菌在厌氧条件下和明亮处生长时于细胞膜上形成的斑状紫色膜。乙醛酸循环:是T

23、CA循环的一条回补途径,可使TCA循环不仅具有搞笑产能性,而且还兼有可为许多生物合成反应提供有关中间代谢物的功能。总反应:2丙酮酸琥珀酸+2CO2。固氮微生物:联合固氮菌:指必须生活在植物根际、叶面或动物肠道等处才能进行固氮的微生物。固氮酶的呼吸保护:指固氮菌科的菌种能以极强的呼吸作用迅速将周围环境中的氧消化掉,使细胞周围微环境处于低氧状态,借此保护固氮酶。“Park”核苷酸:即UDP-N-乙酰细胞壁酸五肽,它的合成共分四步,都需UDP作糖载体。类菌体:根瘤菌在皮层细胞内分裂增殖,分化而膨大为形状各异、不能繁殖、但有很强固氮活性的一类菌。组成酶:是细胞内一直存在的酶,它的合成仅受遗传物质控制即

24、受内因控制。诱导酶:是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶。试述ED途径在微生物生命活动中的功能,并说出它与人类生产实践的关系。试列表比较同型乳酸发酵和异型乳酸发酵间的差别。类型途径产物/1葡萄糖产能/1葡萄糖菌种代表同型EMP2乳酸2ATP德氏乳酸菌异型HMP1乳酸1乙醇1CO21ATP发酵乳杆菌1乳酸1乙酸1CO22ATP短乳杆菌1乳酸1.5乙酸2.5ATP两岐双歧杆菌试列表比较细菌酒精发酵与酵母酒精发酵的特点和优缺点。Stickland反应存在于哪些微生物中?反应的生化机制如何?多见于厌氧的梭菌中,如生孢梭菌、肉毒梭菌、斯氏梭菌、双酶梭菌等。青霉素为何只

25、能抑制代谢旺盛的细菌?其制菌机制如何?原因:青霉素抑制肽聚糖的合成过程,形成破裂的细胞壁,代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成,因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制:青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转肽作用。什么是乙醛酸循环?试述它在微生物生命活动中的重要生理功能。它是TCA循环的一条回补途径,可使TCA循环不仅具有高效产能功能,而且还兼有可为许多重要生物合成反应提供有关中间代谢物的功能。试列表比较固氮酶两个组分的特点。比较项目固二氮酶(组分)固二氮酶还原酶(组分)蛋白亚基数相对分子质量Fe原子数不稳态S原子数Mo原子数Cys的SH基活性中心功能对O2明感性4(2大2小)22万左右3

26、02823244铁钼辅因子络合、活化和还原N2较敏感2(相同)6万左右44012电子活化中心(Fe4S4)传递电子到组分上极敏感第六章 微生物的生长及其控制平板菌落计数法:把稀释后的一定量菌样通过浇注琼脂培养基或在琼脂平板上涂布的方法。Cfu(菌落形成单位):是指在琼脂平板上经过一定温度和时间培养后形成的每一个菌落,是计算细菌或霉菌数目的单位。生长曲线:定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线。指数期(对数期):在生长曲线中,紧接着延滞期的一段细胞数以几何级数增长的时期。生长限制因子:凡处于较低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的某营养物。最适生长温度:某菌分裂代时最短或生长速率最高时

27、的培养温度。专性好氧菌:必须有较高浓度分子氧的条件下才能生长,它们有完整的呼吸链,以分子氧为最终氢受体,具有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶。微好氧菌:只能在较低的氧分压下才能正常生长的微生物。也是通过呼吸链并以氧为最终氢受体而产能。污染:外来物质或能量的作用,导致生物体或环境产生不良效应的现象。灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。巴氏消毒法:是由巴斯德发明的一种低温湿热灭菌法,一般在6085下处理30min至1.5s,主要用于牛奶、果酒等液态风味食品的消毒。热死时间:指在某一温度下,杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最短时间。过滤除菌法:用物理阻留的方法

28、将液体或空气的细菌除去,以达到无菌目的。抗代谢药物:又称代谢拮抗物、代谢类似物,是指在结构上与生物体所必需的代谢物相似,可以与正常代谢途径中特定的酶发生竞争性反应,从而阻碍酶的功能、干扰代谢的正常进行的物质。磺胺药:一类具有抑菌活性的化学合成药,为对氨基苯磺酰胺的衍生物,磺胺药对细菌主要是抑制其繁殖,一般无杀菌作用。抗菌谱:各种抗生素有其不同的制菌范围。抗药性(耐药性):系指微生物、寄生虫以及肿瘤细胞对于化疗药物作用的耐受性,耐药性一旦产生,药物的化疗作用就明显下降。平板菌落计数法有何优缺点?试对浇注平板法和涂布平板法作一比较。优点:1.记录的都是活菌;2.易操作;缺点:1.微生物营养条件不一

29、致,培养基并不能是所有微生物都生长;2.稀释度不够大,可能不会形成单个菌落,不易计数;指数期有何特点?处于此期的微生物有何应用?特点:(1) 生长速率常数R最大,即代时最短;(2)细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特征等比较一致;(3)酶系活跃,代谢最旺盛。应用:指数期的微生物具有整个群体的生理特性一致、细胞各成分平衡增长和生长速率恒定等优点。(1)用作代谢、生理等研究的良好材料;(2)是增殖噬菌体的最适宿主;(3)是发酵工业中用种子的最佳材料。(4)进行染色、形态观察等的良好材料。什么是高密度培养?如何保证好氧菌或兼性厌氧菌活得高密度培养。是指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养1

30、0倍以上的生长状态或培养技术。方法主要有:1选取最佳培养基成分和各成分含量2补料3提高溶解氧的浓度4防止有害代谢产物的生成。比较灭菌、消毒、防腐和化疗的异同,并举例。比较项目灭菌消毒防腐化疗处理因素处理对象微生物类型对微生物作用实 例强理、化因素任何物体内外一切微生物彻底杀灭加压蒸气灭菌,辐射灭菌,化学杀菌剂理、化因素生物体表,酒、乳等有关病原体杀死或抑制70酒精消毒,巴氏消毒法理、化因素有机质物体内外一切微生物抑制或杀死冷藏,干燥,渍,盐腌,缺氧,化学防腐剂化学治疗剂宿主体内有关病原体抑制或杀死抗生素,磺胺药,生物药物素抗生素对微生物的作用机制可分为几类?试各举一例。名称及类型作用机制作用后

31、果抑制细胞壁合成 青霉素引起细胞壁降解溶葡球菌素干扰细胞膜功能 短肽杆菌抑制蛋白质合成 四环素抑制DNA合成狭霉素C抑制DNA复制丝裂素酶抑制RNA转录放线菌D抑制RNA合成利福平抑制肽尾与肽桥间的转肽作用水解肽尾和分解胞壁酸-葡糖胺链使氧化磷酸化解偶联、与膜结合与30S核糖体结合抑制黄苷酸氨基酶使DNA的互补链相结合与DNA中的鸟嘌呤结合与RNA聚合酶结合组织糖肽链之间的交联溶解葡糖球菌细胞内物质外漏抑制氨基酰-tRNA与核糖体结合因阻止GMP合成而抑制DNA抑制复制后的分离阻止依赖于DNA的RNA合成阻止RNA合成第七章 微生物的遗传变异和育种变异:生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗

32、传物质结构或数量的改变,亦即遗传型改变。饰变:指外表的修饰性改变,亦即一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、翻译水平上的表型变化。操纵子:指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称。转录的功能单位。很多功能上相关的基因前后相连成串,由一个共同的控制区进行转录的控制,包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列。质粒消除:含质粒的细胞在正常的培养基上受理化因子处理时,由于其复制受抑而核染色体的复制仍继续进行,从而引起子代细胞中不带质粒。Col质粒:因首先发现于大肠杆菌中而得名,该质粒含有编码大肠杆菌素的基因,大肠杆菌素是一种细菌蛋白,只杀死近缘且不含Col质粒的菌株,而宿主不受其产生的

33、细菌素的影响。细菌素:由质粒编码的蛋白质,且不像抗生素那样具有很广的杀菌谱。降解性质粒:基因突变:泛指细胞内遗传物质的分子结构或数量突然发生的可遗传变化,可自发或诱导产生。营养缺陷型:某一野生型菌株因发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸等能力,因而不能再在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。条件致死突变型:某菌株或病毒经基因突变后,在某种条件下可正常地生长、繁殖并呈现出其固有的表型,而在另一种条件下却无法生长、繁殖。正向突变:由原始的野生型基因变异为突变型基因的过程称为正向突变。回复突变:突变体经过第二次突变又完全地或部分地恢复为原来的基因型和表现型。点突变:仅影响一对碱基的

34、突变。转座因子:具有转座作用的一段DNA序列。自发突变:生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变。嘧啶二聚体:光复活作用:把经UV照射后的微生物立即暴露于可将光下时,就可出现明显降低其死亡率的现象。诱变育种:利用物理、化学等诱变剂处理均匀而分散的微生物细胞群,在促进其突变率显著提高的基础上,采用简便、快速和高效的筛选方法。艾姆斯试验:一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效方法。出发菌株:用于育种的原始菌株,选用合适的出发菌株有利于提高育种效率。表型延迟:遗传型已突变,但表型却要经染色体复制、分离和细胞分裂后才表现出来的现象。基本培养基:仅能满足某微生物的

35、野生型菌株生长所需要的最低成分的组合培养基。完全培养基:凡可满足某些微生物一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基。基因重组:两个独立基因组内的遗传基因,通过一定的途径转移到一起,形成新的稳定基因组的过程。影印平板法:将诱变剂处理后的细胞群涂布在一完全培养基平板上,经培养后,使其长出许多菌落。转化子:通过转化方式而形成的杂种后代。感受态:受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。转染:用提纯的病毒核酸去感染其宿主细胞或其原生质体,可增值出一群正常病毒后代的现象。转导:通过缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞中的小片段DNA携带到转导子:由转导作用而获得部分新性状的重组细胞。完全转

36、导:也称普遍转导,通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小段DNA进行误包,而将其遗传性状传递给受体菌的现象。流产转导:经转导噬菌体的媒介而获得了供体菌DNA片段的受体菌。局限转导:通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者的基因组整合、重合,形成局限转导子的现象。高频转导:在局限转导中,若对双重溶源菌进行诱导,就会产生含50%左右的转导子。双重溶源菌:同时感染有正常噬菌体和缺陷噬菌体的受体菌。结合子:通过接合而获得新遗传性状的受体细胞。Hfr菌株:指细菌接合时,将染色体以高频率传递给雌性菌(F-菌)而形成重组体的雄性菌。F因子转导(性导):以F质粒来传递供体

37、基因的方式。原生质体融合:通过人为方法,使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。衰退:某纯种微生物群体中的个别个体由于发生自发突变的结果,而使该物种原有一系列生物学性状发生衰退性的量变或质变的现象。复壮:(狭义)在菌株已发生衰退的情况下,通过纯种分离和测定典型性状、生产性能等指标,从已衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体,以达到恢复原菌株固有性状的相应措施;(广义)在菌种的典型特征或生产性状尚未衰退前,就经常有意识的采取纯种分离和生产性状的测定工作,以期从中选择到自发的正变个体。经典转化实验噬菌体感染实验植物病毒的重建实验实验者及其时间英 格里菲

38、斯 1928A.D.Hershey和M.Chase 1952H.Fraenkel-Conrat 1956模式菌种肺炎链球菌T2噬菌体含RNA的烟草花叶病毒重要意义RNA、蛋白质和荚膜多糖均不引起转化,而DNA却能引起转化。如果用DNA酶处理DNA后,则转化作用丧失。可见在噬菌体的生活史中,只有DNA是联系亲代和子代的物质。而母本噬菌体的蛋白质外壳则留在细菌的荚膜外。在RNA病毒中,遗传的物质也是核酸,只不过是RNA。为何证明核酸是生物遗传物质基础的3个实验都不约而同地选择了微生物,尤其是病毒作为其模式微生物?1.病毒结构简单,一般只有蛋白质外壳和核酸,有的甚至连蛋白质外壳都没有2.高等生物的核

39、酸与蛋白质缠绕成染色体,而病毒核酸没有3.病毒繁殖速度快,可在短时间内得出实验结果诱变育种的基本方法有哪些?关键是什么?何故?关键是出发菌株的选择和诱变方法的选择。因为这些都能决定诱变的效果和方向。试述用Ames法检测微量致癌、致突变、致畸变物质的理论依据、方法要点和优缺点。方法是在含待测可疑“三致”物质的试样中加入鼠肝匀浆液,经过一段时间保温后吸入滤纸片中然后将滤纸片放置于上述平板中央经培养后,出现3种情况:a、在平板上无大量菌落产生,说明式样中不含诱变剂;b、在纸片周围有一抑制圈,其外周出现大量菌落,说明式样中有某种高浓度的诱变剂的存在c、在纸片周围长有大量菌落,说明试样中有浓度适当的诱变

40、剂存在。要点:1、实验中要先加入鼠肝匀浆液保温2、所用的菌株除需要用营养缺陷性外,还应是DNA修复酶的缺陷型 优点:简便、快速、准确和费用省 什么是高通量微生物筛选法?试分析此法的创新点在何处。其基本方法是以96孔塑料培养板作大量培养的容器,每孔可先加入2ml培养液,再用多点(12点)接种器快速接种纯菌株,每小时约可接40000个不同变异株,每天可筛选2万3万株,经适当培养后,可快速对每孔中的代谢产物进行自动检测,工效极高。试用表解法概括一下筛选营养缺陷型菌株的主要步骤和方法。第一步,诱变剂处理;第二步,淘汰野生型:在诱变后的存活个体中,营养缺陷型的比例一般较低。通过的抗生素法或菌丝过滤法就可

41、淘汰为数众多的野生型菌株即浓缩了营养缺陷型的目的。第三步:检出缺陷型,具体方法很多。第四步:鉴定缺陷型:可借生长谱法进行。菌种衰退的原因是?如何达到菌种复壮?如何区别菌株究竟是衰退还是发生污染或饰变?菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象,称为菌种衰退。菌种衰退不是突然发生的,而是从量变到质变的逐步演变过程。菌种衰退的主要原因是有关基因的负突变。达到菌种复壮的方法:a.纯种分离 b.通过宿主体内生长进行复壮 c.淘汰衰退个体区分三者的方法如下:(1)衰退可通过测定典型性状(如形态,芽孢,伴胞晶体等)和生产性能(衰退的菌株大多发生负突变,

42、产量性状大大下降)等,并可进一步分离出该菌株的纯种并进一步鉴别。(2)饰变可通过将菌株用等渗溶液清洗后,再传代23次,观察典型性状是否发生“稀释”或与原菌株的性状是否一致。(3)污染可通过纯种分离和随后的鉴别培养基进行鉴定等来判断。第八章 微生物的生态贫营养细菌:存在于有机物含量低的水体中 ,只能在低浓度的有机质的培养基上才可正常生长的异养微生物。水体自净作用:存在于快速流动、氧气充足的水体中,主要指生物学和生物化学的作用,包括好氧菌对有机物的降解作用,原生动物对细菌的吞噬作用,噬菌体对宿主的裂解作用,藻类对无机元素的吸收作用,以及浮游生物和一系列后生生物通过食物链对有机物的摄取和浓缩的作用。

43、大肠菌群数:指任何可发酵乳糖产酸产气的G 、杆状、无芽孢、兼性厌氧的肠道细菌。黄曲霉毒素:主要由黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物,是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。嗜极菌(极端微生物):依赖于高毒,低温,高温等极端环境才能正常生长繁殖的微生物。宏基因组:共生微生物群的总基因组,其中包括330余万个编码基因。条件致病菌;又称为机会致病菌,在某些特定条件下可治病的细菌。益生元(双歧因子:专指一类人体不能消化的低聚糖类食物成分,如寡果糖、寡半聚糖等。根际微生物:又称根圈微生物,指生活在根系邻近土壤,依赖根系的分泌物、外渗物和脱落细胞而生长,一般对植物发挥有益作用的正常菌群。混

44、菌培养(混合培养):这是一种在深入研究微生物纯培养基础上的人工“微生物生态工程”,指两种或数种微生物混在一起培养,以获得更好效果的培养方法。微生物杀虫剂(生物农药):包括农用抗生素和活体微生物农药,是利用微生物或其代谢产物来防治危害农作物的病、虫、草、鼠害来促进作物生长。包括以菌治虫、以菌制菌、以菌制草等。硝化作用:指氨态氮经硝化细菌的氧化,转变为硝酸态氮的过程。反硝化作用:又称脱氮作用,指硝酸盐转化为气态氮化物(N2和N2O)的作用。富营养化:指水体中因氮、磷等元素含量过高而导致水体表层蓝细胞和藻类过度生长繁殖的现象。水华:指发生在池、河、江、湖或水库等淡水税务中因富营养化而引起税务藻类过度

45、生长繁殖的现象。生化需氧量(BOD):是水中有机物含量的一个间接指标,一般指在1L污水或待测水样中所含的一部分易氧化的有机物,当微生物对其氧化分解时所消耗的水中溶解氧毫克数。化学需氧量(COD):是表示水体中有机物含量的一个间接指标,指1L污水中所含的有机物用强氧化剂将它氧化后所消耗氧的毫克数。持久性有机污染物(POPs):指人类合成的能持久存在于环境中、通过生物食物链(网)累积、并对人类健康造成有害影响的化学物质。生物质:指由光合作用直接或间接地把日光能转化成的有机物,包括植物、动物和微生物体以及它们的加工产物和残余在内的一切有机物。复习思考题:1.为什么说土壤是人类最丰富的菌种资源库?如何从中筛选所需要的菌种?因为土壤具备了各种微生物生长发育所需要的营养、水分、空气、酸碱度、渗透压和温度等条件,所以成了微生物生活的良好条件。可以说,土壤是微生物的“天然培养基”,对人类来说,则是最丰富的菌种资源库。先取土样,然后提纯稀释,置于选择培养基上,能存活的为需要的菌种。2.食品为何易发生霉腐?如何预防?因食品在加工、包装、运输、贮藏和销售过程中,不可能做到严格的灭菌和无菌操作,因而会含有或污染有各种微生物,它们在合适的温度、湿度条件下,就会迅速生长繁殖,引起食物变质、霉腐甚至产生各种毒素。为防

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